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1、实验五 微生物大小的测定实验五实验五 微生物大小的测定微生物大小的测定一、实验目的一、实验目的1.1. 学会测微尺的使用和计算方法。学会测微尺的使用和计算方法。2.2. 学习用测微尺对细菌和酵母菌的测量方法。学习用测微尺对细菌和酵母菌的测量方法。二、实验内容：二、实验内容：1 1认识测微尺，学习目镜测微尺的标定。认识测微尺，学习目镜测微尺的标定。2 2测定细菌和酵母菌菌体的大小。测定细菌和酵母菌菌体的大小。三、实验材料和用具三、实验材料和用具金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和酵母菌的菌种斜面。金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和酵母菌的菌种斜面。香柏油、擦镜液。香柏油、擦镜液。显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦
2、镜纸。显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。四、操作步骤四、操作步骤l测微尺的构造测微尺的构造 显微镜测微尺是由目镜测微尺和镜台接物测微尺组成，目镜测微尺是一显微镜测微尺是由目镜测微尺和镜台接物测微尺组成，目镜测微尺是一块圆形玻璃片，其中有精确的等分刻度，在块圆形玻璃片，其中有精确的等分刻度，在 5mm 刻尺上分刻尺上分 50 份。目镜测微尺每格实际代表的长份。目镜测微尺每格实际代表的长度随使用接目镜和接物镜的放大倍数而改变，因此在使用前必须用镜台测微尺进行标定。度随使用接目镜和接物镜的放大倍数而改变，因此在使用前必须用镜台测微尺进行标定。镜台测微尺为一专用中央有精确等分线的载玻片，一般将长
3、为镜台测微尺为一专用中央有精确等分线的载玻片，一般将长为 1mm 的直线等分成的直线等分成 100 个小格，个小格，每格长每格长 0.0lmm 即即 10m，是专用于校正目镜测微尺每格长度的。，是专用于校正目镜测微尺每格长度的。2目镜测微尺的标定目镜测微尺的标定 把目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上，使有把目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上，使有刻度的一面朝下。将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察，刻度的一面朝下。将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目
4、镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平调焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，并使两尺左边的一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合的直线。行，并使两尺左边的一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合的直线。3计算方法计算方法标定公式：标定公式：目镜测微尺每格长度（目镜测微尺每格长度（m）=两条重合线间镜台测微尺的格数两条重合线间镜台测微尺的格数10两条重合线间目镜测微尺的格数两条重合线间目镜测微尺的格数例如，目镜测微尺例如，目镜测微尺 2020 个小格等于镜台测微尺个小格等于镜台测微尺 3 3 小格，已知镜台测微尺每格为小格，已知镜台测微尺每格为 10
5、m10m，则，则 3 3 小小格的长度为格的长度为 310=30m310=30m，那么相应地在目镜测微尺上每小格长度为，那么相应地在目镜测微尺上每小格长度为 31020=1.5m31020=1.5m。用以上。用以上计算方法分别校正低倍镜、高倍镜及油镜下目镜测微尺每格实际长度。计算方法分别校正低倍镜、高倍镜及油镜下目镜测微尺每格实际长度。4 4菌体大小的测定菌体大小的测定 将镜台测微尺取下，分别换上大肠杆菌及金黄色葡萄球菌玻片标本，先将镜台测微尺取下，分别换上大肠杆菌及金黄色葡萄球菌玻片标本，先在低倍镜和高倍镜下找到目的物，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。先量出菌体的长在低倍镜和高倍镜下
6、找到目的物，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。先量出菌体的长和宽占目镜测微尺的格数，再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。并详细记录于表中。和宽占目镜测微尺的格数，再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。并详细记录于表中。例如，目镜测微尺在这架显微镜下，每格相当于例如，目镜测微尺在这架显微镜下，每格相当于 1.5m1.5m，测量的结果，若菌体的平均长度相，测量的结果，若菌体的平均长度相当于目镜测微尺的当于目镜测微尺的 2 2 格，则菌体长应为格，则菌体长应为 31.5m=3.0m31.5m=3.0m。一般测量菌体的大小，应测定一般测量菌体的大小，应测定 10102020 个菌体
