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1、黑龙江医药HeiLo ngjiangMedieineJournalv ol.17No.52004.375。中药有效成分提取分离方法研究进展沙宏哈尔滨华瑞生化 药业有限责任公司摘 要目的:中药有效成 分提取和 分 离方法的研究进展。方 法:选择参阅相关 文献,对孔进 行纷合、分析和归纳。结果:中药有效成分提取和 分离方法取得较大进展。关键词提取分离;新型;新技术;研究进展随着 我 国正 式 加 人WTO,中 国医药 市场 融人国际医药大市场的广度和深度也进步加剧。尤其我国传统中医药面临着前所未 有 的发展机遇和 挑战。一方面,做为世界优 秀传统医药文化,中医药以其系统的理论、独特的 方法和显著的
2、疗效正 被世界 上越来 越 多的国家和人民所接受。而另一方面,我 国 中医药又 面对着日、韩和欧美对传统医药积极开发研究的挑战。如何在新形势下抓住机遇、迎接挑战呢?在继承和发扬中医药优势和特色的基础 上,充分利 用现代科学技术,借鉴 国际通行的医药标准规范,提 高中药的质量,研究开发进入 国际中药市场的 中药 产品,实现 中药的现代 化、国际化。而提高中药的质量,让中药进人国际市场,这就对中药的制备加工 工 艺提出 了更高的要求,其中中药有效成分的提取分离过程是其重要的关键环节。根据近些年发表的文献,将中药有效成分提取和分离方法研究进 展分几个方三醋和胆固醇,从而使出血 时间延 长,血 小板寿
3、命延长,聚集度降低,血小板和白细胞轻度 减少,白细胞三烯和TXA:下降,减少 心纹痛患者对硝酸甘油 的需求 量,降低心 肌耗 氧量。EPA的摄人 量 同心脏性碎死呈负相关。动物试验:使实验动物动脉硬化程度 明显减轻,还可缩小 实验性动物 心梗和脑梗的范围。2.3对糖尿病的治疗鱼油 可使糖尿病 人血清和 细胞 膜 中减少的E P A和DHA得 到相 应补充,从而增加胰岛素的释放量,对初期糖尿病有 一定的预 防和治疗作用。. 24对尿毒症的治疗肾病综合症 的特点为血浆 中各种脂蛋白成分增加,脂质代谢发生异常,TXA:增高而TC、LDL一C、TG和VLDL一C下降。鱼 油中E P A具有 抑制TX
4、A:形成,促进 纤维蛋 白溶解,促进组织纤维蛋白溶酶原激活 的作用。. 25对偏头痛的治疗。一3多不饱 和脂肪酸对偏头痛的作用在于 影响前列腺素的代谢,提高红细胞和血小板 中EPA和DHA的含量,使血 小 板 聚集抑制因子一FD I:的增加,使TX AZ减少,血 小板的5一经色胺游离减少,从而减轻脑血管痉挛缓解偏头痛症状。2.6风湿性关节炎的治疗鱼油中EPA和DHA所特有 的 一 种作用是影响白三烯的形成。白三烯是炎症反应和过敏反应的重要介质。初步研究结果表明,EPA能减轻关节压痛,缓解 风湿关节 炎 的症 状,缩短病程。. 27对支气管哮 喘 的治疗哮 喘是一 种 炎症性疾病。EPA可 通过
5、两种 途径缓解 哮 喘症状:一 种是减轻气道 的 中性 白细胞浸 润;另一种是减弱炎 症介质白三烯的生物活性。2.8营养作用及其它功能因子DHA是人体维持视觉灵敏度所必需的营养物质,并对人体提高自身免疫力,提高脑细 胞活性,改善记忆力以及智力 开 发有 重 要 和深远的研究价值。此外,还 有 临床报道称高纯度 的不饱和脂肪酸对多种血液病症以及女性乳腺癌有一定的防治效果。3不 良反应 监 测EP A和DH A是从深海 鱼 油中精制 提纯所得物,无毒 副作用,多年来临床上尚未见任何不良反应。4讨论最初受格陵兰岛的爱基斯摩人极少患动脉粥状 硬 化性 疾病且有出血倾向这一 事实的启发,对他们主要食用
