《甜菜碱抗三黄鸡肉鸡热应激效应及其使用安全性评价的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《甜菜碱抗三黄鸡肉鸡热应激效应及其使用安全性评价的研究（74页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、湛江海洋大学硕士学位论文甜菜碱抗三黄鸡肉鸡热应激效应及其使用安全性评价的研究姓名：黄志毅申请学位级别：硕士专业：动物营养与饲料科学指导教师：安立龙20050430甜菜碱抗三黄鸡肉鸡热应激效应及其使用安全性评价的研究摘要本试验研究了甜菜碱抗三黄鸡肉鸡热应激的效应，从多方面揭示了其抗热应激的机理，为利用甜菜碱开发抗肉鸡热应激添加剂奠定了一定的基础；应用毒理学的方法对甜菜碱添加剂使用安全性进行了评价，确定了在肉鸡日粮中添加甜菜碱的安全使用剂量范围。试验研究分为两大部分：第一部分：甜菜碱添加剂抗三黄鸡肉鸡热应激效应的研究。目的在于探讨甜菜碱添加剂抗三黄鸡肉鸡热应激的效应，并从组织学、营养学、免疫学和内
2、分泌学以及血液生物化学等方面揭示甜菜碱抗热应激效应的机理。将1 日龄1 1 2 只三黄鸡育雏至2 8 日龄后，在第 2 9 日龄随机分为四组，每组以笼为单位，每个笼子装4 只鸡，每组7 个重复。第1 组为对照组，第1 I 、I I I 、组为试验组，分别在基础日粮中添加0 0 5 、0 1 、O 2 的甜菜碱。在整个试验期( 第2 9 日龄一9 1 日龄) 内，鸡舍内的温度保持在3 0 左右，湿度保持在6 6 左右，使肉鸡处于热应激状态。试验期内测定了肉鸡的生产性能，组织器官的生长发育，营养物质的代谢，免疫功能，血液生理生化指标，血清T 3 、皮质酮等激素的含量。试验结果如下：在整个试验期内，
3、在日粮中添加O 0 5 、0 1 和0 2 甜菜碱组肉鸡的平均日采食量分别比对照组高2 3 6 ( p 0 0 5 ) 、1 7 5 ( p 0 0 5 ) 和8 3 9 ( p 0 0 5 ) 。甜菜碱能促进肉鸡肝脏的 生长发育，其中在第9 1 日龄时，在日粮中添加0 2 甜菜碱组肉鸡肝脏的重量比对照组高3 9 8 9 0 0 0 5 ) 和1 4 7 1 ( p 0 0 5 ) 。在第7 0日龄时，在日粮中添加0 0 5 甜菜碱组肉鸡血清无机磷的含量比对照组高8 3 4 2 ( p 0 0 5 组 0 1 组 0 2 组，各组间的差异都达N - J “ 极显著水平O 0 0 5 ) ；8
4、3 7 m g k g 剂量组仔鼠的窝平均初生体重和2 1 天后窝平均体重均显著低于对照组( p 0 0 5 ) ，并且在胎儿平均体重、平均体长和平均尾长这三个指标上极显著低于阴性对N 鲑t ( p 0 0 5 ) ，8 4 m g k g 剂量组仔鼠的平均尾长也高于阴性对照组0 0 0 5 ) ；8 3 7 m g k g 剂量组仔鼠的外观畸形率极显著O 0 0 5 ) ，1 7 5 ( p 0 0 5 ) a n d8 3 9 ( p 0 0 5 ) r e s p e c t i v e l y ( 墓) C o m p a r e dt oc o n t r o lg r o u p
5、，b e t a i n ec o u l di m p r o v et h eg r o w t ho ft i s s u e sa n do r g a n so fb r o i l e r s ，t h e9 1 一d a yw e i g h to fl i v e ri nb r o i l e r sf e d0 2 b e t a i n ew a s3 9 8 9 ( p 0 0 5 ) a n d1 4 7 1 ( p 0 0 5 ) r e s p e c t i v e l yi n c r e a s e d ( 9C o m p a r e dt oc o n
