H尿液分析仪测定标准操作规程

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1、尿常规项目标准操作干化学法 (一) 标本的采集及保存 尿常规检验通常以新鲜晨尿为宜,但门诊患者可以随机留尿。尿液标本采集 应使用洁净带盖的一次性容器,避免经血、白带、精液、粪便混入。标本留 取后要及时送检。 对于不能立即检查的标本,在冰箱内一般可保存6-8 小时。要根据检验项目 的需要,选择不同的防腐及保存方法。 (二) 校准 1校准试纸条:与仪器配套的试纸条 2校准方法:一共 2 条校准试纸条,只作为日常校准用,一般只用一条,另一 条为备 (三) 检测项目 1葡萄糖 1.1 原理 采用葡萄糖氧化酶法原理。在有氧条件下,葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化成葡 萄糖醛酸和过氧化氢, 后者在过氧化物酶的催化

2、下释放出初生态氧,使色原邻甲 联苯胺(或碘化钾)呈现不同的颜色变化, 其颜色深浅与尿液中葡萄糖含量有关。 本法检测范围为微量 ()约 5.6mm/L;弱阳性(+)约 13.8 mmol/L,阳性(+) 约 27.5 mmol/L,强阳性(+)约 55.5 mmol/L,最强阳性(+)约 111mmol/L. 1.2 注意事项 1.2.1 维生素 C 能干扰低浓度的尿液葡萄糖测定,使结果呈假阴性。可将尿 液煮沸数分钟以排出维生素C 的干扰。酮体能降低葡萄糖检测的敏感度或使检 测呈假阴性。 1.2.2 干化学葡萄糖氧化酶法对尿液葡萄糖监测的灵敏度和特异性有所不 同,仅是一般的定量过筛试验。 因此,

3、对于糖尿病患者最好采用葡萄糖定量试验。 1.3 参考值 正常人肾糖阈为9-10 mmol/L ,一般情况下血糖浓度比较恒定,空腹是为 4.44-6.00 mmol/L,进餐后 8.88-9.99 mmol/。精神小球滤过的葡萄糖几乎全部由 肾小管重吸收,仅有极其微量的葡萄糖随尿液排出,一般定性试验为阴性。 1.4 临床意义 1.4.1生理性糖尿 生理性糖尿包括饮食性糖尿、应急性糖尿和妊娠性糖尿,呈一过性,当去除 生理因素后即可恢复。 1.4.2病理性糖尿 病理性糖尿分原发真性糖尿和继发性高血糖性糖尿,前者如糖尿病、 肾性糖 尿病;后者如甲状腺功能抗进、垂体功能亢进、嗜铬细胞瘤、胰岛a细胞瘤、

4、库欣综合症、胰腺疾病、严重肝功能衰竭。 2 胆红素 2.1 原理采用重氮反应法原理,在强酸介质中,胆红素与重氮化的双氯苯胺偶联,形 成紫红色的重氮色素, 其颜色深浅与尿中胆红素浓度有关。本法检测范围为弱阳 性(+)约 8.6umol/L;阳性( +)约 17.1 ;强阳性( +)约 51.3。 2.2注意事项 2.2.1 尿液标本宜新鲜,避免阳光直射而使胆红素转变成胆绿素导致检测结果 呈假阳性。 2.2.2 高浓度维生素C 和亚硝酸盐可抑制偶氮反应,导致胆红素 检测结果假阴性,吡啶、吲哚酸在低pH 值条件下可导致假阳性反应。水杨酸 盐、阿司匹林也可使本试验结果 2.3 参考值 阴性 2.3临床

5、意义 尿胆红素阳性见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸、病毒性(或中毒性)肝炎、 肝硬化以及其他肝病。 3酮体 3.1 原理 在碱性条件下, 亚基铁氰化钠与尿液中乙酰乙酸作用,产生紫色放映, 其颜色 深浅与酮体含量有关。本法检测范围为微量()约0.9 mmol/;弱阳性( +)约 1.7 mmol/L,阳性( +)约 8.6mmol/L,强阳性( +)约 17.2 mmol/L,最强阳性 (+)约 111mmol/L. 3.2 注意事项 3.2.1 本法只检测尿液中的乙酰乙酸,不与丙酮或或B-羥丁酸反应,故与传 统的化学法结果略有差异。检测敏感度为0.5-1.0 mmol/L。 3.2.2 不同病因引

6、起的酮症,其酮体成分有所不同。在糖尿病酮症酸中毒早 期患者中,主要酮体形式是B-羥丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏。因此,干化 学分析可出现假阴性结果或对总酮体量的估计不足。相反,在糖尿病酮症酸 中毒症状缓解之后,乙酰乙酸含量反而比初始急性期增高。 3.2.3 乙酰乙酸受热易分解成丙酮,故尿液标本宜及时送检。 3.2.4 尿液含量有大量色素或大量左旋多巴代谢产物时,可导致假阳性结果。 3.3 参考值 阴性 3.4 临床意义 尿酮体阳性见于糖尿病酮症酸中毒、饥饿、剧烈运动、营养不良等。 4相对密度 4.1 原理 高分子电解质共聚体的解离常数(pKa)随尿液离子浓度而变化,离子浓 度越高,其酸性基团(H+