6、的海洋鱼类进行了系统研究。研究表明,鱼油中的E PA和D H A有 明显的降血脂,抑制血小板聚集,延缓血栓形成,抗动脉粥状硬化等作用。据最新报道,E PA和DH A还有明显的免疫活性和 抑癌的功效,有治疗糖尿病、控制机械性过敏及关节炎的作用。故目前已被广泛应用于 临床与研究。收稿日期:2004一04一2 6一376黑龙江医药HeiLongjiangMediein。Journalv o一17No.,2004面介绍如 下。1经 典 的提取 分离 方法例如,提取法有溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、升华法。其中溶剂提取法包括浸渍法、渗 流法、煎煮法、回流提取法,连续提取法等。分离 纯化方法有系统溶剂分离法,
7、两相溶剂萃取 法,沉 淀法,盐 析 法,分馏法,结晶法,色谱法等。2现代化 分 离技术 的应用2.1大孔树脂吸附法大孔 吸附树脂是一种不含交换基因、具有大孔径结构的有机高分子 聚合物 吸附剂。主要 是以苯乙烯、二乙烯苯 为原料,在0.5% 的 明胶 混悬液中,加人一定比例的致孔剂 聚合而成。按其极性可分为低极性和高极性大孔 吸附树脂。该树脂具有 吸附容量大,选择性好,易 于解吸附、机械 强度高、再生处理简便、吸附速度快等优点。尤其适用于分离纯化贰类、黄酮类、皂贰类、生 物碱等成分及大规模的生产。据苑可武,等报道,水 提法提取甘 草 中 的甘草酸得率仅约3肠,氨 性醇提 取法 提取甘草酸 得 率
8、达10.4 9%,大孔树脂吸附法 提取 甘 草 酸 得率 高达9 0 %以上,结果表明大孔 吸附树脂的提取效率高。.22超声波提取技术超声波提取技术,是 指以超 声 波辐射压强产生的骚动 效应,空 化效应和热效应,引起机械搅拌,加以扩散溶解 的一种 新型的提取方法。该技术能够更有效地提高有效部位的提取率,提高药物溶出速度和溶出次数,缩短提取时间。水浴与超声方法中,影响黄酮类药物提取的 主要条件基本相 同,但超声条件下提取效果优于水浴。超声法提取多糖有较大的优势,提取时间短,勿需加热,提取量 多幻。另外超声波破碎过程是一个物理过程,浸提过程中无化学 反应,被浸提的生物活性物质在短时 间 内保持不
9、变,生物 活性不减。2.3高效毛细管电泳技术高效毛 细管电泳法是近年来迅 速发展的一种新型分离分析技术,以高质电场为驱 动力以毛细管为分离通道依据样品中各组分之间的迁移速度和分配行为上的差异而实现 的一类液相分离技术。它具有高效、快速、低耗、样品预处理简单,操作便捷等优点幻。毛细管电泳是实现高效快速对映体分离的 有效手段,可以满足 准确、快速、高效的药检要求。采用胶束电动毛 细管电泳色谱法对麻黄碱、伪麻黄碱及去 甲麻黄碱进行了手性分离,获 得了很好的分离效果,可以用于这些药物 的质量控制和评 价。采用 毛 细管区带电泳(内标)法分别测定厚朴药材及其超临界流休萃取物中两组分的含 量,方 法准确性
10、高,简便快速,结 果满意。3超滤法超 滤 法 是 一种 膜分离 法,是指 常温 下以一定压力和流量,以多孔 薄膜作为分离介质,以错流方式进行 过滤,使溶剂及小分子物质通 过,高分子 物质和微粒子如蛋白质、水溶性高聚 物、细菌等被 滤膜阻 留,从而达到分离、纯化、浓缩的新型 膜分离技术。是目前唯一 能用于分子分离 的滤 过方法,能从周 围介质中分离 出10 0一lo 00 nm的微粒。超滤法具有 不需加热、条件温 和、无须添加化学试剂,分离 过程无相变,分离率高,超滤 装置 反 复使用,操作方便等优点,超滤法已广泛应用于中药有效成分的提取和分离 工艺中。比较水提醇沉法及超滤法对金银花 中绿原酸提
11、取率的影响,实验结果表明,用水提醇沉 法 提取,超滤法精制较好。4超 临界流体萃取技 术超临界流体萃取法是一 种新型的发 展迅速的高新提取分离 技术,利 用 超 临界状态下的 流体为萃取剂,从液体或 固体中萃取药材中的有效成分并进行分离 的方法。这种 超临界流体可以是单一 的,也可以是复合的,添加适当的夹 带 剂 可以大 大增加其溶解性和选择性。由于CO:无毒、无腐蚀性,不 易燃,不易爆,价廉有 较低的临界 提取压力 和温度,易 于安全地 从 混合物 中分离出来,所以成为 超 临界萃取法最常用 的超临界流体。通常称为超临界CO:流体萃取技术,其具有操作范围广、操作温度低,从萃取到分离可一步完成
