小麦膨胀素基因TaEXPB8部分同源cDNA序列的克隆、定位及表达分析

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1、农业生物技术学报,2010年,第18卷,第4期,第645653页 010,8,645653 研究论文 麦膨胀素基因位及表达分析 陈琰钟伶桃 姚颖垠彭惠茹倪中福孙其信 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,教育部杂种优势研究与利用重点实验室,北京市作物遗传改良重点实验室,农业部作物基因组与 遗传改良重点实验室,北京100193 同等贡献作者 通讯作者, 要膨胀素(植物生长发育过程中诱导细胞壁松弛和伸展的重要蛋白。分别采用,克隆了小麦(长度分别为1180、1169、 次命名为、和。研究发现,这些基因的启 动子区域均含有预测的生长素顺式作用元件。定位结果显示,的位置无法确定,和 定位到同一染色体上

2、的相邻区域,即351域,位于0991域。在水稻()、玉米()和拟南芥( 因组的同线性区域也 存在膨胀素基因的串联重复,说明和可能为同一基因的两个拷贝,并在双子叶和单 子叶植物分化之前已经形成。表达分析结果表明,受 外源高浓度生长素处理的抑制,推测其可能在小麦根中起重要作用。 关键词膨胀素,部分同源基因,染色体定位,基因表达 xp i 00193,he 039696747968201004004 to be of n to 1 80,1 1 69,1 1 50 l 1 35 bp 0匹。 in on of 6匹 991 6 0 on 35M00)of in ),ea ) 船83 03969j67

3、47968201004004 基金项目:本研究由国家重点基础研究发展规J(973)项目(007国家杰出青年科学基金(30925023)和国家自 然科学基金(0671297,0600392)共同资助 投稿日期:20090711 接受日期:20090729 646 i。l。gy be in of t in of by of it an in 胀素(一种诱导细胞壁在酸性环 境条件下发生松弛和不可逆伸展的细胞壁蛋白 (et 1 992)。研究表明,编码膨胀 素的基因是一个多基因的家族,并被分为 、p、 4个亚族(Li et 2002)其中 和在于双子叶和单子叶植物中,而 亚族是拟南芥 中只有2个成员的

4、最小亚族,6亚族是在水稻中发 现的。 和6亚族分别缺少成熟蛋白的大部分i et 2003)。表达分析结果显示,该 家族基因在生长旺盛的组织中表达量较高,并在根 系生长(et 2003;2006)、种子萌发(et 2001)、叶原基的产生 (et 2001)、果实成熟(et 2001)和 花器官发育(et 2003)等过程中起重要作 用。另外,有些成员的表达还受激素的调控,包括生 长素(et 2000)、赤霉素(et 2002)、 细胞分裂素(et 2001)和乙烯(002)等。 在小麦中,我们最近分离克隆了基因成员并进行了表达分析,发现在不同组织器 官中的表达丰度存在明显的差异,其中T 娩娩娩

5、 能与根系的生长发育有重要关系(et 2005)。 普通小麦为异源六倍体植物,具三个部分同源的染 色体组(所以理论上每个基因应该 具有3个部分同源序列。本实验采用了根系高丰度表达的列,并将其中3个分别定位到35100) 和991。分析发现,根的伸长区表达水平最高,并且受生长素的调控, 这与其启动子序列的顺式作用元件预测结果相吻合。 1结果与分析 11 分析 为了获得据 放阅读框)序列(录号:设计了两条特异引物(2)进行两轮3 得了1条300 1A)。将该特异条带 回收克隆后挑取20个阳性单克隆进行测序,获得了 4条带有此,设计 了1)和4条特异的物(5)用于5 中用5引物进行第二轮巢式扩增后 均获得了长度为1 200 隆测 序后与3 得了4条全长 长度分别为1 180、1 169、1150和1B),依次命名为、 To 和T、 M S 000 10 750 500 250。 100 A M l 2 3 4 B 图1 5 :000;1:3 );25:分别 为利用) pa :000;1: ):25: 2一) 咖咖 啪 小麦膨胀素基阏位及表达分析 1in 47 辩鼢

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