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1、1三叶人字草对 IgA 肾病模型大鼠的影响作者：王霞,周玖瑶,孙毅东,余应嘉【摘要】 【目的】观察三叶人字草对 IgA 肾病模型大鼠的影响。 【方法】选用 KM小鼠随机分为空白对照组,云南白药胶囊对照组(剂量为 0 411 gkg-1d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为 24 660、12 330、6 165 gkg-1d-1),持续给药 7 d后,采用激光多普勒血流仪记录小鼠耳廓微循环的血流速度,观察微循环的改善情况。选用 SD 大鼠随机分为空白对照组,云南白药胶囊对照组(剂量为 0 206 gkg-1d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为 12 340、6 170、3 085
2、 gkg-1d-1),连续给药 7 d 后取血,采用血液流变学测变仪检测血液流变学指标。选用 SD 大鼠随机分为空白对照组,模型组,雷公藤多苷组(剂量为 0 0165 gkg-1d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为 16 0、8 0、4 0 gkg-1d-1),除空白对照组外,其他组均采用牛血清白蛋白脂多糖CCl4 联合运用 8 周复制实验性 IgA 肾病模型,于第8 周开始给药至第 12 周末,各组大鼠均于腹主动脉取血检测尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)和血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。 【结果】人字草高、中、低剂量组均可显著增强小鼠耳廓微动脉的血流速度(P0
3、 05 或 P0 01),且呈一定的剂量效应关系。人字草高剂量组可显著降低高切、中切、低切全血黏度(P0 01),改善大鼠血液流变学指标。除人字草低剂量组对血清 MDA 含量无显著影响外,其他各给药组均可显著降低模型大鼠 BUN、SCr、MDA 含量,升高 SOD活力(P0 05 或 P0 01)。 【结论】三叶人字草治疗 IgA 肾病的效应可能与其能改善微循环和血液流变学指标,清除自由基,提高抗氧化酶活力有关。 【关键词】 三叶人字草/药理学 IgA 肾病/中药疗法 血液流变学 超氧化物歧化酶/2血液 丙二醛/血液疾病模型,动物 大鼠 小鼠Abstract: ObjectiveTo stud
4、y the therapeutic mechanism of Kummerowia striata (Thunb.) Schindl.(KSC) for IgA nephritis rats. Methods(1) Kunming rats were randomized into blank control group, Yunnan Baiyao Capsules (YBC) group (in a dose of 0 411 gkg-1d-1), and high , middle and low dose KSC groups (in a dose of 24 660, 12 330
5、and 6 165 gkg-1d-1 respectively). The medication lasted 7 continuous days. After treatment, we used laser Doppler flowmetery to detect blood flow rate of microcirculation in rats auricle and monitor the changes of auricular microcirculation. (2) SD rats were randomized into blank control group, YBC
6、group (in a dose of 0 206 gkg-1d-1), and high , middle and low dose KSC groups (in a dose of 12 340, 6 170 and 3 085 gkg-1d-1 respectively). Hemorheological indexes were examined after 7 day treatment. (3) SD rats were randomized into blank control group, model group, Tripterygium Glycosides Tablets
7、 group (in a dose of 0 0165 gkg-1d-1), and high , middle and low dose KSC groups (in a dose of 16 0, 8 0 and 4 0 gkg-1d-1 respectively). Except that the blank control group, the rats in other groups were given bovine serum albumin (BSA), lipopolysaccharide (LPS) and carbon tetrachloride to induce Ig
8、A nephritis. Medication started from the 8th week and ended in the end of the 12th week. After treatment, arterial blood sampling was carried out to detect the levels of blood urea nitrogen (BUN),serum creatinine (SCr),the whole blood superoxide dismutase (SOD)rate of rat auricular microcirculation
