《紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃香豆素含量２》由会员分享，可在线阅读，更多相关《紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃香豆素含量２（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋 喃香豆素含量作者：寿清耀， 杨荣平， 王宾豪， 钟国跃， 涂永勤， 胡轶娟【关键词】 补骨脂药材；,总呋喃香豆素；,紫外分光光度法摘要：目的建立紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量。方法补骨脂药材粉末经索氏提取 2 h，过聚酰胺柱后，采用紫外分光光度法，检测波长为 245 nm 对补骨脂药材中的总呋喃香豆素进行测定。结果采用该方法可准确测定补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量，补骨脂素在 1.00810.08l/ml 范围内吸光度与浓度的线性关系良好，样品平均回收率为 98.7%，精密度 RSD 为 0.11%，重复性 RSD 为 2.8%，稳定性
2、RSD 为 0.75%（4 h 内）。结论该方法简单、准确，可用于补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量测定。关键词：补骨脂药材； 总呋喃香豆素； 紫外分光光度法Determination of the Total Furanocoumarins in Fructus Psoraleae by UV SpectrophotometryAbstract：ObjectiveTo establish a UV spectrophotometry for determination of the total furanocoumarins in Fructus Prosraleae. MethodsThe p
3、owder of Fructus Psoraleae was extracted by CH3OH for two hours and puerariaed by polyamide column chromatography ;when it was determined by UV spectrophotometry, wave length was 245 nm.ResultsThe method had good linear relationship from 1.008l/ml to 10.08 l/ml,and the recovery rate was 98.7%The rel
4、ative standard deviation of accurate test and stability test were 2.8%and 0.75% respectively.ConclusionThe method is simple and accurate, and can be used for determination of the total furanocoumarins in Fructus Psoraleae.Key words： Fructus Psoraleae； Total furanocoumarins； UV spectrophotometry 2补骨脂
5、为豆科植物补骨脂 Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实。补骨脂味辛，苦，归肾、脾经。具有温肾补阳、纳气、止泻之功效1。用于阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用治白癜风、斑秃。呋喃香豆素类为补骨脂的主要活性物质，用于治疗白癜风、多种妇科出血、鼻、牙龈出血及类血友病出血等症2；同时有一定的抗癌活性及对成骨细胞的增殖作用。由于补骨脂中呋喃香豆素类成分无酚羟基，而其他成分包括拟雌内酯类，补骨脂黄酮类及单萜酚类成分均有酚羟基，故采用聚酰胺柱色谱对补骨脂药材中的呋喃香豆素进行富集，以补骨脂素为对照品，建立了用紫外分光光度法测定总呋喃香豆素含量的方法。结果表明该方法
6、简便、准确，可用于补骨脂药材中总呋喃香豆素含量测定。1 仪器与试药UV1601 型可见紫外分光光度计（日本岛津），AW220 型电子天平（日本岛津），补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品（中国药品生物制品检定所），聚酰胺粉（3060 目）。2 方法与结果2.1 供试品溶液的制备2.1.1 上柱样品的制备取补骨脂药材粉末（过三号筛）0.5 g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取 2 h，过滤，加 0.5 g 聚酰胺粉（3060 目）拌匀，即得。2.1.2 乙醇洗脱浓度的考察将样品上聚酰胺柱（10 ml 3060 目聚酰胺，110 cm），水洗脱至无色，再依次以 30%,50%,70%