6、t r o lg r o u p ，t h e7 0 d a ys e r u mi n o r g a n i cp h o s p h o r u so fb r o i l e r sa d d e d0 0 5 b e t a i n ew a s8 3 4 2 ( p a d d e d0 0 5 g r o u p a d d e d0 1 g r o u p a d d e d0 2 g r o u p ，g r e a ts i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) h i g h e r A sf o rl i t
7、t e ra v e r a g en e o n a t a lb o d yw e i 曲ta n d2 1 一d a yl i t t e rl Va v e r a g eb o d yw e i g h t ，8 3 7 m g k gd o s eb e t m n ew e r es i g n i f i c a n t l y o a 0 0 5 ) ，m o r e o v e r , a v e r a g ee m b r y ow e i g h t 、a v e r a g eb o d yl e n g t ha n da v e r a g et a i ll
8、e n g t h ，t h e s et h r e ei n d e xw e r eg r e a ts i g n i f i c a n t l y ( p O 0 5 ) 。采用笼养( - - 层) ，自由采食，自由饮水( 2 ) 试验阶段试验分四个阶段，第一阶段时间为1 搦日龄，第二阶段为2 9 - 4 9 日龄，第三阶段为5 0 - - 7 0 日龄，第四阶段为7 1 - 9 1 日龄。其中，第一阶段为育雏阶段；其余三个阶段为热应激阶段( 3 ) 基础日粮根据中华人民共和国专业标准( z 8B4 3 0 0 5 - 8 6 ) 1 勾用仔鸡的饲养标准，结合文献报道设计了日粮配方
9、( 见表1 ) 。1 2 2 管理( 1 ) 给料和记录每日早晨8 ：和下午1 8 ：o o 给料，记录给料量；在鸡第3 5 、4 2 、4 9 、5 6 、6 3 、7 0 、7 7 、8 4 、9 1 日龄时以笼为单位，记录余料量。在鸡第2 9 、3 5 、4 2 、4 9 、5 6 、6 3 、7 0 、7 7 、8 4 、9 1 日龄时以笼为单位，记录体重( 2 ) 环境从2 9 日龄至9 1 日龄为热应激期。于每天8 ：0 0 ，1 2 ：0 0 ，1 8 ：o o ，2 2 ；o o 记录鸡舍内温度和湿度，温度由数字温度计测得，相对湿度由于湿球计测得，见表2 表22 9 9 1 日
10、龄的鸡合温度和相对湿度注l 温度总平均值邓：0 0 不敢+ 1 2 80 0 不敢0 + 1 8 ：0 0 不致+ 2 2 l0 0 不敦y 4湿度总平均值= ( 8 ：0 0 示数+ 1 2 ：0 0 示数0 + 1 8 ：0 0 示数+ 2 2 l0 0 示数y 4在整个试验期内，温度、湿度始终高于鸡的正常生长范围，最高温度时可达3 4 “ 0 ，最高湿度时可达9 2 这说明在试验期内，肉鸡的生长环境是一种高温高湿的环境，肉仔鸡处于热应激状态在整个热应激期内实行1 6 小时光照，8 小时黑暗的光照程序用照度计测定肉鸡活动范围内鸡背处的光照强度，共选择了四个点，分别测定了笼上层和笼下层的的光
11、照强度，并取其平均值。试验期肉鸡舍光照强度如表3 表3 鸡舍内光照强度_，L，LL_Il甜菜碱抗三黄鸡肉鸡热应激效应及其使用安全性评价的研究( 3 ) 防疫与免疫免疫程序如表4 表4 免疫程序1 3 试验测定的项目1 3 1 生产性能指标采用常规方法测定肉鸡在第2 9 - - 4 9 日龄、5 0 - 7 0 日龄、7 1 , , - 9 1 日龄和全期( 2 9 - - 9 1 日龄)的平均日采食量、平均日增重、饲料转化率、死亡率和平均屠宰率、平均半净膛率，平均全净膛率。1 3 2 胴体及组织学观察在肉仔鸡第4 9 日龄、第7 0 日龄，第9 1 日龄时从每组随机抽取鸡4 只( 2 公2 母
