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1、1通腑益气法对多器官功能障碍大鼠全身 炎症反应的调控作者：翁书和，梁俊雄，丁爱民，吴思慧 【关键词】通腑益气法 摘要：【目的】探讨通腑益气法及所组方药对全身炎症反应的调控及防治多器官功能障碍(MODS)的作用。 【方法】SD 大鼠 80 只，随机分为空白对照组、模型组、中药低剂量治疗组和中药高剂量治疗组；造模前 1*!d 高、低剂量组分别按60*!g/kg、30*!g/kg 剂量连续给药 2 次，空白及模型组给予等容量生理盐水；给药后第 2 天除空白组外其他 3 组参照文献方法造模，12*!h 后取血清测肿瘤坏死因子 (TNF)及一氧化氮(NO)含量，并对主要脏器进行组织病理学检查。 【结果】
2、模型组 TNF 与 NO 水平升高，与空白组比较有显著性差异(005)；中药高、低剂量组能降低血清 TNF 与 NO 水平，与模型组比较有显著性差异(），但未显示明显量效关系。 【结论】通腑益气法所组方药可能是通过降低 TNF 与 NO 水平，抑制全身炎症反应，进而产生防治 MODS 的作用。 关键词：多器官功能衰竭中药疗法；肿瘤坏死因子血液；一氧化氮血液；疾病模型，动物；大鼠 多器官功能障碍(multipleorgansdysfunctionsyndrome,MODS)是指各种原因如感染、休克等引起的 2 个或 2 个以上系统或器官的功能障碍或衰竭的一组病变。迄今治疗效果欠佳，4 个系统或器
3、官功能障碍者，死亡率接近 100%，是当前危重医学领域研究的重要课题。目前认为肠道屏障功能障碍是引起细菌和或毒素移位，激发全身炎症反应，导致 MODS 的可能因素之一。本病中医认为是阴阳逆乱，脏腑衰竭导致的阳明腑实证2。基于上述认识以及结合临床中某些成功的2治疗经验，我们试图通过建立大鼠 MODS 模型，以通腑益气法组方，观察该组方对全身炎症反应的调控，评价其对 MODS 的防治作用。 1 材料和方法 11 动物与药物 动物：SD 大鼠 80 只，雌雄各半，体重 70100*!g，由广州中医药大学实验动物中心提供；药物：由生大黄、生栀子、蚤休、厚朴、人参、丹参、桔梗和黄芩组成。剂量比例为 2，
4、将上药煎制成浓度为 2*!kgL 和 4*!kgL 的药液各 80*!mL 备用。 12 试剂与仪器 试剂：酵母多糖 A(ZymosanA)，美国 Sigma 公司产品，规格 5*!g/瓶，批号Z4250；一氧化氮(NO)试剂盒，南京建成生物工程研究所生产；肿瘤坏死因子(TNF)试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免所提供；仪器：Eppendof 半自动生化检测仪(型号为 ECOMF6124)；SN695B 型 计数器和 UV754 分光光度仪，由广州中医药大学核医学教研室及第一附属医院实验中心提供。 13 分组与给药 将 80 只大鼠按性别分层随机分为模型组、中药低剂量治疗组(低剂量组)、中药
5、高剂量治疗组(高剂量组)和空白对照组，每组 20 只，雌雄各半；中药低剂量组按 30*!g/kg、高剂量组按 60*!g/kg 分别灌胃给药(灌药容量为 15*!mL/kg)，造模前1*!天间隔 8*!h 共给药 2 次，造模后不再给药；模型组和空白组给予等容量生理盐水。 14 造模与取样 参照胡森等方法造模3，把 4*!g 酵母多糖 A 与 50*!mL 灭菌石蜡油混合，高频振荡 30*!min，超声振荡 6*!h，制成造模用混悬液。末次给药后所有动物均禁食、3不禁水，除空白组外，其他各组动物均按 1*!mg/kg 剂量腹腔注射上述混悬液，注射后用消毒棉签按压针口 2*!min，同时按摩腹部
6、数次。造模后自由进食，4*!h 后，各组动物腹腔注射生理盐水 1*!mL，以补偿大鼠取样后丢失的血容量。按照“动物MODS 时器官功能障碍分期诊断及评分标准”评价模型成功与否。取样：所有动物在造模前 12*!h 用毛细管(直径 1*!mm)自眼眶后静脉丛取血 1 次(约 15*!mL)，造模后 12*!h 摘眼球取血(约 15mL)，血液标本离心(3000*!r/min)后，取血清保存于-170下待检；各组大鼠末次采血后立即处死，取心、肝、肺、肾、肠等主要脏器，用体积分数为 10%的市售福尔马林固定，进行组织病理学检查，观察损伤程度(包括组织细胞的排列、炎症细胞浸润程度)。 15 指标与方法
7、TNF 和 NO 含量，分别用放射免疫法和比色法测定。 16 统计学处理 计量资料用（s)表示，两组比较用 t 检验，多组比较用 F 检验，组间两两比较用 q 检验；计数资料用率表示，两组比较用 检验和直接概率法检验。所有数据均用 SPSS100 统计软件处理。 2 结果 21 各组动物脏器病理检验结果 模型组动物脏器全部出现损伤，其中 3 个或 3 个以上脏器损伤者占 80%，2 个者占 20%；药物组则以 1 个脏器损伤多见，占 25%，2 个或 2 个以上者占 10%，无损伤者占 65%，与模型组比较损伤率降低(P001)；空白组无脏器损伤；低、高剂量两组间脏器损伤无显著性差异(P005