12、,CO:可循环使用,产品纯度高,收率高等优点。文献报导采用CO:超临界提取技术和水蒸馏法分别从野菊 花中提取挥发性成分,实验结果表明CO:超临界萃取法提取物 与水蒸气蒸馏法提取物 在化合物组 成及含量 上 有较明显 的差别。在采CO:其有很强 的溶解能 力,能将野菊 花 中所含 的各种组分有效提取出来;水蒸气蒸馏法提取挥发法时有些 物质发三菇、街醇,由于分子量大、沸点高、挥发性小而难于提出,再加上高温使某些化合物分解,无法提出原有 的真实化合物。CO:超临床萃取法比水蒸气蒸馏法的优点是提取时 间短,得率高,有效成分提取完全,不易造成有效成分的分解破坏。目前,美国F D A已逐步将CO:超临界萃
13、取技术作为替代溶剂萃取 的标准方法。CO:超临界萃取技术对于提高制药水平,解决医药工业中挥发性或脂溶性药效成分的提取具很强 的实用性和必要性。但是CO:超临黑龙江医药HeiLongjiangMediein。Journa一vol.17No.00254界萃取技 术也 有一定的局 限性,首先,它较适合亲脂性、分子 量小的物质 的萃取,对于极性大、分子 量大的物 质 的萃取要加夹带剂并在很高压力下进行,因此给工业化生 产带来技术难度。其次,其一次性投资费用高,不利 于普及。5超微粉碎技术超微粉碎技术是利用超 声粉碎、超低温粉碎技术,使生药中心粒径在5一1 0微米以下,细胞破壁率达 9 5 %。5.1其
14、特点为:粉碎速度快、耗时短,低温处 理;粒体超细、超纯、分布 均 匀、收粉率高;节 省原料、提高利用率。超微粉碎技术的应用,不 仅适合于各种不同质地的药材,而且可使其中的有效成分直接暴露 出来,从而使药材成分的溶出和起效更加迅速安全,提高了中药材的有效利用率。这种技术引 人 中药精细加工之中,将迅速提高我 国中药行业的科技水平,提高中药 的质量和疗效。. 52其作用在于:提高有效成分的提取率;改善现有 中药固体制剂 的 品质;开发中药新剂 型新品种。超微粉碎技术必将开拓高新技术在 中药现代化中应用的新领域。6微波萃取 技 术微波萃取技术 的应用 原理 是 在 微波 场 中,吸收微波能 力的差异
15、使得基体物质的某些区域或萃取体系 中的某些组分被选择性加 热,从而使得被萃取物质从基体和体系 中分离,进人到介 电常数较 小,微波吸收能力相对差的萃取剂中。该技术具有选择性高、操作时间 短、溶剂 消耗量 少、有效成分得率高、不产生 噪音、适用 于热稳定物质等特点。微波技术的应用,近年来得到快速发展。但这种技术也具有一定的局限性,富含挥发性或热敏 性成分的中药材不适合使用微波萃取技术。7双水相萃取技 术双水相萃取技术是利用被提取物质在不同的两相系统间分配行为的差异进行分离。该类双水相体系多为 聚乙二醇/葡萄糖和聚乙二醇/无机盐 两种。其具有较高的选择性和 专一性,为中药有效成分的提取提供了新的方
16、法。根据对双水相体系中不同种类盐分相能力及有同种类有机溶剂的分相情况 开展研究,并应用 于甘草提取主要成分甘草酸中,确定乙醇/磷酸氢二钾双水相体系萃取甘草有效成分的工艺,表明,双水相 的分相过程是一个有机溶剂与无机盐争夺水分子的过程。选择乙醇/磷酸氢二钾体系萃取甘 草有效成分时,当 总量为loml,V乙醇=6m l,磷酸氢二钾的 量万. 159时,分配 系数k一1 2.8最大,收率Y一9 8.3%,与传统的水煎醇沉相比双水相萃取技 术所形成的两相大部分为水,两相界面 张力很小,为有效成分的溶解和萃取提供了适宜的环境,相 间质量传递快,操作方便,时间短,条件温 和,易于工程放大和连续操作。双水相萃取技术是分离纯化生物活性物质的新技术,目前对该技术的应用研究报道还比较少。8酶 法酶法是指选用适当的酶,可通 过酶 反应较温 和地将组 织分解,加速有效成分的释放。中草药成分复杂,有 有效 成分,也有 如 蛋白质,果胶、树胶、淀粉等非有效成分,这些 非有效成分不但影 响 中药有效成分的浸出,还影响 中药液体制 剂 的澄清度,可通过选用适当的酶,使非有效成分分解提高有效成分的浸出率和液体
