《FQ-PCR技术检测肺炎患儿咽拭子EB病毒结果分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《FQ-PCR技术检测肺炎患儿咽拭子EB病毒结果分析（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1FQ-PCR 技术检测肺炎患儿咽拭子 EB 病 毒结果分析作者：刘金禄 何晓峰 李采青 卢成【摘要】 目的:探讨 EB 病毒 DNA(EB-DNA)检测对诊断患儿不明原因肺炎的临床意义。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测患儿呼吸道分泌物标本中的 EB-DNA 水平。结果:检测 275 例患儿咽拭子标本，阳性 74 例，阳性率 26.9%。结论:EB-DNA 检测对不明原因肺炎的诊断有一定的价值。 【关键词】 EB 病毒;肺炎;荧光;聚合酶链反应目前，医学检验技术水平随着临床医学的迅猛发展也在不断提高，为了满足临床工作的需要，病毒检验方法已由传统的培养、血清学试验向分子生物学发
2、展。EB 病毒的检测已不局限于酶联免疫试验，已经将荧光定量 PCR 技术广泛应用于临床。现将我院近年来 EB-DNA 检测情况报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料为 2008-102010-03 月本院儿科门诊和住院 275 例不明原因肺炎患儿，其中男 143 例，女 132 例;年龄 114 岁，平均 7.5 岁;病程 230d，均符合实用儿科学1的诊断标准。1.2 方法21.2.1 标本采集用咽拭子采集患儿的咽部分泌物，放入试管中备用。1.2.2 检测方法采用 EB 核酸扩增荧光定量检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司生产)对咽拭子标本进行核酸检测，按试剂盒说明书操作。仪器采用罗氏
3、公司 Light Cycle 全自动荧光定量 PCR 仪。1.2.3 判定结果 大于 50copy 为阳性。2 结果共检测 275 例呼吸道咽拭子标本，阳性 74 例，阳性率 26.9%。 3 讨论EB 病毒在人群中普遍感染，主要是引起传染性单核细胞增多症的病原体，但研究表明，该病原体引起呼吸道感染在逐年增多，一旦侵入人体，以持续感染或携带状态存在，并引起其他疾病或并发症。EBV-IgM 酶联免疫检测方法由于检测方便，目前在许多医疗机构普遍采用。但由于方法的局限性常有假阳性发生。给临床确诊带来不便。近年来 PCR 技术在国内的广泛开展，解决了 EBV 感染的诊断问题。我科在两年前就开展了此项工
4、作，我们共检测 275 例呼吸道咽拭子标本，阳性 74 例，阳性率 26.9%。比陈意振等2(1997 年)采用定性 PCR 方法阳性率 14.52%和陈悦等3(1996 年)采用定性 PCR 方法阳性率 10.8%都高。比黄体龙等4采用荧光定量PCR 方法 14.3%高。比周永忠等5采用荧光定量 PCR 方法 46%低，结果差异可能与检测方法、所用检测标本种类、不同地区以及季节性有关。近几年来特殊病毒及变异病毒引起呼吸道感染在增高，且病情特殊、发病严重，3死亡率增高。婴幼儿肺炎也呈上升趋势。因此对病原体的早期诊断越发显得重要。病毒培养技术要求高，一般实验室难以开展。酶联方法假阳性高，也不近人
5、意。只有荧光定量 PCR 检测方法敏感性高，特异性强，准确性可靠。因此，采用荧光定量 PCR 方法检测 EBV-DNA 对诊断及治疗，具有可靠的应用价值，值得在临床推广应用。【参考文献】1 胡亚美,江载芳,诸福堂.实用儿科学M.第 7 版.北京:人民卫生出版，2000.1204-1205.2 陈意振，鲁莉萍，邹波.应用 PCR 技术检测小儿呼吸道病原体的研究J.中国优生与遗传，1997，5(6)：44-45.3 陈悦，佟彤.应用聚合酶链反应(PCR)技术对 EB 病毒体检测J.中国优生与遗传，1996，4(3)：18-19.4 黄体龙，杨跃煌.PCR 法检测 140 例儿童 EB 病毒 DNA 的临床分析J.中国小儿血液与肿瘤杂志，2007，12(3):121-123.5 周永忠，杜记恩.荧光定量检测儿童 EB 病毒感染中的应用J.分子诊断与治疗杂志，2009，1(5):241-242.
