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1、1决明子水提物对 D-半乳糖中毒大鼠急性 肝损伤的保护作用【关键词】 决明子；,决明子水提物；,肝损伤；,大鼠摘要：目的研究决明子水提物对 D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法 50 只大鼠随机分为正常组、模型组、大剂量给药组、小剂量给药组、阳性对照组 5 个组。给药组按 10，5 g/kg 剂量；阳性对照组按 0.2 g/kg 联苯双酯灌胃；正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃，共 5 d。第 4 天，模型组和给药组按 0.5 g/kg剂量腹腔注射 D-半乳糖，正常组腹腔注射等体积生理盐水。腹腔注射 D-半乳糖24 h 后，摘眼球取血，用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶(ALT)、
2、丙氨酸转氨酶(AST)的活性，血清、线粒体超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果决明子水提物显著降低因 D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清 ALT 的升高；对急性肝损伤大鼠血清 SOD，GSH-PX的活性有明显的升高作用及降低 MDA 的含量。结论决明子水提物对 D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤有保护作用。关键词：决明子； 决明子水提物； 肝损伤； 大鼠Protective Effects of Semen Cassiae Aqueous Extract on Acute Hepatic Injury Induced by D-galactoa
3、smine in RatsAbstract:ObjectiveTo study the protective effects of Semen Cassiae aqueous extract on acute hepatic injury induced by D-galactoasmine in rats.Methods50 rats were randomly divided into nomal group, model group, low and high dosage group and Biphengldimethylesteratis group. In test group,
4、 the Semen Cassiae aqueous extract were perfused to be into stomach for 5 days. Qn the fourth day, the D-galactoasmine 0.5 g/kg were injected into peritoneum in test groups one time to induce the models of acute liver lesion. The activities of aspartate transaminase(AST) and alanine 2transaminase (A
5、LT) were measured by full-automatic biochemical instrument, the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione perioxidase (GSH-PX), and the content malondialdehyde(MDA) were measured by colorimetric analysis.ResultsSemen Cassiae aqueous extract significantly reduced D-galactoasmine inducing
6、acute hepatic injury by decreasing ALT and AST in serum; the activities of SOD, GSH-PX in test group were higher than that of model group in serum and liver mitochondria.ConclusionSemen Cassiae aqueous extract have protecting effects for rats acute hepatic injury by D-galactoasmine.Key words:Semen C
7、assiae; Hepatic injury; Rats决明子 Semen Cassiae 是豆科植物决明子成熟干燥种子，处方名为草决明、生决明。决明子具有降血压、降血脂、导泻、抗菌、抗血小板聚集等多种作用13。本实验研究决明子水提物对 D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤的保护作用。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 药品及试剂取 500 g 生药材加入 4 000 ml(8 倍量)60乙醇，放置 1 h，在 60水浴回流 2 h，过滤，残渣加入 3 000 ml(6 倍量)60 乙醇 60水浴回流 2 h，合并滤液，用旋转蒸发仪回收溶剂，得粗粉 59 g(每克粗粉相当于生药材 8.5 g)。SO