9、(P0 05 or P0 01) in a dose effect manner. High dose KSC decreased high , middle and low shear whole blood viscosity (P0 01), improved the hemorheological indexes. Except that low dose KSC had no effect on MDA content, SOD activity was increased,and BUN, SCr and MDA were decreased, in other medicatio
10、n groups (P0 05 or P0 01). ConclusionThe therapeutic mechanism of KSC for IgA nephritis is probably related with the improvement of microcirculation and hemorheology,with the clearance of free radicals, and with the increase of antioxidase activityKey words:KUMMEROWIA STRIATA(THUNB.) SCHINDL./pharma
11、cology;IGA NEPHROPATHY/TCD therapy;BLOOD RHEOLOGY;SUPEROXIDE DISMUTASE/blood;MALONDIALDEHYDE /blood;DISEASE MODELS, ANIMAL;RATS;MICEIgA 肾病(IgA nephropathy,IgAN)是肾小球系膜区存在以 IgA 为主的颗粒样沉积、伴或不伴有其他免疫复合物沉积,临床上以血尿或血尿伴蛋白尿为主要表现的肾小球肾炎1 。三叶人字草为豆科植物三叶人字草Kummerowia striata(Thunb.)Schind1.的全草入药。药性甘、淡,微寒,功能清热解毒、活血、
12、利尿、止泻。前期研3究2-3 表明,三叶人字草有显著的止血作用，对急性炎症和炎症后期的结缔组织增生有良好的抑制作用。在治疗血尿、肾炎蛋白尿方面有确切的疗效4。本研究通过观察三叶人字草对小鼠耳廓血液微循环、大鼠血液流变学以及 IgA 肾病模型大鼠的影响,探讨三叶人字草治疗 IgA 肾病的作用机理,现报道如下。1 材料与方法1.1 药物三叶人字草购自广州清平药材市场,由广州中医药大学博物馆中药标本中心张秋镇老师鉴定为豆科属植物三叶人字草Kummerowia striata(Thunb.)Schind1.的全草干品,经加水煎煮、过滤,浓缩至 800 g/L 药液,置冰箱备用，雷公藤多苷片由浙江普洛康
13、裕天然药物有限公司提供,批号：070901，云南白药胶囊由云南白药集团股份有限公司提供，批号：20080202。1.2 主要试剂与仪器尿素氮（BUN）、肌酐（SCr)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供,批号：20080613；牛血清白蛋白(BSA)由 Mbchem 公司提供,广州威佳科技有限公司分装,批号：20070826；脂多糖(LPS)由北京鼎国生物技术有限公司提供,批号：024K4067；蓖麻油由天津市耀华化学试剂有限责任公司提供,批号：20060505；四氯化碳(CCl4)由天津市大茂化学试剂厂提供,批号：20080205；水合氯醛由天津市
14、科密欧化学试剂有限公司提供,批号：20080118；722 紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；BS210S 电子分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)；2 0R 低温高速离心机(德国 Hermle 公司)；PF5001 激光多普勒血流仪(瑞典百灵威医疗仪器有限公司)；MS/XW F 血流变、微循环、红细胞变形三用仪(成都麦赛科贸公司)。1.3 动物 SPF 级 SD 大鼠 110 只,体质量 180220 g,雌雄兼用,由广州中医药4大学实验动物中心提供,合格证号：SCXK(粤)2003 01；KM 小鼠 60 只,雌雄兼用,体质量 1822 g,购自广州中医药大学实验动物中心,合格证号
15、：SCXK(粤)2008 0020,粤监证字 2008A003。1.4 各组对小鼠耳廓微循环的影响取 KM 小鼠 60 只,雌雄各半,随机分为 5 组(每组 12 只)，即空白对照组(灌胃等容积蒸馏水),云南白药胶囊对照组(剂量为0 411 gkg-1d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为 24 660、12 330、6 165 gkg-1d-1),持续给药 7 d,每天 1 次。于第 7 天末次给药后 60 min,用 50 mg/L 水合氯醛麻醉,左耳用胶布贴拔鼠毛并固定,采用激光多普勒血流仪记录小鼠耳廓微循环的血流速度,以判断微循环的改变情况。1.5 各组大鼠血液流变学试验取 SD
16、 大鼠 50 只,随机分为 5 组(每组 10 只)，即空白对照组(灌胃给予等容积蒸馏水),云南白药胶囊对照组(剂量为 0 206 gkg-1d-1),人字草高、中、低剂量组(剂量分别为 12 340、6 170、3 085 gkg-1d-1),持续给药 7 d,每天 1 次。于第 7 天末次给药后 1 5 h,眼眶后静脉丛取血 3 mL,置于肝素抗凝管,采用血液流变学测变仪检测血液流变学指标。1.6 IgA 肾病大鼠模型的复制5及分组与给药除空白对照组外,各组均采用BSA+LPS+CCl4 复制实验性 IgA 肾病模型：口服免疫原 BSA(剂量为 400 mgkg-1d-1,以 pH 2 53 0 的酸化水配制),隔天灌胃,持续 6 周；皮下注射蓖麻油 0 5 mL+CCl4 0 10 mL,每周 1 次,持续 9 周,并联合运用 LPS(分别于第 6、8 周以0 05 mg LPS 尾静脉注射)。取 S
