《两性霉素B中的铁含量测定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《两性霉素B中的铁含量测定（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1两性霉素 B 中的铁含量测定作者：杜晓霞 武仲涛 孟坚 宋如 张健【摘要】 目的 测定两性霉素 B 中的铁含量。方法 两性霉素 B 完全灰化后灰分用稀盐酸溶解，所得溶液中的 Fe(III)在酸性条件下与硫氰酸钾生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，利用比色法测定铁含量。结果 配合物在波长 500nm 处有最大吸收，Fe(III)浓度在 0.12.0g/ml 范围内服从 Beer 定律，标准曲线回归方程为：Y=0.1766X+0.0159，相关系数 r=0.9995，变异系数 1.23%，回收率 98%103%。结论 本实验将药典中铁的限量检查法与比色法结合，建立了铁的定量检查法，该法操作简便、快速
2、、准确，结果令人满意。 【关键词】 两性霉素 B； 灰化； 铁； 硫氰酸盐法； 比色法； 测定两性霉素 B 是从链丝菌培养液中分离得到的多烯大环内酯类抗真菌药，为全身性深部真菌感染的首选药。两性霉素 B 原料药稳定性较差，研究表明铁含量高是影响其稳定性的主要因素，因此铁含量的控制是两性霉素 B 杂质控制的重要指标。药典中硫氰酸盐法仅可用于铁的限量检查，无法确知其含量1。本实验将硫氰酸盐法与比色法结合，可准确测得两性霉素 B 中铁的含量，本法重复性好，结果令人满意。1 材料与方法1.1 材料与仪器Fe(III)储备液(0.1mg/ml) 准确称取 0.4317g NH4Fe(SO4)212H2O
3、(分析纯)置2500ml 容量瓶中，加水溶解后加硫酸(分析纯)2.5ml，加水至刻度，摇匀。Fe(III)标准液(20g/ml) 精密量取 Fe(III)储备液 20ml 至 100ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀。硫氰酸钾(分析纯)；过硫酸钾(分析纯)；硫酸(分析纯)；硝酸(分析纯)；盐酸(分析纯)；以上所用水均为纯化水。7230 分光光度计上海精密科学仪器有限公司；AEDD 微电脑红外线加热仪菏泽市电子控温技术研究所；箱式电阻炉北京太光节能技术有限公司。1.2 实验方法取两只 25ml 容量瓶，分别加入 10ml 供试品溶液，依次分别加入 5.0ml 硫酸(1mol/L)，2.0ml 过硫
4、酸钾(5%)，其中一只加入 5.0ml 硫氰酸钾(4mol/L)，另一只不加作为空白，分别用纯化水定容，摇匀。用 1cm 比色皿在室温下与波长 500nm 处测定吸光度。1.3 样品处理准确称取 1g 两性霉素 B 于坩埚中，先在红外线加热仪上加热炭化至无烟。移入箱式电阻炉中，于 550灰化 1h。冷却，加入 2ml 浓硝酸，水浴蒸干，再移入箱式电阻炉中，于 550灰化 4h2。冷却，加 5.0ml(1+9)盐酸溶解，移入 100ml 容量瓶中，加纯化水至刻度，摇匀，得供试品溶液。1.4 标准曲线绘制3取 10 个 100ml 容量瓶，分别加入 0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10
5、.0、15.0、20.0 和25.0ml Fe(III)标准液，加水至刻度，摇匀。对于每种浓度的溶液分别精密量取10.0ml 两份，加入两只 25ml 容量瓶中，按实验方法进行显色操作。此溶液分别含铁 0、0.08、0.16、0.24、0.32、0.40、0.80、1.20、1.60 和 2.00g/ml。室温下在 1cm 比色皿中于 500nm 处测定吸光植。以吸光度为纵坐标，溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。 2 结果与讨论2.1 显色原理 加入过硫酸钾可将溶液中的铁全部氧化为 Fe(III)，在酸性溶液中Fe(III)与硫氰酸根生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，可利用比色法测定溶液中铁离子含
6、量3。2.2 最大吸收波长的选择按实验方法显色操作，根据试剂空白对配合物的吸收曲线，测定知硫氰酸铁的最大吸收波长为 500nm。因此本实验选择 500nm 为吸收波长。2.3 配位离子的形成速度及稳定性室温下硫氰酸铁可快速形成并很快达到稳定，因为显色过程中加入氧化剂过硫酸铵可防止由于光线使硫氰酸铁还原后分解褪色，配位离子在 1h 内稳定，1h 后配位离子溶液变黄，吸光度降低。本实验进行显色操作后立即测定，结果理想。2.4 标准曲线标准曲线如图 1。回归方程为：4Y=0.1766X+0.0159 r=0.9995线性范围 0.12.0g/ml。2.5 样品处理方法确定样品处理直接影响测定的准确度
7、。本实验选择硝解法、高温灰化法等各种方法对样品进行处理，根据实验数据确定本实验样品处理方法，实验精密度和准确度理想。2.6 方法精密度的考察随机抽取一批两性霉素 B 样品按实验方法处理后，进行显色操作，做三批平行实验，结果如表 1，相对图 1 标准曲线标准偏差 1.23%，方法精密度高。2.7 方法准确度的考察随机抽取三批两性霉素 B 样品，按实验方法处理后进行显色操作，同时做加样回收实验，结果如表 2，回收率 98%103%，方法准确度高。3 小结两性霉素 B 完全灰化后用稀盐酸溶解，所得溶液中的 Fe(III)在酸性条件下与硫氰酸根生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，利用比色法测定铁含量，标准曲线回归方程：Y=0.1766X+0.0159，相关系数 r=0.9995，变异系数 1.23%，回收率98%103%。本实验方法将药典中铁的限量检查法与比色法结合，定量检测铁含量，操作简便，结果准确可靠。表 1 精密度实验( 表 2 样品测定及加样回收实验5【参考文献】1 中华人民共和国药典委员会. 中国药典S. 2005.二部:附录G.2 吕绪东. 灰化酸溶法测定奶粉中金属元素含量J. 哈尔滨商业大学学报(自然科学版)，2003，19(4)：501504.3 刘文英. 药物分析M.第 5 版. 北京：人民卫生出版社，2003：3234.