8、)，结果见表 1。表 1 各组动物脏器受累数目及分布 N(p/%)（略） 422 各组血清 TNF 和 NO 含量的变化 表 2 结果显示：模型组血清 TNF 与 NO 水平升高，与空白组比较有显著性差异(（）；中药高、低剂量组均能降低血清 TNF 与 NO 水平升高，与模型组比较有显著性差异（），但未见明显量效关系。表 2 通腑益气法中药对MODS 大鼠血清 TNF 和 NO 浓度的影响（略） 3 讨论 近年来对 MODS 病理生理变化认识的突破是细胞因子(cytokine,CK)的发现，机体在致病因素直接或间接作用下，体内巨噬细胞、枯否细胞等多种细胞可产生CK。在这些 CK 中 TNF 起
9、重要作用，它能刺激其他几种促炎性细胞的生成，引起全身性炎症反应而出现全身性炎症反应综合征(systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS)，后者可造成全身细胞广泛受损甚至发生 MODS，。此外， 还可引起诱发型 NO 合成酶的活性增高，大量 NO 可导致微循环障碍，加重微血栓以至 MODS 的发展。 本实验结果表明，模型组大鼠血清 和 NO 水平升高（），显示体内因致病因素的作用启动了全身性炎症反应，此段时间可能是预防性用药治疗的关键时间。本实验经用通腑益气治则组方干预后，中药高、低剂量组 和 NO水平比模型组降低（），而且脏器受损数也减少 65%。上述结果
10、提示，通腑益气法所组方药可能是通过降低 与 NO 水平，抑制全身炎症反应，进而产生防治 MODS 的作用。但高、低剂量组间无统计学差异，其量效关系需进一步研究。 中医无 MODS 病名，但本病的临床过程类似伤寒论的“阳复太过，脏病还腑”。陈海龙认为在外伤或感染等情况下，机体可出现津血耗散、脏腑受损。通过机体自身调节或药物调整后，可以使阳气来复，阳气来复适度则疾病向愈；若阳复太过，则阴阳逆乱，脏腑衰竭可导致阳明腑实证。据此文献有应用通里攻下法治5疗 MODS 取得显著效果的报道，。但是，由于 MODS 往往兼有脏气衰竭，如一味攻下，则易伐正气，犯虚虚之戒。因而，施药时应寓攻于补，攻补兼施。本方中
11、以大黄通腑泻热，取清热泻实以救真阴之意，为君药；因肺与大肠相表里，则配伍黄芩、桔梗清热泻肺以助腑气之下行为臣药；栀子、蚤休、丹参清热解毒，活血化瘀；人参益气扶正，既补机体之虚，又可防止上药攻邪太过，共为佐药；厚朴畅通气机，并引诸药直达病所为使药。诸药配合共奏通腑益气、清热解毒之功。从实验结果中亦可看出基于通腑益气法所组方药有抑制全身炎症反应的作用，结果与文献报道相符-。其作用可能与通过通腑药清除肠道及脏器有害因子，配合益气药提高低下的脏腑功能，恢复或提高机体的抗炎能力有关。正如 Bone认为，机体在致炎因素的作用下启动 SIRS 的同时，代偿性抗炎反应综合征也伴随发生。若两者处于动态平衡，则不
12、会导致 MODS，否则就会失去平衡，出现 MODS。本实验结果证明通腑益气法及所组方药对 MODS 有较好的防治效果，值得进一步进行研究。 参考文献： 1凌康多器官功能不全综合征的肠道保护及治疗进展国外医学生理、病理科学与临床分册，2000，20(1)：60 2陈海龙，吴咸中，关凤林，等中医通里攻下法对多器官功能不全综合征时肠道屏障功能保护作用的实验研究中国中西医结合杂志，2000，20(2)：120 3胡森，盛志勇薛立波，等多脏器功能障碍综合征动物模型的系列研究解放军医学杂志，1996，21：6 4 BealAL,CerraFBMultipleorgansfailuresyndromeint
13、he1990s:systemicinflammatoryres ponesandorgandysfunctionJAMA1994,271:226 5 MollyRG,MannickJA,RodrickMl.Cytokine,sepsisandimmunomodulationBrJSurg,1 993,80:289 66 KenM,Kenggtharan,SjefJ,etal.Roleofnitricoxideinthecirculatoryfailureandorganinjuryi narodentmodelofGrampositiveshockBrJPharmacology,1996,119:1141 7危北海中医药与多脏器功能障碍综合征(MODS)中国中医急症，2001，10(2)：61 8顾群对多脏器功能失常综合征中医辨证施治作用机制的认识河北中医，2002，24(4)：279 9 BoneRC.Immunologicdissonance:Acontinuingevolutioninourunderstandingofthesyste micinflammatoryresponsesyndrome(SIRS)andthemultipleorgandysfunctionsyndrome( MODS)AnninternMed,1996,125:680
