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1、11 例霍乱患者流行病学调查【关键词】 霍乱弧菌；河水；粪便摘 要 目的：对辖区腹泻病人粪便等标本进行培养监测，及时掌握腹泻病流行病学动态。方法：按霍乱防治手册及相关检验方法进行。结果：依次从患者粪便及患者发病前用过的河水中分离到139 群霍乱弧菌。关键词 霍乱弧菌；河水；粪便2005 年 8 月中旬，我们从本区农村采集的腹泻病人粪便和患者发病前曾用过的河水中，同时分离到 3 株 O139 群霍乱弧菌。这也是本地区首次从疫点河水中分离到 O139 群霍乱弧菌。现将流行病学调查及鉴定结果报告如下。1 流行病学调查患者男性，75 岁，本区伍佑镇伍西村人，老两口单独居住，居住环境差，家中无自来水，平
2、时经常饮用生水，洗菜、淘米都在自家河边用水。发病前日去过女儿家一趟，无集体聚餐史。8 月 11 日上午 9：00 在家中发病，腹泻、无腹痛，神志清楚，不发热，每小时 1 次2 次，为黄色稀水样，量多。后呈米泔水样，并呕吐一次，为胃内容物；入院后，血压最低时为 60/40 mmHg；肾功能检查：尿素氮 8.74 mmol/L，肌酐 159.96 mmol/L，尿酸 378.50 mmol/L，脱水症状较重。经抗生素输液治疗 5 d 后痊愈出院。2 材料和方法2.1 样品来源22.1.1 粪便标本 为患者稀水样便二份。2.1.2 河水等样品 一为患者家后经常饮用的河水，上游（左邻）、中游（家后）、
3、下游（右邻）的河水各二份；二为疫点河岸鸡粪泥土样二份。2.2 培养基、诊断血清 培养基：碱性胨水增菌液、4 号琼脂、TCBS 琼脂、半固体培养基（由江苏省博达生物卫生技术有限公司提供）；各种微量生化反应管、氧化酶纸片（由杭州天和微生物试剂有限公司提供）；霍乱 O1、O139 群快速试纸（由北京庄迪浩禾生物医学科技有限公司提供）；诊断血清：O1 群多价、分型因子血清以及霍乱 O139 群诊断血清（由兰州生物制品研究所提供）。2.3 检验方法 粪便（鸡粪泥土）、河水检测按霍乱防治手册相关检验方法进行。粪便 先行碱性胨水增菌 6 h8 h、河水经 110 倍浓缩碱性胨水增菌 18 h 后，进一步在四
4、号琼脂培养基上进行分离培养。挑取可疑菌落作生化反应和血清凝集试验。粪便标本可在现场用霍乱金标快速试纸进行初筛检测，后进一步作分离培养。 3 结果3.1 试纸快速检测 3粪便标本经 O1 群多价、O139 群快速金标试纸检测，结果：O1 群多价为阴性；O139 群为阳性。3.2 培养特性 形态学检查及动力观察。3.2.1 在碱性胨水中，经 37 8 h12 h 增菌培养，培养液略显混浊，表面稍有菌膜形成；在四号琼脂平板上，37 24 h 菌落较大，2 mm3 mm，还原亚碲酸钾中心呈黑色，半透明，光滑、湿润，边缘整齐；在 TCBS 平板上呈圆形稍扁平的黄色菌落，菌落大，表面光滑湿润。3.2.2
5、培养物经涂片染色镜检，为革兰阴性稍弯曲的小弧菌，呈弧形或逗点状，首尾相接，平行排列，不形成芽胞和荚膜，在暗视野显微镜下运动极活泼，呈穿梭或流星状。3.3 生化特性 见表 1。表 1 O139 群霍乱弧菌生化结果（略）3.4 血清学鉴定 新分离的可疑菌株与霍乱 O1 群多价血清，分型因子血清及 O139 群诊断血清进行凝集试验，结果：O1 群多价-；小川-；稻叶-；O139 群；生理盐水对照-。3.5 疫点相关样品检测结果 患者粪便、患者家后河水及下游（邻居第三家）河水均检出 O139 群霍乱弧菌；上游（邻居第三家）河水、河岸鸡粪均未检出。44 讨论1993 年 3 月首次报道了一起由新血清群的
6、非 O1 群霍乱弧菌所致的霍乱暴发流行。由于该菌不属于已知的霍乱弧菌 138 种血清型中的任何一型。故确定为O139 群霍乱弧菌。在我国首次在新疆南部部份地区出现暴发流行，随后国内其他地区尤其东部沿海常有散在发现。本次报告是本市首次从患者粪便及外环境水中同时检出该菌。本菌株的流行病学及致病性特点：年老体弱、身体抵抗力低下者易感发病。本例患者即为 70 多岁老者；与 O1 群霍乱相似，发病有明显的季节性，本病例发病在 8 月中旬。霍乱弧菌是一种水生性细菌，除在患者粪便能检出外，还可从污水、海水、河水、海产品中检出，但据文献报道1河水中检出率并不高。与居民的卫生条件、生活习惯、主要是饮用不洁水源、食物有关。农村婚嫁丧事聚餐时发生频率高。这次从患者粪便和河水中分离到的三菌株，生物学性状及血清分型基本相同，与文献报道2的 O139 群霍乱弧菌亦基本一致。但在乳糖发酵、VP 试验上略有差异。笔者认为可能与下列因素有关：一是由于诸多因素的影响，外环境本来就存在着这些有差异的菌株；二是同一菌株在不同人体内繁殖可能产生表型变异。参考文献：1卫生部卫生防疫司.霍乱防治手册M.第 4 版.北京，1987：72.2郑官增.O139 霍乱弧菌生物学特性差异与发病关系分析J.中国卫生检验杂志，1999，9（3）：205.