8、D，MDA，GSH-PX 试剂盒购置南京建成生物工程研究所，联苯双酯由浙江温岭制药厂生产，批号 980813，其他试剂均为国产分析纯。1.1.2 动物 Wistar 大鼠，雌雄各半，体重为 180200 g，由延边大学医学部动物科提供。1.2 方法取大鼠 50 只，随机分为正常组、模型组、大剂量给药组、小剂量给药组、阳性对照组组 5 个组。给药组按 10，5 g/kg 剂量，阳性对照组按 0.2 g/kg 联苯双酯灌胃，正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃，共 5 d。第 4 天，模型组和给药组按 0.5 g/kg 剂量腹腔注射 D-半乳糖，正常组腹腔注射等体积生理盐水。腹腔注3射 24 h 后
9、，摘眼球取血，分离血清。大鼠处死后，迅速取出肝脏，称取 1.0 g 放入置有冰冷的匀浆介质（pH=7.5，0.25 mol/L 蔗糖，0.005 mol/L Tris-HCl，0.001 mol/L EDTA）的玻璃匀浆器中，在冰浴中制成 100 g/L 匀浆，在 2 000g 离心 10min，取上清液，用低温超速离心机以 16 000g 离心 20 min，取其沉淀部分，即为线粒体。再加入匀浆介质（pH=7.5，0.25 mol/L 蔗糖，0.005 mol/L Tris-HCl，0.001 mol/L EDTA）2 ml，用超声波打碎线粒体膜性结构，制成线粒体悬浮液。用全自动生化分析仪检
10、测血清 ALT，AST 的活性，用比色分析法检测血清、线粒体 SOD，GSH-PX的活性及 MDA 的含量。1.3 统计学处理数据以s 表示，应用 SPSS10.0 统计软件进行方差分析。2 结果2.1 血清 ALT，AST 的影响决明子水提物明显降低 D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清 ALT，AST 的升高（P0.05 或 P0.01）。结果见表 1。表 1 决明子水提物对 D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清 ALT，AST 的影响（略）与模型组比较，*P0.05,*P0.01；n=10 2.2 血清 SOD，GSH-PX，MDA 的影响决明子水提物明显升高 D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清S
11、OD，GSH-PX 的活力（P0.05），降低 MDA 的含量（P0.05）。结果见表 2。表 2 决明子水提物对 D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠 SOD，GSH-PX，MDA 的影响（略）与模型组比较，*P0.05；n=1043 讨论一般认为 D-半乳糖所致肝损伤是由于消耗提供尿苷合成的尿苷二磷酸及核糖核酸材料尿苷，导致糖原及 RNA、蛋白质合成障碍，引起肝细胞坏死。近年来研究表明，肝损伤是多因素参与的复杂过程，自由基和脂质过氧化在肝损伤中起着十分重要的作用。D-半乳糖引起肝细胞内钙离子增多，镁离子减少，钙离子增多时抑制线粒体的呼吸功能，激活磷脂酶，分解膜磷脂，破坏溶酶体膜，使蛋白水解酶释放，
12、并使黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶，加速氧自由基的产生，从而使损伤进一步加剧4。自由基是人体正常生化过程的中间产物，在机体正常及病理过程中都存在，同时机体在进化过程中获得了灭活氧自由基的一些酶，如SOD，GSH-PX 等。 SOD，GSH-PX 的变化可以间接地反应疾病情况下自由基的变化。SOD 为高效的清道夫，可抑制自由基启动的脂质过氧化,GSH-PX 是重要的催化过氧化氢分解的酶,它特异地催化还原性 GSH 对过氧化氢的还原反应,从而起到保护细胞膜结构与功能的完整作用。 MDA 是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜的结构，导致细胞肿胀、坏死，其含量反映了组织过氧化的损伤程度。因此，只有
13、当自由基产生过多或者机体内的酶系统过少时才导致疾病。氧自由基可促使不饱和脂肪自由基形成，脂质自由基可引起细胞膜的流动性、通透性和完整性的破坏，进而使其双层结构发生断裂，引起膜镶嵌的一系列酶的排列紊乱，功能丧失，细胞的能量产生系统瘫痪。本实验结果表明，决明子水提物对 D-半乳糖所致大鼠血清 ALT，AST 的升高有明显降低作用，给药组大鼠血清 SOD，GSH-PX 较模型组显著升高，而 MDA 含量显著降低，这说明决明子水提物的保肝机制与其对抗自由基脂质过氧化密切相关。5参考文献：1 钟先锋，邓泽元，黄桂东.决明子用效成分的提取J.南昌大学学报，2004，28(1)：96.2 王根生，韩哲武.甘草类黄酮对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响J.药学学报，1993，28(8)：572.3 李素婷，杨鹤梅，石艳华，等.黄芩茎叶总黄酮保肝作用的实验研究J.中国中医药信息杂志，2004，11(7)：593.4 徐 萍，刘华屏.常用急性肝损伤动物模型J.中国病理生理杂志，1995，11（4）：447.
