《苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白基因的克隆及表达分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白基因的克隆及表达分析（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、!“ 卷 # 期 $%$ 年 ?(;).2(/-8;.98;.98;.9B:9:, UA6B7，3.=V!?C66A UA6B7A76AC;%?9; ;6C.?A 分析!YXR 蛋白质样品制备： 和 2#9#- ，;，! 所 示） ，所含营养期杀虫蛋白基因分别命名为 $%!:。4!-引起 ?A;!:引起 6DE*!-;*。45!$GD;5变化，而 ?;*!-;*引起了 ?B(:)!?H(:)变化； 与 $%;!-;!， 其中 4;!-;!引起了 ?B(;!?H(;变化。$%;。图 营养期杀虫蛋白基因在总 +,- 酶切片段中的定位JKLM=KNF%OFNFPNKEA EQ $%M“#$% （如图
2、 ;- *， )） ； 所得的两个重组质粒分别 电转化到苏云金芽胞杆菌 $%， #9#%(V。图 ;阳性转化子质粒酶切、 CEHNGFDA 杂交及 647 扩增图谱JKLM;6DEQKFC EQ 2ECKNKWF NDIACQEDRAIANC2ICRKOFASBRF%OKLFCNKEA、 CEHNGFDA%1EN IAO 647%IR2KPINKEA-M !“#!%OKLFCNKEA； #MUB1DK%RI2 EQ DFIPNKWF QKL -； 4M647 IR2KPINKEAM6ICRKO 2#9#M6ICRKO 2#9#； !M6ICRKO 2#9#； M=GHNNF WFPNED 2U
3、$!*提取上述基因工程菌的营养期杀虫蛋白进行=+=%6-?X 电泳， 结果显示营养期杀虫蛋白基因$%， #9#%(V 在阴性对照情况 下， 按照 M) 的方法进行生物毒力测定。结果发现营养期杀虫蛋白 8K2/,?ABCD； %,E4 序列分析结果可以看出， 克隆到的基因!“#“!、 !“#$ 和 !“#L 与已知营养期杀虫蛋白基因存 在很高同源性。其中 !“#“! 基因同样存在着已知营养期杀虫蛋白基因的 L 个差异位点， 暗示了这 L 个位点在营养期杀虫蛋白结构上， 可能位于较为灵活的空间位置， 对营养期杀虫蛋白功能影响不大。而来自不同亚种的基因 !“#$ 和 !“#L 与营养期杀虫蛋白基因
4、!“#!6 （)） 序列完全相同， 提示营养期杀虫蛋白基因可能与杀虫晶体蛋白不一样， 不具有多样性，在遗传上比较保守， 可能是苏云金芽胞杆菌菌株某种功能所需的关键基因， 对其深入研究可望获得更加有效的基因工程菌， 解决杀虫晶体蛋白杀虫特异性的极限问题。蛋白质表达结果证实了所克隆的基因 !“#“!、!“#$ 和 !“#L 是营养期杀虫蛋白基因， 并且能够在!“#Y的苏云金芽胞杆菌无晶体突变株中表达。在不同血清型的 %: 受体菌 %? ( )%, O*1!，7 54;/*!+,/,(.?,( ，A%,$(,), 57 8 G! ，Q01!*# I ，T*$“797 7 C0J*! M G，A*!,
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