名师原创高三生物特训合集x1-1

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1、(时间：45 分钟 满分：100 分)考 点题 号微生物的培养与应用1、3、4、7、9、13特定微生物的数量的测定12培养基对微生物的选择分析2、5、6、8、10、11一、选择题(每小题 5 分，共 40 分)1(2010安徽省合肥二模)用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )。可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种 都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌A B C D解析 平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故正确

2、；平板划线法一般用于分离而不是计数，故错误。答案 C2下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( )。A植物组织培养常用的是固体培养基B可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析 在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案 D3(2012北京黄冈冲刺卷)下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )。A天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆

3、菌两个阶段D分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源解析 天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验者的双手需进行消毒处理；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。答案 C4下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )。A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是完全相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析 消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案 B5

4、用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )。A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基解析 将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵循的原则之一是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。答案 C6现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离( )。成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养0.02 %0.02%0

5、.02%0.01%0.5%0.5%2%基乙培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析 固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌， 甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。答案 B7(2012广东模拟经典卷)下列关于微生物培养和利用的叙述不

6、正确的是( )。A利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加解析 稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数；接种时要连续划线，这样可以获得单个菌落；大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般腌制 10 天后亚硝酸盐含量下降。答案 D8三个培养皿中分别加入 10 mL 不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养 36 h 后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是( )。培养皿培养基成分菌落

7、数琼脂、葡萄糖35琼脂、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0A.该实验采用的是液体培养基B该实验采用平板划线法接种C和对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D和对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖解析 该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，对微生物进行计数，宜采用稀释涂布平板法(而不是平板划线法)接种；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；与对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要生长因子；和对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖。答案 D二、非选择题(共 60 分)

8、9(12 分)从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图 A 效果的接种方法是_，获得图 B 效果的接种方法是_。(4)配制培养基时各种成

9、分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。解析 噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图 A 菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图 B 菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整 pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。答案 (1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温(3)稀释涂布平板法 平板划线法 (4)pH 调整 高压蒸汽灭菌 无菌10(12 分)下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌

10、的培养基配方。请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5 g10 g5 g20 g1 000 mL(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后，一般还要调节 pH，并对培养基进行_处理。该培养基从物理性质上分类属于_。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)解析 培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源。配制培养基时加入了琼脂，因此该培养基属于固体培养基。培养基配制完成后要调 pH 和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源

11、。分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法中每次划线前都要将接种环灼烧灭菌，以杀死上次划线时接种环上残留的菌种；采用稀释涂布平板法时稀释度要足够高，否则会使微生物不能分散成单个细胞。答案 (1)氮源 牛肉膏和蛋白胨 灭菌 固体培养基 (2)平板划线法 稀释涂布平板法 (3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。(任选两个)11(12 分)在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知

12、该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行_处理。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是_。(3)在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_或有氧条件抑制了这些细菌的生长。(4)在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是_，有透明带菌落利用的氮源主要是_，据此可筛选出目的菌。(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株 A 和 B，然后对突变株 A 和B 进行实验，结果如下表所示：接种的菌种一般培养基实验处理及结

13、果A不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添加营养物质乙，能生长AB能生长不添加营养物质甲、乙就能生长突变株 A 不能在一般培养基上生长的原因是_。突变株A 和 B 混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是_。解析 (1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。(2)从物理性质方面来看，题图培养皿中培养基属于固体培养基；从用途方面来看，该培养皿中培养基属于选择培养基。该除草剂为含氮有机化合物，降解该除草剂的细菌可以以除草剂为氮源。故该培养基中除加入除草剂外，不再含有其他氮源，以选择出能降解该除草剂的细菌。(3)在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的细菌

14、(除具有固氮能力的细菌外)是不能生长的。(4)含一定量该除草剂的培养基不透明，形成透明带是由于该除草剂被某些细菌降解。(5)突变株A 的生长依赖于营养物质甲，突变株 B 的生长依赖于营养物质乙。不添加营养物质甲和乙，二者混合培养时都能生长，最可能的原因是突变株 A 为突变株 B 提供了营养物质乙，突变株 B 为突变株 A 提供了营养物质甲。答案 (1)稀释 (2)在无氮固体培养基中添加了该除草剂(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源 (4)氮气 该除草剂 (5)突变株 A 缺乏合成营养物质甲所需要的酶 突变株 A 生长需要营养物质甲，突变株 B 可以提供；突变株 B 生长需要营养物质乙，突变株

15、 A 可以提供12(12 分)(2011北京崇文一模)请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_；它的同化作用类型是_。(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。 成 分含 量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL，根据用途划分该培养基属于_培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是_。(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和_。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_。(4)现有一升水样，用无菌吸管吸取 1 mL 水样至盛有 9 mL 无菌水的试管中，依次稀释 103稀释度。各取 0.1