7、)解离越多, H+可与酸碱指示剂反应,通过溴 麝香酚蓝的颜色改变,显示尿液的相对密度值。尿液中离子浓度较低时, 呈蓝绿色,离子浓度升高则转向黄绿色。 4.2 注意事项 4.2.1电解质共聚体有多甲乙烯酸马来酐和甲氧乙烯顺丁烯二酸两种,后者 更为常用。本法检测范围从1.005 开始,每隔 0.005 递增,至 1.030 止,低于前者或超过后者,报告“1.005”或“ 1.030” 。 4.2.2干化学分析测定尿液相对密度不受葡萄糖含量的影响,但对尿中蛋白 质较敏感。尿中蛋白质含量每增加1%,则尿液相对密度增加0.003。另外, X 线造影剂可使含防腐剂的尿液相对密度增加到1.050。 4.2.

8、3本法受尿液pH 值得影响较大, pH6.5时,应在测定结果上增加 0.005 作为因尿液 pH 值影响的补偿。 4.2.4干化学分析尿液相对密度检测范围为1.005-1.030, 新生儿尿液相对密 度在 1.002-1.004之间。 4.2.5由于本法检测结果的数据间隔较大,对尿液相对密度过高或过低的标 本检测不够敏感,因此,仅限于筛选试验。本法的参比方法为折射仪 法。 4.3 参考值 正常人尿液相对密度主要受尿液中所含氯化钠和尿素的影响。通常饮食条 件下,尿液相对密度波动在1.015-1.025之间。 4.4 临床意义 病理状态下,尿液相对密度随尿液中所含的溶质成分而改变。因此,尿 液相对

9、密度检测时了解肾脏浓缩功能的一项简易指标。 尿液相对密度增高见于急性肾炎、糖尿病、蛋白质、高热等。尿液相对密 度降低见于慢性肾炎、尿崩症、原发性醛固酮增多症及肾功能不全多尿期。慢 性尿崩症时,由于尿量极大,尿液外观如水,相对密度极地,几乎等于1。 尿液相对密度连续测定较一次测定更有价值,慢性肾功能不全患者可呈现 持续性低相对密度尿。 5PH 值 5.1 原理 将甲基红( PH4.6-6.2)和溴麝香酚蓝( PH6.0-7.6)适量配合,组成复合型 指示剂,呈色范围为 pH4.5-9.0 (橘黄色 -蓝色) ,其颜色变化与尿液pH 值相关。 本法检测范围限于pH4.5-9,每隔 0.5 单位递增

10、。 5.2 注意事项 5.2.1尿液 pH 值主要取决于尿中磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的相对含量,并 因饮食情况而异。每当进食后,由于胃黏膜分泌大量盐酸以助消化, 此时尿液 pH 值显一过性增高。夜间人睡后,由于呼吸变慢呈轻微的 酸中毒,故尿中 pH 值发生变化。 5.2.2标本不宜久置,以免细菌分解尿液成分,使pH 值发生改变。 5.2.3可利用尿液 pH 值测定,对尿蛋白、尿相对密度等易受pH 值影响的 干化学分析加以监控。 5.3 参考值 4.6-7.4进食肉类或蛋白质多者呈弱酸性,进食植物性食物多者呈碱性。 5.4 临床意义 酸性尿见于尿路结核、代谢性酸中毒、糖尿病酮症酸中毒和服用氯化铵、

11、 氯化钙、稀盐酸机体内蛋白质分解增加、痛风等。 酸碱尿见于剧烈呕吐、碱中毒、肾功能不全、原发性醛固酮增多症、肾小 管性酸中毒、尿路感染及服用碱性药物等情况。 另外,尿液 pH 值变化与尿结石的形成关系密切,应用尿液 pH 值测定监测 肾结石患者的尿液酸碱度变化可以指导临床用药。如尿酸和胱氨酸结石在酸性条 件下容易形成,而磷酸钙结石在碱性条件下容易形成。 6 蛋白质 6.1 原理根据 PH 指示剂蛋白质误差原理而设计。尿液中蛋白质阳离子基团(白蛋 白)与指示剂四溴酚蓝(或四氯粉丝溴酚酞)阴离子基团结合,导致指示剂 进一步电离,从而产生颜色变化,其颜色变化与尿液蛋白质含量有关。 本法检测范围为弱阳

