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1、一个理想的用淀粉酶糖化发展的过程T. satyanarayana1 ，该 noorwez，S.库马尔， j.l.u.m. 饶， M. ezhilvannan 和 P.Kaur 微生物学系，德里大学南校区，新delhi-110021，印度摘要筛 选 的 嗜 热 真 菌 和 细 菌 的 广 泛 努 力 ， 从 各 种 环 境 中 的 分 离 样 品 ， 已 导 致 印 度thermomucorseudaticae 选择，芽孢杆菌thermoleovoransnp33 G. thermoleovorans np54 对糖化酶的生产， amylopullulanase 和-淀粉酶分别。淹没和固态发酵工
2、艺进行了优化，最大化由 T.王 seudaticae分泌糖化酶。 的 amylopullulanase 和-淀粉酶的生液态发酵中np33 和 np54进行了优化。糖化酶是最佳活跃在pH 7 和60?C 和显示糖化可溶性以及原淀粉。amylopullulanase 和-淀粉酶具有最优在pH 值 7 和 100?C 和糖化淀粉有效。分化抑在混合基质的行动清楚地表明，有两 -淀粉酶活性位普鲁兰酶的amylopullulanase 活动。两 -淀粉酶和amylopullulanase 高麦芽糖形和Ca2 +独立。这些淀粉分解酶已被证明是有用的在 淀粉糖化单独和组合。简介淀粉是一种多糖由葡萄糖单位通过-
3、1,4-和- 1,6-glycosidic键相连，形两个高相对分子质量的分子： 直链淀粉 （15 25%） ，一个线性聚合物组成的-吡喃葡萄糖残基，支链淀粉 （ 7585%） ，支化聚合物含- 1,6-glycosidic 联系在分支点淀粉在食品工业中用作增稠剂，粘结剂，稳定剂，乳化剂和悬浮和胶凝剂。此外，它是多糖的主要来源糖浆，这几种药物提供依据和糖果行业。淀粉水解为葡萄糖依赖工业过程在无机酸或酶的催化作用。使用酶优先为它提供了许多优点，包括提高产量和良好的经济。酶法水解允许更大的控制糖化，特异性的反应，而产生的产品的稳定性。温和的反应条件包括温度较低和近中性pH 值，从而减少不必要的反应。
4、酶法的青睐，因为他们也较低能源需求和消除中和步骤 1 。受雇于工业淀粉水解的酶市场估计占10总数的15%的世界 .酵素市场。这是第二大工业部门消费者的酶。在常规酶法淀粉糖化过程，在不同的步骤参数变化的原因很多在行业的障碍。由于pH 值的变化，大大量的盐必须通过离子交换除去。 除了耗费时间， 这些步骤导致逆向反应和较低的收益率。不受欢迎的产品分枝低聚糖，麦芽， 异葡糖基麦芽糖和异麦芽糖形成。淀粉的转化过程的改进寻找新的有效的、合适的 enzymeswith 高的热稳定性， 功能在酸性至中性的pH 范围，和独立的阳离子如Ca2 +的稳定性 /活动将显著降低糖浆的生产成本2 4 。提高淀粉糖化过程的
5、温度会导致一些好处，如更高的基板浓度，降低粘度和较低的抽水成本，细菌污染的风险有限，增加的反应率和减少手术时间， 降低成本的酶净化催化剂，和较长的半衰期， 由于增加酶的热稳定性 4 。为了寻找新的酶，我们筛选了一大嗜热细菌和真菌的菌株数量，和选定的芽孢杆菌thermoleovorans np33，G. thermoleovorans 为 np54 和 thermomucor 王 seudaticae耐高温、耐钙生产独立的amylopullulanase ，-淀粉酶和糖化酶中性。酶测定淀粉的应用潜力糖化。表征酶总蛋白纯化纯化淀粉酶技术，其。酶的测定通过测定测定amylopullulanase 减
6、少从淀粉糖解放（ -淀粉酶和普鲁兰多糖（80?普鲁兰酶） 活性的 -淀粉酶的 C. np54 thermoleovorans和 indicaeseudaticae糖化酶通过估算还原糖的测定在100 和 60?C 淀粉释放，分别。一个国际单位酶是酶量对于 1 摩尔需要解淀粉分解酶在淀粉中的应用糖化在淀粉糖化酶的适用性让 -淀粉酶 / amylopullulanase / 糖化酶检单独行动或在不同的组合后的糊化原淀粉和可溶性淀粉在105?C 10分钟，估计还原糖解放在所需的时间间隔。结果G. thermoleovorans np33 和 np54 是有氧和极嗜热菌，生长温度高温模具 T.王 seu
7、daticae生长最佳在 4045?C.在中制定的“一变一次”方法，含胆酸，最高淀粉酶分泌（ 48 000 台 L-1 ）中达到了G. np54 thermoleovorans。表面活性剂如胆酸是众所周知，溶解膜蛋白，导致细胞膜的通透性增加，从而提高生物分子如酶的分泌。胆酸酸也稳定 -在保存过程中淀粉酶活在 4?C（表 1） 。酶高麦芽糖形成，高热和 Ca2 +独立（表2） 。amylopullulanase 滴度最高（ -淀粉酶12 300 个单位 1 L- ；普鲁兰酶， 5200 台 L-1 ）当 G. thermoleovorans np33 在合成复杂的栽培 通过单次单因子和研究制定中
8、方法论的方法。酶的分子48 kDa 的质量，这是最佳的活性在80?C，2 小时的半衰期（为 -淀粉酶）和3.5 （100?普鲁兰酶） C.分化抑制行为在混合基质和活动建议酶的活动是由两个独立的活动开展网站的 amylopullulanase （表 3） 。酶是高热以及 Ca2+无关。酶稳定的聚（乙二醇） ，和底物淀粉与普鲁兰多糖。高温模具 T.王 seudaticae分泌糖化酶深层（ 46 000 台 L-1 ）以及固体状态（ 475 单位 G-1 干发酵麸曲）。的纯酶的分子量为42 kDa 的，它是在 5 9 和 4090?C 的 pH 和温度范围内活性，在 7 和 60?C.酶具有活性的最
9、优解原淀粉和可溶性淀粉。抑制由 N-乙基马来酰亚胺和N-溴代丁二酰亚胺酶活性建议的半胱氨酸和色氨酸的关键作用催化。所有这三种酶具有淀粉糖化，单独并结合，有不同程度的（表4） 。当淀粉水解的amylopullulanase ，主要产品为麦芽糖。与治疗前的amylopullulanase 淀粉非常有效的糖化酶糖化在这 -淀粉酶的比较结论所有的三种酶活性在中立，Ca2+独立型。一个统计中的应用方法，响应面方法，让我们提高酶的效价。 -淀粉酶 / amylopullulanasepretreate 淀粉糖化血糖很有效用糖化酶。我们感谢科技部，大学教育资助科学与工业委员会和理事会研究（印度政府）的形式为提供资助研究项目和奖学金的学者。工具书类1 bigelis，R（1993）酶在食品加工（nagodawithana，T. 芦苇， G.，主编），科学出版社，San迭戈， CA 2 萨哈，公元前和Zeikus，JG（1989）趋势研究。7，234238 3 antranikian，G（1992）在天然产物的微生物降解（温克尔曼， G.，主编），27 页 56 引起的，中国，德国4 维也里， C 和 Zeikus，JG（2001）微生物。分子生物学。Rev。65，143
