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1、专题专题 2 课题课题 3:分解纤维素的微生物的分离导学案:分解纤维素的微生物的分离导学案1简述纤维素酶的种类及作用简述纤维素酶的种类及作用2从土壤中分离出分解纤维素的微生物从土壤中分离出分解纤维素的微生物 3讨论分解纤维素的微生物的应用价值。讨论分解纤维素的微生物的应用价值。一、纤维素与纤维素酶 1纤维素的化学组成: 三种元素,是一种 糖。 2纤维素的分布: 是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木 材、作物秸秆等也富含纤维素。 3纤维素酶的作用:纤维素酶是一种 ,一般认为它至少包括三种组分, 即 酶、 酶 酶,前两种酶使纤维素分解成 ,第三种酶将纤维二糖分解成 。 二、纤维素分解菌的筛
2、选 1筛选方法: 染色法。 2筛选原理:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ,但并不和水 解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形 成,出现以 为中心的透明圈,我们可以通过 来筛选纤维素分 解菌。三、试验设计土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案:分解纤维素的微生物的分离的试验流程 、 、 、 、 1土壤取样:采集土样时,应选择富含 的环境。 2选择培养: 阅读资料二“选择培养基” ,回答以下三个问题: 思考 1纤维素分解菌选择培养基属于 培养基,原因是什么?。思考 2培养基选择作用机制是什么?思考 3若设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是什
3、么?(1)目的:增加纤维素分解菌的 ,以确保能够从样品中分离到所需要的微 生物。 (2)制备选择培养基:参照课本旁栏中的比例配制。(3)选择培养:称取土样 20 g,在无菌条件下加入装有 30mL 培养基的锥形瓶中,将锥形 瓶固定在 上,在一定温度下振荡培养 12 d,直至培养液变 。 也可重复选择培养。 3. 梯度稀释:依次将培养液稀释 101107倍。思考是如何操作的?4. 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上5. 刚果红染色法:挑选产生 的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。刚果红染色法:常用的刚果红染色法有两种即 。阅读资料三“刚果红染色法” ,填表比较两种染色法的各自的优缺点学学 习习
4、 目目 标标自自 主主 学学 习习是 、 。 阅读资料三“刚果红染色法” ,填表比较两种染色法的各自的优缺点:思考 5为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 四:结果分析与评价四课题延伸1.为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行 实验,纤维素酶 的发酵方法有 发酵和 发酵。2.纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行 定量测定。思考:此流程图与样品的稀释和稀释液的取样培养流程图有何异同?为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌?将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深? 典例精析 【例 1】纤维素酶可以将下列哪种物质分解( ) A牛肉片 B鱼片
5、C滤纸条 D塑料条【例 2】在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是 ( )A分解尿素的细菌 B硝化细菌 C分解纤维素的细菌 D乳酸菌【例 3】本实验关于选择培养目的叙述正确的是( )A可以增加纤维素分解菌的浓度 B可以减少纤维素分解菌的浓度C所用培养基是固体培养基 D所用培养基是平板培养基1用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( ) A、未接种的选择培养基 B、未接种的牛肉高蛋白胨培养基 C、接种了的牛肉高蛋白胨培养基 D、接种了的选择培养基 2从土壤中分离获得某种微生物的步骤是( )土壤取样 梯度稀释 选择培养 涂布培养 筛选菌株A BC D 3纤维素分解菌的选择培养基有选
6、择作用,原因在于有( )ANaNO3 BKClC酵母膏 D纤维素粉 4分离土壤中纤维素分解菌所用到的方法是( )稀释倒平板法 涂布平板法 单细胞挑取法 选择培养基分离A B C D 一、选择题染色法染色法优点优点缺点缺点方法一方法一方法二方法二探究互动探究互动课课 堂堂 检检 测测课课 后后 作作 业业1下列材料中纤维素含量最高的是( ) A杨树 B小麦 C玉米 D棉花 2纤维素酶能够分解( ) A纤维素的微生物 B淀粉的微生物 C纤维素 D淀粉 3刚果红能与哪项物质形成红色复合物( )A纤维二糖 B纤维素 C葡萄糖 D麦芽糖 4寻找纤维素分解菌应到( ) A湿润的环境中 B富含纤维素的环境中