12、性( +)约 0.3g/L;阳性( +)约 1.0g/L 强阳性( +) 约 3.0g/L;最强阳性( +)约 10.0g/L 6.2 注意事项 6.2.1 干化学分析检测尿蛋白有3 类不同的方法,除指示剂蛋白质误差外,还 有 Urine-TP 和 Micral-Test 法。前者类似考马斯亮蓝法,能同时检测白蛋白、球 蛋白及本 -周蛋白;后者虽采用层析扩散和免疫技术,也只能检测白蛋白。 6.2.2本法检测球蛋白的敏感性仅为白蛋白的1/1001/50, 而璜基水杨酸法对白 蛋白和球蛋白的敏感性基本一致。因此,NCCLS 推荐璜基水杨酸法最为干化学 分析的参比方法。 但必须注意,璜基水杨酸法易受

13、尿中存在的某些盐类结晶的干 扰。 6.2.3 干化学分析及其他化学检测尿蛋白由于试剂组成不同,其检测敏感度也 有较大差异。四溴酚蓝法为150-300mg/l,与加热乙酸法相当,但低于璜基水杨酸 法(50100mg/l) ,而四氯酚四溴酚酞法为60mg/l。干化学分析均不能检出本- 周蛋白。 6.2.4 尿液 pH 值变化对检测结果影响较大,特别是服用奎宁、奎尼丁和嘧啶 等药物者的强碱性尿液会出现假阳性反应。此外,阿斯匹林、青霉素、庆大霉素、 氯丙嗪、灰黄霉素、干扰素、利福平、磺胺类、泼尼松、非激素消炎剂、造影剂 等均可导致假阳性反应。 6.2.5尿液标本如含有其他分泌物或较多细胞成分也可出现假

14、阳性反应。 6.3 参考值 正常人终尿蛋白质含量很少,用干化学法分析检测为阴性。 6.4 临床意义 正常人血浆内分子量 69000的蛋白质极少从肾小球滤过, 15000的蛋白 质可自由的从肾小球滤过, 但 95%-96% 被肾小管重吸收, 故尿中蛋白质含量很少。 6.4.1 生理性蛋白尿 生理性蛋白尿又称功能性蛋白尿,指泌尿系统并无器质性变化,尿液中暂时 出现蛋白尿。由于剧烈运动、长时间直立、高温、和受寒冷等因素,引起肾血 管痉挛或充血,导致肾小球通透性增加而致。此种蛋白尿多为一过性。 6.4.2 病理性蛋白尿 病理性蛋白尿是指器质性病变导致尿液中持续出现蛋白质。可分为肾小球性 蛋白尿、肾小管

15、性蛋白尿、混合蛋白尿和溢出性蛋白尿。 肾小球性蛋白尿:因炎症等因素导致肾小球毛细血管通透性增加,血浆蛋 白大量滤出, 超过肾小管冲吸收能力引起蛋白尿。见于原发性与继发性肾小球 疾病,如肾淀粉样变、糖尿病肾病、急、慢性肾炎、肾病综合征等。 肾小管性蛋白尿:因炎症或中毒引起肾近曲小管对低分子蛋白质的重吸收 障碍,导致尿中出现蛋白质。见于间质性肾炎、肾盂肾炎、中毒性肾病及肾移 植后的排斥反应等。 混合性蛋白尿:肾脏病变同时累及肾小球和肾小管,使蛋白质滤出增加且 重吸收减少引起蛋白尿。见于慢性肾炎、慢性肾功能不全、狼疮性肾炎、多发 性骨髓瘤、糖尿病肾病等。 溢出性蛋白尿:肾脏正常,肾外疾病导致循环中低

16、分子量的蛋白质增多,使肾小球滤出增多, 超出肾小管重吸收能力引起的蛋白质。见于多发性骨髓瘤、 原发性巨球蛋白血症、急性血管内溶血及单核细胞白血病。 6尿胆原 7.1原理 根据偶氮结合法原理,尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素, 其颜色深浅与尿胆原含量有关。 7.2注意事项 7.2.1 本法的敏感度为 4mg/L. 7.2.2 正常人每天尿胆原排出量波动较大,夜间和上午较少,午后2 点-4 点 时达最高峰,并与尿液pH值成正比。 7.2.3 尿液标本宜新鲜,避免阳光照射使尿胆原氧化成尿胆素呈假阳性反应。 7.2.4 磺胺类药物对本法有干扰,尿中含有甲醛可是结果呈假阴性反应。 7.3参考值 尿胆原主要来自胆红素的分解。生理情况下肠道细菌分解形成的胆素原族 化合物,绝大部分随粪便排出,约有10%-20% 进入肠肝循环,其中仅有极少部 分进入体循环后, 随尿排出。故正常尿液中只含有少量尿胆原 (3-16mol/L ) 。 7.4临床意义 尿胆原浓度增高见于溶血性及肝细胞性黄疸。阻塞性黄疸患者尿胆原试验 呈

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