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1、实验实训一、植物花粉母细胞减数分裂的制片与观察实验实训一、植物花粉母细胞减数分裂的制片与观察一、目的要求一、目的要求通过花粉母细胞减数分裂的观察和涂抹制片的练习，使学生了解减数分裂各时期细胞染色体的特征，并初步学会花粉母细胞染色与观察的方法。二、材料用具二、材料用具材料：花粉母细胞减数分裂各时期典型的永久封片；预先固定好的供观察花粉母细胞减数分裂的幼嫩花序或花蕾；典型的植物减数分裂各时期的照片。药品：45%醋酸、醋酸洋红、80%酒精用具：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、培养皿、酒精灯、吸水纸等。三、方法步骤三、方法步骤(一)花粉母细胞减数分裂的观察 教师事先按顺序陈列花粉母细胞减数分裂的
2、永久封片，并在显微镜旁陈列同期减数分裂的典型照片，以便学生对照观察。每个学生对照典型照片，用显微镜观察花粉母细胞减数分裂各时期的永久封片。在观察过程中，应特别注意：1、进行减数分裂的花粉母细胞与花药组织的细胞有什么不同。2、减数分裂前期：同源染色体联会、二价体的数目与花粉母细胞染色体的有什么关系。3、减数分裂中期：细胞核与细胞质之间是否还有明显的界限，纺锤体的形成，二价体排列在赤道面上。4、减数分裂后期：同源染色体的分离。5、减数分裂中期且和后期 D：此期染色体的特征与中期和后期的是否相同?6、减数分裂末期 D：形成的 4 个子细胞，观察每个子细胞中染色体数目与花粉母细胞染色体数目的比例。(二
3、)花粉母细胞涂抹制片的练习 将己固定好的实验材料置于小培养皿中，加少许 80%酒精，以防干燥。然后用解剖针挑取 2-3 个花药，放在清洁的载玻片上，加 1 滴醋酸洋红染色。用镊子或针尖轻轻挤压，将花粉母细胞从花药中挤出后，拨去花药及残渣，再轻轻摊开花粉母细胞，立即加盖玻片，并用吸水纸吸去多余的染液，使盖玻片不要移动。制成的临时片即可放显微镜下观察。为使染色加深，可延长染色时间，并将载玻片在酒精灯上间断重复加温 4-6 次 (即拿载玻片在酒精灯上方来回晃动 4-6 次，但切勿使载玻片达烫手的程度)，这样可使染色体着色鲜明，材料也紧贴载玻片。如细胞质染色过深，可用 45%的醋酸滴于盖玻片一边，再用
4、吸水纸从另一边吸去，并在酒精灯上稍加温，即可使细胞质褪色。如果制成的片子染色良好，分裂时期典型，可用石蜡黏胶 (2/3 石蜡溶入 1/3 松香)将盖玻片的四周封起来，写上分裂时期，即可临时保存。四、实验报告四、实验报告1、用涂抹法每人制作 1 张可观察到染色体的临时片。2、根据观察结果，绘出花粉母细胞减数分裂前期、中期、后期、中期的简图，并简述以上各期染色体的特点。实验实训二、种质资源调查实验实训二、种质资源调查一、目的要求一、目的要求了解花卉种质资源调查的意义、方法。二、材料用具二、材料用具选择校园及周边地区如森林公园主要栽培的花卉 1-2 种，如杨、柳、月季、杜鹃、菊、梅及地被植物；记录用
5、品、简单测量用具、标本夹、种子袋、照相机、有关工具书。三、实训内容实训内容1、种质资源调查及分类研究。2、地区种质资源状况分析评价。3、本地种质发展趋势预测。四、实验报告四、实验报告1、每组完成一份有关种质资源的调查结果；2、每人写一份本地有关种质的分析报告。实验实训三、花粉生活力测定实验实训三、花粉生活力测定一、目的要求一、目的要求掌握花粉培养发芽技术，学会用发芽实验法相染色法测定花粉生活力。二、材料用具二、材料用具各种园林植物的花粉。如百合、牡丹、菊花、月季、凤仙花、紫荣莉等。显微镜、冰箱、恒温箱、天平、培养皿、酒精灯、烧杯、量筒、凹型载玻片、脱脂棉、葡萄糖、蔗糖、琼脂、联苯胺、碳酸钠、过
