选择性培养基

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1、葡萄糖肉浸液肉汤 Dextrose Meat Infusion Broth用途:用于溶血性链球菌的增菌培养 配方:(g/L) 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 10.0 磷酸氢二钾 2.0 葡萄糖 10.0 pH 值 7.5 0.1 25 原理: 蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸 氢二钾为缓冲剂;葡萄糖提供碳源。 用法: 称取本品 30.0g,煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压 灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 24 小时。 质控菌株 溶血性链球菌 单增李斯特氏菌 大肠 杆菌 沙门氏菌 27853 25922 140

2、28 生长情况 (10-8)+ (10-8)+ +/+/匹克氏肉汤基础 A Picks Broth BaseA用途:用于溶血性链球菌的增菌培养 配方:(g/L)胰蛋白胨 10.0 牛心浸粉 20.0 叠氮钠 0.065 结晶紫 0.002 pH 值 7.3-7.5 原理:25胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;脱纤维兔血(或羊血) 为溶血性链球菌提供大 量生长因子;结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。 用法: 称取本品 30.0g,加热溶于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121高压灭菌 15 分钟, 冷 至 50左右时,加入脱纤 维羊血,混匀。 质量控制: 在 36 1培养 18-24

3、 小时。 肉浸液肉汤培养基 Meat Infusion Broth用途:用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养(GB 标准) 配方:(g/L) 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 12.0 磷酸氢二钾 2.0 pH 值 7.5 0.1 原理: 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;氯化 钠可维持均衡的渗透压。 用法: 称取本品 20.0g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。 25 质控菌株 溶血性链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 菌株编号 ATCC3

4、2210 ATCC25923 ATCC25922 ATCC14028 生长情况 + + + + 浑浊 浑浊 浑浊 浑浊叠氮钠葡萄糖肉汤 Azide Dextrose Broth 用途:用于链球菌的增菌培养 配方:(g/L) 胰蛋白胨 15.0 牛肉浸粉 4.5 氯化钠 7.5 葡萄糖 7.5 叠氮钠 0.2 pH 值 7.0 - 7.4 原理: 胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴 性菌。 用法: 称取本品 34.7g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 18-24

5、 小时。 质控菌株 肠球菌 大肠埃希氏菌 粪肠球菌 金黄色葡萄球菌 ATCC25922 ATCC29212 乙基紫叠氮钠肉汤 用途:用于链球菌的增菌培养 配方:(g/L) 酪蛋白胨 13.5 酵母浸粉 6.5 葡萄糖 5.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠 2.7 磷酸 二氢钠 2.7 叠氮钠 0.4 乙基紫 0.00083 pH 值 7.0 0.2 原理: 酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠 可抑制革兰氏阴性菌; 氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂; 乙基紫作为指示剂。 用法: 取本品 35.8g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压

6、灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 25KF 链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 用途:用于链球菌的选择性分离及计数(GB、SN 标准) 配方:(g/L) 月示蛋白胨 10.0 酵母粉 10.0 甘油磷酸钠 10.0 氯化钠 5.0 麦芽糖 20.0 乳糖 1.0 叠氮钠 0.4 琼脂 13.0 溴甲酚紫 0.015 pH 值 7.2 0.2 原理: 月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖和乳糖为可发酵糖类;氯 化钠维持均衡的渗透 压;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;琼脂是培养基的凝固剂;溴甲 酚紫为指示剂染料。 用法:称取本品 69.4g,加热溶解于 1000ml

7、 蒸馏水中,121高压 灭菌 15 分钟,冷却至 50-60时,加入无菌 1%TTC 溶液 10ml, 混匀,倾入无菌平皿,备用。 质量控制: 在 36 0.5下培养 48h。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 培养特征 红色或粉红色中心 粪性链球菌 大肠埃希氏菌 CMCC(B)32223 ATCC25922肠球菌琼脂(胆盐七叶苷叠氮钠琼脂) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 用途:用于食品和水中肠球菌的计数 货号:HB0133-3 配方:(g/L) 牛肉浸粉 3.0 胰酪蛋白胨 17.0 酵母粉 5.0 牛胆粉 10.0 氯化钠 5.