12、) 进 行屠宰，取心脏、肾脏、肺脏、肝脏、胰脏、腺胃、胸腺、脾脏、法氏囊、甲状腺、肾上腺、睾丸，用电子天平称重，并计算器官指数【器官指数= 器官重量( g ) ，体重( 1 【g ) 】。取7 0 日 龄时的心脏、肾脏、肝脏、胰脏、腺胃、胸腺、脾脏、法氏囊、甲状腺、睾丸，用1 0 福尔马林固定，经水洗、脱水，透明，石蜡包埋并切片，染色，在显微镜下观察并拍照1 j 3 动物代谢试验( 1 ) 饲料样品的收集采集每个阶段的饲料样品，以四分法缩样至每个样本l O O g 左右，袋装，置干燥器保存( 2 ) 粪样的收集采用全收粪法，每组随机选定三个笼子，分别在肉仔鸡第4 6 4 8 日龄、第6 7 -
13、 - 6 9 日龄、第8 8 - 9 0 日龄连续3 d 进行收粪。( 3 ) 测定指标用W Z R - 1 型氧弹式测热仪( 长沙奔特仪器厂生产) 分别测定粪与饲料的能量水平，计算能量表观代谢率。用凯氏定氮法( G B 厂I M 3 2 9 4 ) 分别测定粪与饲料粗蛋白的含量，计算粗蛋白表观代谢率。用乙二胺四乙酸二钠( E D l A ) 络合滴定法【明分别测定粪与饲料钙的含量，计算钙元素的表观代谢率1 4湛江海洋大学硕士学位论文参照文献【8 8 】，分别测定粪与饲料磷的含量，计算磷元素表观代谢率。1 3 4 免疫指标的测定( 1 ) 血样的采集在肉仔鸡第4 5 日龄、第6 6 日龄、第8
14、 7 日龄时分别从各组肉仔鸡中随机抽取4 只鸡f 2公2 母) ，每只翅静脉采血2 m l ，肝素抗凝( 2 ) 测定指标红细胞c - 曲受体花结率参照文献【8 9 】，取经生理盐水洗涤的红细胞悬液( 1 2 5 1 0 7 m 1 ) 1 0 0 9 l ，加等量的c 3 b 致敏菌液( 1X1 0 s ) ，在试管内充分混匀3 0 m i n ，加1 0 滴生理盐水混 匀，以O 2 5 戊二醛固定，涂片，瑞氏姬姆萨氏染色；高倍下计数6 个视野中红细胞的个数和具有花结的红细胞( 结合2 个以上酵母菌的红细胞) 数日计算花结形成率白细胞硝基蓝四氮唑( n i t r o b l u et e
15、t r a z o l i u m ，N B T ) 还原试验参照文献【9 0 】，取抗凝血 0 1 m l 加入等量N B T ( 0 1 蜘溶液，放入小试管中混匀，加盖后置3 7 温箱孵育2 5 m i n ，再放室温1 5 r a i n 。然后进行推片，甲醇固定，5 甲基绿水溶液染色1 5 r a i n 高倍或油镜下计数6 个视野中白细胞的个数和N B T 阳性细胞( 胞浆内有蓝黑色颗粒) 数计算白细胞N g r阳性率1 3 s 血液生理生化指标和内分泌激素的测定在第4 5 日龄、第6 6 日龄、第8 7 日龄时常规方法测定血液中红细胞总数、白细胞总 数和血红蛋白含量。在肉仔鸡第4
16、9 、7 0 、9 1 日龄时，分别从各组肉仔鸡中随机抽取4 只鸡( 2 公2 母) ，每只翅静脉采血5 m l ，制备血清，- 2 0 保存测定血清H C 0 3 一、总蛋白、无机磷、钙、尿酸、甘油三酯、总胆固醇，碱性磷酸酶、葡萄糖、钠、钾的含量和三碘甲状腺原氨酸( T 3 ) 、甲状腺素C r 4 ) 、皮质酮、胰岛素、胰岛素样生长因子1 0 G F - 1 ) 的含量。1 4 数据处理采用单因素方差分析，用D u n c a n s 进行多重比较并参照文献【9 1 】和【9 2 】2 结果与分析2 1 甜菜碱对热应激三黄鸡肉鸡健康和行为的影响甜菜碱对热应激三黄鸡肉鸡存活率和行为的影响如表5 所示由