7、，求出平均值，才能代表该菌的大小。个菌体，求出平均值，才能代表该菌的大小。五、注意事项五、注意事项1 1镜台测微尺的玻片很薄，在标定油镜头时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。镜台测微尺的玻片很薄，在标定油镜头时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。2 2标定目镜测微尺时要注意准确对正目镜测微尺与镜台测微尺的重合线。标定目镜测微尺时要注意准确对正目镜测微尺与镜台测微尺的重合线。六、实验报告六、实验报告1 1目镜测微尺标定结果：目镜测微尺标定结果：低倍镜下低倍镜下 倍目镜测微尺每格长度是倍目镜测微尺每格长度是 mm。高倍镜下高倍镜下 倍目镜测微尺每格长度是倍目镜测微尺每格长度是 m
8、m。油镜下油镜下 倍目镜测微尺每格长度是倍目镜测微尺每格长度是 mm。2 2菌体大小测定结果：菌体大小测定结果：填写下表填写下表七、问题和思考七、问题和思考1为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜微尺进行标定？为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜微尺进行标定？2若目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变物镜，那么目镜测微尺每格所测量的镜台上的菌若目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变物镜，那么目镜测微尺每格所测量的镜台上的菌体细胞的实际长度（或宽度）是否相同？为什么？体细胞的实际长度（或宽度）是否相同？为什么？大肠杆菌测定结果金黄色葡萄球菌的直径大小测定
9、结果目镜测微尺格数实际长度菌号宽长宽长目镜测微尺格数 实际直径/m1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 均值试与己知的菌种大小作一比较是否一致？为何？试与己知的菌种大小作一比较是否一致？为何？一、实验目的1. 学会测微尺的使用和计算方法。2. 学习用测微尺对细菌和酵母菌的测量方法。二、实验内容：1认识测微尺，学习目镜测微尺的标定。2测定细菌和酵母菌菌体的大小。三、实验材料和用具金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和酵母菌的菌种斜面。香柏油、擦镜液。显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。四、操作步骤l测微尺的构造 显微镜测微尺是由目镜测微尺和镜台接物测微尺组成，目镜测微尺是一块圆形玻璃片，其中有精确的
10、等分刻度，在 5mm 刻尺上分 50 份。目镜测微尺每格实际代表的长度随使用接目镜和接物镜的放大倍数而改变，因此在使用前必须用镜台测微尺进行标定。镜台测微尺为一专用中央有精确等分线的载玻片，一般将长为 1mm 的直线等分成 100 个小格，每格长 0.0lmm 即 10m，是专用于校正目镜测微尺每格长度的。2目镜测微尺的标定 把目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上，使有刻度的一面朝下。将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，并使两尺左边的一条线重合，向右寻找另外一
11、条两尺相重合的直线。3计算方法标定公式：目镜测微尺每格长度（m）=两条重合线间镜台测微尺的格数10两条重合线间目镜测微尺的格数例如，目镜测微尺 20 个小格等于镜台测微尺 3 小格，已知镜台测微尺每格为 10m，则 3 小格的长度为 310=30m，那么相应地在目镜测微尺上每小格长度为 31020=1.5m。用以上计算方法分别校正低倍镜、高倍镜及油镜下目镜测微尺每格实际长度。4菌体大小的测定 将镜台测微尺取下，分别换上大肠杆菌及金黄色葡萄球菌玻片标本，先在低倍镜和高倍镜下找到目的物，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。先量出菌体的长和宽占目镜测微尺的格数，再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体
12、的长和宽。并详细记录于表中。例如，目镜测微尺在这架显微镜下，每格相当于 1.5m，测量的结果，若菌体的平均长度相当于目镜测微尺的 2 格，则菌体长应为 31.5m=3.0m。一般测量菌体的大小，应测定 1020 个菌体，求出平均值，才能代表该菌的大小。五、注意事项1镜台测微尺的玻片很薄，在标定油镜头时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。2标定目镜测微尺时要注意准确对正目镜测微尺与镜台测微尺的重合线。六、实验报告1目镜测微尺标定结果：低倍镜下 倍目镜测微尺每格长度是 m。高倍镜下 倍目镜测微尺每格长度是 m。油镜下 倍目镜测微尺每格长度是 m。2菌体大小测定结果：填写下表七、问题和思考1为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜微尺进行标定？2若目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变物镜，那么目镜测微尺每格所测量的镜台上的菌体细胞的实际长度（或宽度）是否相同？为什么？大肠杆菌测定结果金黄色葡萄球菌的直径大小测定结果目镜测微尺格数实际长度菌号宽长宽长目镜测微尺格数 实际直径/m12345678910均值试与己知的菌种大小作一比较是否一致？为何？
