一.药品配置1. 配置 1%戊巴比妥钠 100ml精密称取戊巴比妥钠 1.000 克,放入烧杯中再加入蒸馏水使其完全溶解,转入 100ml 容量瓶中进行定容注意:戊巴比妥钠溶液在1~20 效果最佳,在对大鼠进行麻醉时应按 30mg/kg 量给药超过20 天可适当加量,最好重配2.配置 0.8%的生理盐水称取氯化钠 4g,放于烧杯中,加入蒸馏水使其溶解,在转入 500ml容量瓶进行定容3.配置 10%混悬液 50ml精密称取暗紫贝母、瓦布贝母、浙贝母粉各 5g 分别放入 3 个烧杯中,再分别向向 3 个烧杯中各加入 50ml 蒸馏水(或生理盐水) ,使其溶解,密封放入冰箱保存,待用大鼠按 1g/kg 进行给药,小鼠按 2g/kg 进行给药注:每次使用药品前应使其充分混匀由于保鲜效果不好,每次配置的药品不宜太多4.配置 4%的愈创木粉甘油醚 100ml精密 4g 愈创木粉甘油醚放入烧杯中,再用蒸馏水(或生理盐水)对其进行溶解,再转入 100ml 容量瓶定容5.配置 2.5%的粉红溶液 100ml精密称取 2.5g 粉红,放入密封效果好的广口瓶中,再加入 100 蒸馏水进行溶解,密封保存待用。
每次给药 0.5ml(或按体重与贝母等比例给药) 注:每次使用前需摇匀二.实验操作1.实验前 8~12h,对大鼠进行断食不断水2.标记、称重并记录,利用随机分组表对标记好的大鼠进行随机分组(分组原则及方法参照随机表) 3.按 30mg/kg 对大鼠腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉,待大鼠无明显结膜反射(或对四肢进行痛刺激无明显反映,通常为 25 分钟左右) ,五点固定法固定4.手术操作:用组织剪对颈部进行去毛处理,完成后用止血钳与组织剪在正对喉结处进行开口,再用眼科剪对气管与周围组织进行分离,使其气管的甲状软骨环至甲状软骨环下七、八软骨环位置的一段气管的一半暴露出来即可再用注射器针头,在甲状软骨换下第3 软骨环位置开一小孔,开孔直径不宜超过 1mm,开孔过程中应尽量避免针头伤及气管内部待完成后用玻璃毛细管进行取痰,玻璃毛细管插管深度在隔膜上 1cm 处,约插管 3cm注:手术操作过程中,应尽量减少对老鼠的伤害,尽量避免手术及插管过程中导致出血5.取痰 2h 后,对大鼠进行灌胃按 1g/ke 灌胃给药,生理盐水按贝母组等量给药灌胃操作:逮好老鼠后将灌胃针头顺老鼠上腭向下滑,适当调整针头避免插入气管内,插入约针头 5cm(小鼠 3cm) 。
注:灌胃时,注意老鼠的反映,反映强烈应重新查如针头,切务强行灌胃,以免灌入气管导致老鼠窒息在插入玻璃毛细管取痰 2 小时6.祛痰过程中,将换下的玻璃毛细管里的实心段痰长标记在记录纸上以便测量其长度7.实验结束,实验数据。