7、乙醇各洗脱 100 ml，洗脱液进行紫3外全波长扫描，图谱见图 15。由上图可以看出，30%乙醇洗脱液的紫外扫描图最大吸收波长为 245 nm，与补骨脂素及异补骨脂素等呋喃香豆素的紫外扫描图基本一致；50%乙醇洗脱液显示为补骨脂酚的紫外吸收图；而 70%洗脱液显示为黄酮及拟雌内酯类紫外吸收。图 1 30%乙醇洗脱液(略) 图 2 50%乙醇洗脱液(略)图 3 70%乙醇洗脱液 (略) 图 4 补骨脂素(略)图 5 异补骨脂素 (略)2.1.3 乙醇洗脱用量的考察将样品上聚酰胺柱，加水洗脱至无色，再加 30%乙醇洗脱以 10 ml/min 洗脱，每 25 ml 为一流分，取 1 ml 稀释至 1
8、0 ml，在 245 nm处测定吸光度。结果见表 1。表 1 样品 30%乙醇洗脱液不同流分的紫外吸收(略)由上表可以看出，第 10 个流分所检测到的吸光度已很低，故样品上聚酰胺柱后，加水洗脱至无色，用 30%乙醇以 10 ml/min 洗脱 250 ml 即得。 2.1.4 结论根据实验结果，最终确定补骨脂药材供试品制备方法为取补骨脂药材粉末 0.5 g（过三号筛），精密称定，置索式提取器中，加甲醇适量，加热回流提取 2 h，过滤，滤液加 0.5 g 聚酰胺粉（3060 目）拌匀，挥干，上聚酰胺柱，以 30%乙醇洗脱 250 4ml。2.3 对照品溶液的配置取补骨脂对照品 12.6 mg 精
9、密称定，加甲醇超声，定容至 50 ml，再精密吸取 1 ml，加甲醇定容至 25 ml 即得标准品溶液。2.4 标准曲线的绘制精密吸取上述对照品溶液 1，3，5，7，10 ml，加甲醇定容至 10 ml，于 245 nm 处测定吸收度,.并以吸光度与对照品浓度进行回归,得标准曲线方程 y=0.132 1x+0.008 8，r=0.999 7(n=5)。实验表明补骨脂素在 1.00810.08 g/ml 浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.5 精密度实验精密吸取上述对照品溶液 1 ml，加甲醇稀释至 10 ml，于 245 nm 处测定吸光度，连续测定 5 次，结果表明 5 次测定的 RSD
10、 为 0.11%，故仪器精密度良好。2.6 稳定性实验将精密度考察项下对照品溶液于 0，6，12，24，48 h 在 245 nm处测定吸光度，实验结果表明 RSD 为 0.75%，对照品溶液在 4 h 内稳定性良好。2.7 重复性实验按照拟定的含量测定方法，取同一批药材 5 份，每份 0.5 g，分别制备样品，测定吸光度，并计算其含量，实验结果 5 个样品含量 RSD 为 2.9%，表明本法重复性良好。2.8 回收率实验取已知含量的补骨脂药材 0.25 g，精密称定，分别精密加入补骨脂素对照品溶液适量（3 种不同水平，各 2 份），按供试品制备方法处理，进行含量测定，计算回收率。结果见表 2
11、。表 2 回收率实验(略)由表 2 可知，3 种水平 6 次实验的加样回收率测定结果均在 95%105%之间，5其平均值为 98.7%，RSD 为 1.00%。2.9 样品测定 取 6 批补骨脂药材，每批 0.5 g（过三号筛选），按供试品制备方法制备，测定吸光度，根据标准曲线计算样品中总呋喃香豆素的含量。结果见表3。表 3 6 批补骨脂药材含量测定结果(略)从表 3 可知，补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量在 1%左右，各个批次药材之间总呋喃香豆素的含量有较大的差异。3 讨论补骨脂中总呋喃香豆素是补骨脂中的主要活性物质，补骨脂中呋喃香豆素没有酚羟基，在聚酰胺柱上的吸附能力较补骨脂中的其他成分如黄
12、酮类、拟雌内酯类及单萜酚类为弱。根据这一特性，我们通过聚酰胺柱色谱对补骨脂药材中的呋喃香豆素进行了富集，并对乙醇洗脱的浓度与用量进行了考察。结果以药材提取液拌聚酰胺，上柱，水洗至无色，再以 30%乙醇洗脱 250 ml 作为供试品溶液；以补骨脂素为对照品绘制标准曲线测定样品中总呋喃香豆素含量，该方法灵敏度高，重复性好。根据拟定的方法，我们测定了 6 个不同批次药材中中呋喃香豆素的含量，发现各个批次药材含量有较大的差别，故有必要通过总呋喃香豆素来控制补骨脂药材的质量。参考文献：1 国家药典委员会.中国药典，部S.北京：化学工业出版社，2005.2 吉 力，徐植灵.补骨脂化学成分综述J.中国中药杂志，1995，20（2）：120.
