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1、水中大肠杆菌群书的监测（发酵法）水中大肠杆菌群书的监测（发酵法）一、 试验目的：试验目的：1. 了解和学习水中大肠杆菌的测定原理和测定意义。2. 学习和掌握水中大肠杆菌的监测方法。 二、试验原理：试验原理：水的微生物学的检验，特别是大肠杆菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。国家饮用水的标准规定饮用水中大肠杆菌群书每升中不超过 3 个，细菌总数每毫升不超过 100 个。水中大肠杆菌的检验方法，常用多管发酵发和滤膜法。多管发酵发可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。滤膜法仅用于自来水和深井水。操作简洁快速，但不适用于杂质较多，易于阻塞滤孔的
2、水样。三、三、 试验材料：试验材料：1. 培养基：乳糖蛋白胨培养基，伊红美蓝培养基2. 器材：灭菌三角瓶、无菌平皿、无菌吸管、无菌试管等。四、四、 试验内容试验内容第一天：1. 水样的采集自来水洗将自来水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌，在开放水龙头取水流 5，以灭菌山角瓶接水取样以备分析。2. 用发酵法检查大肠杆菌（1）生活饮用水的检验初步发酵试验：在 2 个各装有 50的 3 倍乳糖蛋白胨培养液的三角瓶中，以无菌操作各自加水样 10。摇匀后，37培养 24第二天：平板分离：经 24培养后。特产酸产气及只产酸的发酵管，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板（EMD 培养基上），37培养 1824。大肠杆菌群在 EMD 平板上，菌落呈紫黑色，具有或略带或不带有金属光泽，或者呈淡紫红色，仅中心颜色较深，挑取符合上述特征的菌落进行涂片，革兰氏染色，镜检。第三天 ：复发酵试验：将革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌落的剩余部分接于单倍乳糖发酵管中，为防止遗漏，每管可接种来自同一初发酵管的平板上同一类型菌群 13 个，37培养 24，如果产酸又产气者，即证实有大肠菌群存在。第四天 ：报告：根据证实有大肠菌群存在的复发酵管的阳性管，查附录 1 或 2，报告每升水样品中大肠菌群数（MPN）五、五、 思考题思考题记录试验结果，并对所测样品作出评价。