8、0 七叶苷 1.0 柠檬酸铁铵 0.5 叠氮化钠 0.25 柠檬酸钠 1.0 琼脂 13. pH 值 7.1 0.2 原理: 胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡 的渗透压;细菌水解 七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性 抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的 凝固剂。 用法: 称取本品 56.3g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压灭菌 15 分钟,冷至 45 1,倾入含 1ml 样品 液平皿中约 15ml 培养基,混匀,凝固。35 2倒置培养基 培养 24 2h。注:从保温开始

9、至做成平板时间不要超过 4h。 质量控制: 在 36 0.5培养 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 被抑制 培养特征 棕黑色,具有棕色晕轮 粪链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922CATC 琼脂 CATC Agar 用途:用于食品和饮料肠球菌的分离培养 配方:(g/L) 胰酪蛋白胨 15.0 酵母浸粉 5.0 磷酸二氢钾 5.0 柠檬酸钠 15.0 吐温 80 1.0 碳酸钠 2.0 叠氮钠 0.4 红四氮唑(TTC)0.1 琼脂 15.0 pH 值 7.00.2 原理: 胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿

10、物质,磷酸二氢钾是缓冲剂。琼脂 是培养基凝固剂。 用法: 称取本品 58.5g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,冷至 5055时, 倾入无菌平皿, 备用。 质量控制: 25胆盐七叶苷琼脂 Bile Esculin Agar 用途:用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养 配方:(g/L)蛋白胨 8.0 牛胆盐 20.0 柠檬酸铁 0.5 七叶苷 1.0 琼脂 15.0 pH 值 7.1 0.2 原理:蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形 成黑色的 6,7-二羟 基香豆素;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培 养基的凝固

11、剂。 用法: 称取本品 44.5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 22-24 小时。 质控菌株 肠球菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 25922 25923 生长情况 (10-7)+ (10-7)+ 黑色 + /哥伦比亚血琼脂基础 Columbia Blood Agar Base 用途:营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基 配方:(g/L) 酪蛋白胰酶消化物 10.0g 心胰酶消化物 3.0g 玉米淀粉 1.0g 肉胃酶消化 物 5.0g 酵母浸出粉 5.0g 氯化钠 5.0g 琼脂 10.0g PH 值 7.3 0.2 原

12、理: 酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维 生素和氨基酸;淀粉 能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。 用法: 称取本品 39 克,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121高压灭菌 15 分 钟,冷至 45-50左右时, 加入相当于 20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾 入无菌平皿。 质量控制: 在 30-35培养 18-24 小时。 质控菌株 金黄色葡萄球菌 单增李斯特氏菌 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 铜绿假单胞菌 菌株编号 ATCC 25923 ATCC 19114 ATCC 25922 A

13、TCC 14028 CMCC 10104 生长情况 良好 良好 良好 良好 良好 有黄色色素 无 色透明小菌落 无色透明大菌落 无色大菌落 有绿色色素 其它特征LIM 培养基 LIM Medium 用途:用于链球菌的分离培养(Japan 方法) 配方:(g/L) 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨 20.0 葡萄糖 2.0 碳酸氢钠 2.0 氯化钠 2.0 磷酸 氢二钠 0.4 pH 值 7.8 0.1 原理: 胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持 均衡的渗透压磷酸氢 二钠作为缓冲剂。 用法: 取本品 36.4g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15

14、分钟,待培养基冷至 45-50时,加入多粘 素 E10mg 和萘啶酮酸 15mg ,混匀 质量控制: 25BETA-SSA 琼脂 BETA-SSA Agar 用途:用于链球菌的选择性分离培养 配方:(g/L) 蛋白胨 15.0 大豆蛋白胨 5.0 氯化钠 5.0 麦芽糖 0.25 琼脂 13.0 抑菌剂 0.0262 pH 值 7.1 - 7.5 原理: 蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠可维持均衡的渗 透压;琼脂是培养基 的凝固剂。 用法: 取本品 38.3g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,115高压灭菌 20 分钟,冷至 50左右 时,无菌加入 5-10%的脱 纤维

15、羊血,混匀,倾入无菌平皿。 质量控制: 25粪肠球菌琼脂 Enterococcus faecalis Agar用途:用于粪肠球菌的选择性分离 配方:(g/L) 月示胨 0.1 麦芽糖 13.0 酵母浸粉 10.0 甘油磷酸钠 20.0 氯化钠 10.0 乳糖 10.0 溴甲酚紫 5.0 叠氮钠 1.0 TTC0.015 琼脂 0.4 pH 值 7.2 0.2 原理: 月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;乳糖是大肠菌群可发酵的 糖类;叠氮化钠可抑 制革兰氏阴性菌;溴甲酚紫和 TTC 作为指示剂;琼脂是培养基的 凝固剂。 用法: 取本品 70.0g , 加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,煮沸 5 分钟,冷至 50左右,倾入无菌平皿,备用。 质量控制:25缓冲蛋白胨水 Buffered Peptone Water用途:用于阪崎杆菌前增菌培养(GB2008 标准) 配方:(g/L) 蛋白胨 10.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠(含 12 个结晶水)9.0 磷酸二氢钾 1.5 pH 值 7.2 0.2 25 原理: 白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二 氢钾和磷酸氢二钠是 缓冲剂 用法: 称取本品 20.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟备用。 质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。 质控菌株

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