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1、1CD99 蛋白在胃腺癌组织中的表达及其临 床意义作者： 玄延花，刘双平，任香善摘要 目的 探讨 CD99 蛋白表达在胃腺癌诊断中的意义. 方法 采用免疫组织化学方法给 111 例胃腺癌和 20 例正常胃黏膜组织进行 CD99 蛋白表达检测. 结果 CD99 蛋白在正常胃黏膜细胞膜上呈高度表达，在胃腺癌细胞中呈低度表达，在正常胃黏膜和胃腺癌组织免疫组织化学染色积分数分别为 7.923.14，1.853.05，两者间有显著性差异.CD99 蛋白在早期胃癌组织中的表达高于进展期中，且进展期期病变中的积分数高于进展期期. 结论 CD99 蛋白的免疫组织化学检测可作为胃腺癌早期诊断的参考指标. 关键词
2、 胃肿瘤;CD99;免疫组织化学（Department of Pathology and Forensic Medicine，Yanbian University College of Basic Medicine，Yanji133000，Jilin，China） ABSTRACT:OBJECTIVE To evaluate the pathologic significance of the expression of CD99in gastric adenocarcinoma.METHODS The immunostaining was done using a CD99antibody
3、in111of gastric adenocarcinomas and20of normal gastric mucosa.RESULTS The expression of CD99was very rare in gastric adenocarcinoma，only several cases of gastric cancer cells showed weak positive signals，but its expression was frequently observed in normal gastric mucosa.The immunoreactive score of
4、CD99was7.923.14and1.853.05，respectively.The expression of CD99was significantly higher in early gastric cancer and stagetissues than advanced gastric cancer and stage.CONCLUSION The expression of CD99was a useful marker for the diagnosis of gastric adenocarcinoma.Key words:stomach neoplasms;CD99;imm
5、unohistochemistryCD99 蛋白是由 mic2 基因编码的广泛存在于各种细胞内的跨膜蛋白，其分子质量为 32ku.CD99 表达检测在 Ewing 肉瘤、原发性神经外胚瘤、淋巴母细胞瘤、横2纹肌肉瘤和软骨肉瘤等间叶组织肿瘤的诊断中有重要意义 13 .本研究观察了 CD99 蛋白在 111 例胃腺癌和 20 例正常胃黏膜组织中的表达情况，探讨了CD99 蛋白在胃腺癌早期诊断中的意义.1 材料和方法1.1 材料 111 例胃腺癌和 20 例正常胃黏膜组织蜡块标本均由韩国忠北大学附属医科大学校医院病理科提供，行常规 HE 染色，选取适当蜡块进行免疫组织化学检测.111 例胃腺癌中早期
6、为 29 例，进展期为 82 例;进展期中期为 38 例，期为 12 例，期为 36 例，期为 25 例.111 例胃腺癌患者中发生淋巴结转移者为69 例，未发生者为 42 例. 1.2 方法1.2.1 免疫组织化学染色 CD99 单克隆抗体（克隆 YG32）为韩国 Dinona 公司产品，免疫组织化学检测试剂盒购自 Santa-cruz 公司.染色按照说明书步骤进行，4m 厚切片，常规脱蜡，梯度酒精脱水.在抗原修复液中 9599条件下处理15min，室温冷却 20min，缓冲液清洗 5min，加入 1200 稀释的 CD99 抗体，室温下孵育 60min，二抗室温下孵育 30min，3，3-
7、diaminobenzidine，DAB 显色，Mayer苏木素复染.染色结果示棕褐色的阳性颗粒位于细胞浆内，阳性染色细胞数多于10%时可判定为 CD99 蛋白阳性表达.1.2.2 结果判定 在显微镜下观察，按每张切片的阳性细胞比例及着色深浅计分，行半定量分析.阳性细胞着色判定（A）:低于 5%为 0 分，5%25%为 1 分，26%50%为 2 分，51%75%为 3 分，高于 75%为 4 分;阳性强度判定（B）:无着色或与背景均匀一致的呈淡黄色为 0 分，浅棕黄色为 1 分，棕黄色为 2 分，棕褐色为 3 分.根据两项指标的积分数（积分=AB）进行结果判定.31.3 统计学处理 统计学分
8、析应用 SPSS 统计软件，采用 Chi-square（ 2 -test）统计方法进行. 2 结果在正常胃黏膜标本中，CD99 蛋白特异性地高 度表达在黏膜上皮细胞膜上;而在胃腺癌标本中 CD99 蛋白只表达在周围淋巴细胞和血管内皮细胞膜上，低表达于癌细胞中.正常胃黏膜及胃腺癌标本的免疫组织化学染色积分数分别为7.923.14，1.853.05，两者间有显著性差异（P0.001）.CD99 蛋白在早期胃腺癌中的表达积分数为 2.382.96，进展期中为 1.122.89，两者间差异有统计学意义（P0.05）.进展期胃腺癌各分期标本中的 CD99 蛋白表达积分数如下:期为2.263.01，期为
9、1.583.85，期为 1.143.09，期为 0.601.76;期与期比较差异有统计学意义（P0.05）;发生与未发生淋巴结转移的胃腺癌标本中 CD99蛋白的表达积分数分别为 1.202.98，1.862.87，两者间差异无统计学意义（P0.05）.可见在进展期胃腺癌组织中，尤其是在期病变组织中 CD99 蛋白表达率很低，且与淋巴节转移无显著关系.3 讨论CD99 蛋白主要参与细胞间粘附、泡状运输、调节细胞骨架、活化 T 细胞及调节细胞凋亡等 4，5 .Kim 等 5 报道，CD99 蛋白低表达在霍奇金淋巴瘤细胞和Reed-Sternberg 细胞的形成过程中起重要作用.CD99 蛋白在上皮
10、细胞上的表达明显少于淋巴细胞上，表达水平亦低于淋巴细胞.本实验结果表明，CD99 蛋白在胃腺癌组织中的表达水平显著低于正常胃黏膜组织，且在进展期胃腺癌，尤其是期癌组织中几乎未见表达，提示 CD99 蛋白低表达在胃腺癌形成和发展过程中起重要作用，其免疫组织化学检测结果可作为胃癌早期诊断的参考指标. 4参 考 文 献1 Granter SR，Renshaw AA，Fletcher CD，et al.CD99 reactivity in mesenchymal chondrosarcomaJ.Hum Pathol，1996，27（12）:1273.2 Choi YL，Chi JG，Suh YL.CD
11、99immunoreactivity in ependymomaJ.Appl Immunohistochem Mol Morphol， 2001，9（2）:125.3 Scotlandi K，Perdichizzi S，Bernard G，et al.Targeting CD99in association with doxorubicin:an effective com-bined treatment for Ewings sarcomaJ.Eur J Cancer， 2006，42（1）:91.4 Kim SH，Shin YK，Lee IS，et al.Viral latent mem-
12、 brane protein1（LMP-1）- induced CD99down-regulation in B cells leads to the generation of cells with Hodgkins and Reed-Sternberg phenotypeJ.Blood，2000，95（1）:294.5 Kim SH，Choi EY，Shin YK，et al.Generation of cells with Hodgkins and Reed-Sternberg phenotype through down regulation of CD99（Mic2）J. Blood，1998，92（11）:4287.