6、氧化氢、0奈乙酚、刀片、小镊子等。三、方法步骤三、方法步骤1、配置培养基 取 100ml 蒸馏水，倒入烧杯中，且热至沸，加 1g 琼脂，使之溶化，然后再加人 5g 蔗糖或葡萄糖和 0.01g 不断搅拌，使之均匀。在加热溶解过程中，随时补充蒸发的水分。(充分溶解后，将烧杯放在水浴锅内，以保持温即为 5%蔗糖 (葡萄糖)培养基。用同样的方法可配制 10%、15%、20%浓度的培养。2、制片 用玻棒蘸少许培养基，趁热滴人凹型载玻片，稍凉凝固后，撤上少许花粉粒。注意要均匀，不可过多，否则，在显微镜下，不易分清数目。3、发芽 将制好的玻片放于培养皿，下面垫有脱脂棉，加人少量水分，以保持湿度;将培养皿盖好
7、，置于恒温箱中，保持 20-26C。4、观察 不同的植物种类，其花粉发芽所需的时间不同，发芽快的花粉，如凤眼莲、凤仙花等经过数小时，即可观察，而有些则经过十几小时或数十小时才能观察到发芽的花粉。观察时，用普通的光学显微镜放大数百倍即可，然后统计发芽情况，不发芽者为无生活力的花粉。四四、实验报告实验报告用培养发芽法计算花粉生活力 (5 个视野)，计算花粉生活力：花粉生活力 (%)=有生活力花粉数/观察花粉总数100%实验实训四实验实训四、两性花植物有性杂交技术两性花植物有性杂交技术一、目的要求一、目的要求1、了解两性花植物有性杂交特点。2、掌握有性杂交技术。二、材料用具二、材料用具两性花的开花植
8、株。如月季、百合、唐菖蒲、凤仙花、紫茉莉、菊花、牡丹、芍药等。毛笔或海绵、细铁丝、标牌、镊子、放大镜、套袋、70%酒精、小瓶或培养皿等。三、方法步骤三、方法步骤1、选择亲本 根据育种目标和要求，选定正确的杂交组合，然后选定生长健壮、无病虫害、品种纯正、雌雄蕊正常的植株做父本和母本。2、采集花粉 在父本的花蕾即将开放时采集花粉。先除去花冠，露出雄蕊，然后用小镊子取下花药，在室内铺上白纸，将花药自然晾干直至不相互粘结即可。如需花粉量较多，可将父本的花蕾摘下，到室内采集花粉。晾干后，放人小瓶或试管，贴上标签，注明父本名称，在置于 1-5C 条件下贮藏备用。如果父母本同时开花，可直接取父本花药授粉。3
9、、去雄 两性花植物，每株选数朵花，在母本雄蕊成熟前进行去雄，一般在花蕾即将开放时进行。先去掉花冠，用小镊子或小剪刀将母本雄蕊去掉，注意不碰破花药，不损伤雌蕊。去雄后，套袋隔离。4、授粉 在雌蕊充分成熟时进行授粉。此时柱头分泌黏液，发亮，有的柱头分叉。一般选择晴朗无风天气，上午 8-10 时为宜。用毛笔或海绵球蘸取父本花粉，轻轻涂于柱头上。立即套袋。可在第二天、第三天在连续授粉 1-2 次，以保证授粉成功。授粉后挂牌，注明杂交组合、授粉日期、杂交人姓名等。5、杂交后的管理(1)授粉后 1 周检查，如果母本子房膨大，说明杂交成功，可将套袋去掉，以免影响种子发育。(2)去掉母株上的其它花蕾、花朵，剪去细弱枝、病虫枝、徒长枝和过密枝。(3)加强肥水管理、病虫害防治。(4)适当保护，防止意外损伤和倒伏。(5)及时采收种子，妥善保存。(6)杂种培育及选择 将种子按杂交组合播种、培育，然后按育种目标选择、鉴定。四、实验报告四、实验报告简述两性花植物的杂交组合过程及操作技术
