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1、实验一实验室组成、主要设备使用方法、常用药剂配制及洗涤、灭菌一、目的 了解植物组织培养实验室的基本组成，掌握主要设备的使用方法及常用药剂的配制。 二、实验室的组成：参观本院的组织培养室 三、主要设备的使用方法（课堂现场操作） 纯水仪、高压灭菌锅、分析天平、微波炉、酸度计、超净工作台、摇床、生物显微镜、 体视显微镜等。 四、几种常用药剂的配制 （一） 用 95%酒精配制不同浓度酒精 学习配制 70%和 75%酒精 （二） 消毒剂1、20%次氯酸钠溶液 称取 20g 次氯酸钠用适量的去离子水（或蒸馏水）溶解，然 后用去离子水（或蒸馏水）定容至 100ml。2、0.1%升汞（HgCl2）溶液 称取
2、0.1g HgCl2用适量的去离子水（或蒸馏水）溶解， 然后用去离子水（或蒸馏水）定容至 100ml。 （三）洗涤剂 1、硫酸重铬酸钾洗液称取 10g 重铬酸钾加入蒸馏水 90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸 175ml，放 入棕色试剂瓶备用（注意：切记不可将盛过酒精、甲醛等还原剂的药品试剂瓶直接放 入溶液中，因为重铬酸钾是一种强氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，就会失去洗 涤作用） 。 这些玻璃器皿必须用自来水冲洗干净并晾干后再浸入洗液。 （四）1 摩尔浓度 NaOH 和 1 摩尔浓度 HCl 配制摩尔浓度是指用 1 升（1000ml）溶液中所含溶质的分子量数来表示的溶液浓度。用 M 表
3、示。 1、 NaOH 摩尔浓度（M） NaOH 摩尔质量=分子克数=40g 1MNaOH 是指 1000ml 溶液里含有 40 克摩尔质量的 NaOH，现要配制 100ml，即需 NaOH4 克。称取 NaOH4 克，用少量的去离子水（或蒸馏水）溶解，然后定容至 100ml。 2、 HCl 摩尔浓度 具体配制酸的摩尔浓度时，应考虑原浓酸的比重摩尔浓度。 V=要配制的摩尔浓度需配制体积原酸分子量/原酸百分浓度原酸的比重1000 配制 1.0MHCl100ml，即量取 38%，比重为 1.19 的 HCl8.06ml 加去离子水（或蒸馏水） ， 定容至 100ml。 五、洗涤 （一） 新购置玻璃器
4、皿的洗涤 因有游离碱性物质，使用前先用 1%稀盐酸浸泡一夜，然后用肥皂水浸泡、洗净，清水冲 洗，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。 （二） 已用过玻璃器皿先将残渣除去，用清水洗净，再用热肥皂水或洗衣粉浸泡、洗净，清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。 六、灭菌 （一） 器皿和用具常用灭菌方法： 1、 热压灭菌法 将洗净的培养器皿，用具等包好，放入高压灭菌锅内，121灭菌 20-30 分钟。 2、 干热灭菌法 洗净的玻璃器皿置于电热干燥箱中，15040 分钟或 120两个小时，待冷却后使 用。 （二） 接种室、培养室的灭菌 1、 用新洁尔灭、70%酒精擦拭超净工作台。 2、 接种前用 70-75%酒精喷雾，使飘在空气中的尘埃沉积下来。 3、 用紫外灯进行照射灭菌房间及超净工作台 20-30 分钟 4、 熏蒸用甲醛、高锰酸钾提前 1-3 天熏蒸密封房间： （三） 培养基灭菌（略） （四） 培养材料灭菌（略） （五） 工作人员无菌操作（略）思考题 怎样构建商品性生产的组培室？