7、 C富含无机盐的环境中 D池塘中 5纤维素分解菌的选择培养基有选择作用,原因在于其含有( ) ANaNO。 BKCl C酵母膏 D纤维素粉 6下列哪种生物能产生纤维素酶( ) A 纤维素分解菌 B牛 c羊 D兔 7选择培养时应将锥形瓶固定在( ) A桌子上 B温箱里 C窗台上 D摇床 8刚果红染色时,加入刚果红可在( )制备培养基时 梯度稀释时 倒平板时 涂布时 培养基上长出菌落时A B C D 9分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是( )A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B富集培养这一步可省略,但培养纤维素分解菌少C经稀释培养后,用刚果红染色D对照组可用同样量的培养液涂
8、布到不含纤维素的培养基上 10纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的物质,它们的基本组成单位依次是( )A葡萄糖、葡萄糖和氨基酸B葡萄糖、氨基酸和核苷酸C氨基酸、氨基酸和核苷酸D淀粉、蛋白质和核酸 11下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述,不正确的是( )A纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后,无需再进行其他实验C纤维素酶的测定方法,一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定D纤维素酶是一种复合酶 12在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是( )A用液体培养基可获得大量菌体B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C用液体培养基可以充分利用培养基中营养物质
9、D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌 13在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养,其主要目 的是( )A完全除去其他微生物B没有意义,去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度D使纤维素分解菌充分长大 14选择培养的结果:培养液变( )A清澈 B浑浊 C红色 D产生透明圈 15两种刚果红染色法的结果是( ) A均会出现透明圈 B 均不会出现透明圈 C 方法一出现方法二不出现 D 方法一不出现方法二出现 16培养流感病毒时,应选用 ( ) A固体培养基 B含有多种无机盐的培养液 C活的鸡胚 D无菌的牛肉汤 17可以使微生物细胞内蛋白质、核酸发生不可逆破坏的环境因素是(
10、) A高温 B.营养成分的变化 C.氧含量 D.温度、pH、氧的共同作用 18在接种操作的过程中,不正确的是( ) A要将接种环灼烧灭菌 B取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌 C将接种环伸入试管内,先接触长菌多的部位 D接种后还要将管口灭菌加塞 19高压蒸气灭菌的原理是( ) A高压使细菌 DNA 变性 B高压使细菌蛋白质凝固变性C高温烫死细菌 D高温使细菌 DNA 变性 20某种细菌每 30 分钟分裂一次,开始接种时为 3 个细胞,在对数生长期培养 5 个小时后, 问此时有多少细胞? ( ) A15 B48 C1024 D3072 24请分析下面的培养基配方,回答下面的问题:纤维素分解菌的选择培养
11、基纤维素粉 5 gNaN03 1 gNa2HP047H 20 1.2 gKH2P04 0.9 gMgS047H 20 0.5 gKCl 0.5 g酵母膏 0.5 g水解酪素 0.5 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到 1000 mL (1)上述配方是液体培养基还是固体培养基?为什么?(2)这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何选择的?(3)如果要证明该培养基的选择培养作用可用 培养基做 实验。 25.请你设计实验来证明纤维素酶的作用。 实验步骤: (1)取 2 支 20mL 的试管,分别放入 1cm6cm 的 。(2)再分别加入 pH 为 4.8,物质的量浓度为 0.1 molL-1的 缓冲液 10mL、11mL。(3)在加入 lOmL 缓冲液的试管中加入 1mL 。 (4)将 2 支试管固定在摇床上,振荡反应 1。结果:加纤维素酶的滤纸条被分解,另 一支中的未分解。则证明: 。