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1、感染性标本的采样、储存、运输的具体操作方法 所有的采样工作都必须根据疾病的特点,在严格做好防护的基础上进行。 常 见传染病需采集的标本见表1 表 1 常见传染病需要采集的标本种类 序号传染病采样种类 1 白喉鼻咽拭子,急性期、恢复期双份血清2 百日咳鼻咽拭子,全血3 甲肝粪便,血清 4 乙肝血清5 丙肝血清 6 戊肝粪便,血清7 布病血清 8 不明原因肺炎咽拭子,急性期、恢复期双份血清9 风疹咽拭子,急性期、恢复期双份血清 10 霍乱粪便,呕吐物11 AFP 粪便 12 克雅氏病血清,脑脊液13 流感咽拭子 14 流行性出血热血清15 流脑全血,脑脊液、瘀点(斑)组织液 16 流行性腮腺炎血清
2、,唾液17 乙脑血清,脑脊液 18 麻疹咽拭子,急性期、恢复期双份血清19 疟疾全血,指尖、耳垂血血涂片 20 人感染 H7N9禽流感咽拭子,急性期、恢复期双份血清21 人感染猪链球菌病全血22 手足口病粪便,急性期、恢复期双份血清,疱疹液,脑脊液23 细菌性痢疾粪便 24 猩红热咽拭子 25 埃博拉出血热急性期、恢复期双份血清(一)呼吸道标本的采集(如不明原因肺炎) 1采样器材 拭子、压舌板、塑料瓶、采样杯或器皿、15ml 的离心管、移液管、注射器、 10ml 真空取血管、冰壶、采样运输管、有生物安全标志或标有“感染性物质” 的外包装容器(见图1) ;其他:酒精灯、剪刀、纸漏斗、酒精、碘酒、
3、吸耳球、 塑料袋、记号笔、标签、登记表等。 2采集方法 (1)鼻拭子(上呼吸道):将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢 转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入4-5 ml 采样液的管中,尾部弃 去。然后,塞紧或盖好管盖。 (2) 咽拭子(上呼吸道): 用棉签用力擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁(见图 2) , 同样将棉签头浸入4-5 ml 采样液的管中,尾部弃去,塞紧或盖好管盖。注:亦 可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中,以便提高分离率,减少工作量。 (3)鼻洗液(上呼吸道):患者取坐姿,头稍后仰,用移液管将5ml 生理盐 水注入一侧鼻孔, 嘱患者同时发 K音以关闭鼻腔。 然后让患者低头使生理
4、盐水流 出,用平皿或烧杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔。(4)鼻咽抽取物或抽取气管和支气管分泌物(下呼吸道):用与负压泵相连 的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取气管和支气管分泌物。先将收集器头部 插入鼻腔或气管,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液,并 用采样液涮洗收集器3 次。近来国内有用小孩导尿管接在50 ml 注射器上来替代 收集器。 (5)漱口液:用 10 ml 采样液漱口。漱时让患者头部微后仰,发噢声,让 洗液在咽部转动。然后,用平皿或烧杯收集漱液。注:取漱口液时,需预先了解 患者是否对抗菌素有过敏史,如有,含漱液中不应含抗菌素。 (6)肺活检材料:肺活检组织在无菌条
5、件下,用灭菌过的乳钵磨碎,用生 理盐水配成 20% 悬液, 2000rpm离心 10min,取上清加入上述提到的抗菌素。 (7)血清:血液标本采集后应放入10ml 真空管中,静止或4冰箱,待血 清自然析出。图 1 生物安全标志图 2 咽拭子采样图(二)消化道标本的采集 1. 检测细菌的采便 : 取自然排出的新鲜粪便 , 成形便采集约 5g 标 本; 水样便 或典型的米泔水样便采集约5ml。菌痢尽量挑取脓血部分,尽可能在急性期、抗 生素使用前采集新鲜粪便。 保存及送样条件: 所采标本立即接种于培养基;或将 标本加入碱性蛋白胨水中,24 小时内室温保存,立即送检(如霍乱、细菌性痢 疾等) 。 2
6、检测病毒的采便:采集AFP麻痹出现后 14 天内采集,应采集应采集双份 大便标本,两份标本采集时间至少间隔24 小时;每份标本重量5克(约为大 枣大小) 。放入 AFP专用采便管内冰箱冷冻保存,7 天内送检。手足口、甲肝便 采集后要立即放在无菌采编管内,4暂存, -20冷冻保存,在 4下送检(如 手足口病、 AFP 、甲肝等)。 3. 呕吐物:用面试字条去少量呕吐物作为件材,放入自封塑料袋中并封好袋 口或置于灭菌带盖瓶中,然后盖紧瓶盖,室温下立即送检,或置于冷藏箱中24 小时内送检(如霍乱等) 。 (三)脑脊液标本的采集 脑脊液:需要检测抗原时,在无菌条件下由腰椎穿刺,用无菌试管收集3 5ml
7、, (作厌氧培养时标本应注入厌氧瓶内) ;检测抗体时,一般于出现神经症状 时采集,查 IgM只需一份脑脊液, 而查 IgG 则需收集两次。 操作最好在医院内由 有经验的医生按腰椎穿刺术进行。 (四)血液标本的采集作血液病原培养时,严格用无菌穿刺法采静脉血,一般采集3-5ml,移入无菌的有螺口的抗凝的容器或培养瓶中送检;检测抗体时,需要分离血。3. 标本的包装 (1)标本必须放在大小适合的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料管里,拧紧。直 接在塑料管上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、姓名。原始容器 应该是防漏的,可盛容量不大于500ml。 (2)将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一
8、份标本。同 一患者 2 份以上的密封标本, 可以放在同一个塑料袋内再次做密封。在原始容器 与第二层包装之间应放置有吸附作用的材料。并辅以第二层防漏包装。 (3)运输标本的第三层包装(外包装)必须有明确的标签,标明寄送人和 接收人的详细联系方式、 包装日期和运输日期等。 外包装一般为专用运输箱内 (或 疫苗冷藏包),放入冰排, 然后以柔软物质填充, 内衬具吸水和缓冲能力的材料。 若将进行病毒分离,可将密封好的装有标本的容器直接放入液氮运输罐内运输。 外包装必须有生物安全标识。 4标本的保存与运送 按照样本的性质和检测需求, 把样本放在合适的保存环境中。 如果是细菌样 本一般常温保存。如果是病毒或
9、血清标本若不能在24 小时内送达,则应尽快在 70 以下保存。无 70 条件的需在 20 冰箱短时间暂存,并尽快联系 递送标本。 标本运送方式采取专人专车运送,主要用于近距离样品运送, 地面运送标本 时注意将装有标本的箱子紧紧固定在交通工具上,至少 2 人护送,车上还应备有 吸水材料、消毒剂、手套、口罩、护目镜、密封防水的废弃物容器等防护用品, 为避免路途颠簸引起标本溶血,可在运送前分离血清。在国际、国家、商业的有 关规定允许下,诊断标本也可空运,应注意规范包装。 5标本的交接 样品采集后应与市疾控中心应急办负责样品接收人员取得联系进行样品交 接,经双方验收确认后签字。采集样品时应填写患者的相关信息,包括:姓名、 性别、年龄、职业、家庭住址、样品名称、数量、保存方式等。