常用培养基及抗生素的配制

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1、常用培养基及抗生素配置1310466559 来源:生物秀知道 浏览次数:1592 网友评论 0 条LB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用 1N NaOH(1ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L。SOB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1 mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到 1L。分成 100ml 的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每 100ml 的小份中加 1ml 灭过菌的 1mol/L 氯化镁

2、。SOC 培养基成分、方法同 SOB 培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每 100ml 的小份中加 1ml 灭过菌的 1mol/L 氯化镁外,再加 2ml 灭菌的 1mol/L 葡萄糖(18g 葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到 100ml,用 0.22um 的滤膜过滤除菌)。TB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到 60,再加 100ml 灭菌的 170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4 的溶液(2.31g 的 KH2PO4 和 12.54gK2HPO4 溶在足量的水中,使终体积为1

3、00ml。高压灭菌或用 0.22um 的滤膜过滤除菌)。2&timeYT 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用 1N NaOH(1ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L。YPD 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为 1L 后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加 1.6g 色氨酸,因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭菌前加入 20g 琼脂粉。氨苄青

4、霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解 1g 氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解 0.5g 羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 25ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解 1g 甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 37.5ug/ml 终浓度与 100ug/ml 氨苄

5、青霉素一起添加于生长培养基。卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解 100mg 卡那霉素于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 10ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解 250mg 氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以12.5ug/ml25ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解 0.5g 链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 10ug/ml

6、50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)溶解 50mg 萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 15ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。四环素(tetracyyline)(10mg/ml)溶解 100mg 四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至 10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20贮存。常以 10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 1 M DTT 的配置组份浓度:1 M DTT配制量:20 ml配制方法:1. 称取 3.09 g DTT,加入到 50 ml 塑料离心管内。2. 加 20 ml 的 0.01 M NaOAc(pH5.2),溶解后使用 0.22 mm 滤器过滤除菌。3. 适量分成小份后,-20保存。PMSF 100 或者 200mM 储液 工作浓度 0.11Mm 直接用异丙醇配制。

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