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1、恩诺沙星（恩诺沙星（EnrofloxacinEnrofloxacin）ELISAELISA 试剂盒试剂盒一、概要一、概要恩诺沙星（ENR）作为一种氟喹诺酮类物质，能抑制细菌 DNA 螺旋酶活性，常用于治疗家畜禽感染性疾病。随着 ENR 的大量使用，残留于畜禽可食组织中的 ENR 及其代谢产物环丙沙星（CIP）引发了严重公共卫生问题。恩诺沙星 ELISA 检测试剂盒是应用 ELISA 技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。二、试验原理二、试验原理恩诺沙星 ELISA 检测试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法，在酶标板微孔条上预包被恩诺沙星抗原，样本中残留的恩诺沙星和微孔条上
2、预包被的抗原竞争抗恩诺沙星抗体，加入酶标二抗后，经 TMB 底物显色，样本的吸光值与其残留物恩诺沙星的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中残留物恩诺沙星的含量。三、适用范围三、适用范围恩诺沙星 ELISA 检测试剂盒可定性、定量检测肌肉、肝脏、蜂蜜等样本中恩诺沙星的残留量。四、交叉反应率四、交叉反应率恩诺沙星 100 %五、检测步骤五、检测步骤测定前应须知：1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温（2025） 。2、使用之后立即将所有试剂放回28。3、在 ELISA 分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA 测定程序中的要点
3、。4、在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。操作步骤：1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（2025）回温30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须轻轻摇匀。2、取出所需数量的微孔板，将不用的微孔放入带有干燥剂的锡箔袋中，保存于28。3、洗涤工作液在使用前也需回温。4、编号：将样品和标准品对应微孔按序编号，每个样品和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样品孔所在的位置。5、加标准品/样品：加标准品/样品50ml/孔到对应的微孔中，然后加入抗试剂50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25避光环境中反应30min。6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液25
4、0ml/孔，充分洗涤45次，每次间隔1020s，用吸水纸拍干（拍干后若有气泡可用未使用过的枪头戳破） 。7、加酶标物：加入酶标物100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25避光环境中反应30min，取出重复洗板步骤6。8、显色：加入底物液 A 液50ml/孔，再加底物液 B 液50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置25避光环境中反应1520min。 （如颜色较浅可适当延长此步的反应时间）9、测定：加入终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm 处（建议用双波长450/630nm 检测，请在5min 内读完数据） ，测定每孔 OD 值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法
5、可进行判定)。六、检测方法灵敏度、准确度、精密度六、检测方法灵敏度、准确度、精密度试剂盒灵敏度：0.5ppb样品最低检测限：肌肉样品1ppb肝脏样品2ppb蜂蜜样品2ppb回收率：肌肉样品8010%肝脏样品7515%蜂蜜样品8510%精密度：试剂盒的变异系数均小于10%七、注意事项七、注意事项1、室温低于20或试剂及样品没有回到室温（2025）会导致所有标准的 OD 值偏低。2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3、每加一种试剂前需将其摇匀。4、反应终止液为2M 硫酸，避免接触皮肤。5、不要使用过了有效日期的试剂
6、盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6、储存条件保存试剂盒于28，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm0.5）时，表示试剂可能变质。8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后，一般显色时间为1520min 即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min，但不得超过30min。反之，则减短反应时间。9、恩诺沙星 ELISA 快速检测试剂盒最佳反应温度为25，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。八、贮藏条件及保存期八、贮藏条件及保存期贮藏条件：保存试剂盒于28。保存期： 该产品有效期为12个月。
