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1、植物病理学报 0(5)：538542(2010) 稻曲病菌不同颜色厚垣孢子超微结构比较 燕玮婷 ，刘二明 ，邓林伟 ，黄红梅 ， 刘东波。，吕建林 ，奉光平 ，毛莹 ( 湖南农、l 夫 ：，1：物安全科学技术学院，长沙410128； 湖南农、1 大学，沙410128 湖南农、 夫学分析测试中 长沙410128) of eirin。io10128，10128，10128，he of on by EM) zm，he 00 700 nm 001 1 00 nm in no in of no in of on EM of of of of as of he in as in he of by a of
2、 is in 章编号：04120914(2010)05曲病是由稻绿核菌性态为起的水稻穗部真菌性病害，在世 界各水稻种植区普遍存在。稻曲病不仅造成水稻 产量损失，而且其产生的稻曲毒素对人、畜有 害。该病已成为水稻上的重要病害。因此，稻 曲病的防控和该病菌生物学特性已成为近年的研 究热点。 自然条件下，稻曲病菌能以休眠的形式越冬， 存活期长达812个月。厚垣孢子在稻曲病的侵 染循环中起重要作用，被认为是稻曲病的主要侵染 源。稻曲病厚垣孢子在发育的过程中有2种常见 收稿日期：20091217；修回日期：2010625 基金项目：国家自然科学基金资助项目(30871615) 通讯作者：刘二明，教授，主
3、要从事植物病理学研究；E26一 “报一 简一 一究一 研 旷 5期 燕玮婷，等：稻曲病菌不同颜色厚垣孢子超徽结构比较 的颜色，黄色萌发率较高，可达80以上 ，随着 厚垣孢子颜色变深，萌发率下降，当变成黑色厚垣 孢子进入休眠就很难萌发。真菌的休眠对其度过 不良环境和缺乏宿主期阶段(在植物病理学上的 越冬或越夏)有重要的生物学意义。真菌孢子的 休眠主要有内源或结构性休眠和外源(诱导)性休 眠2个类型 。本研究对中稻和晚稻上不同颜色 的厚垣孢子进行较它们表面 和内部超微结构的差异，以期了解其结构性休眠。 1材料与方法 11 试验材料 2008年8月20日和水稻实验基地，采集中稻和晚稻相同品种两优培
4、九上表面呈典型黄色及黑色的新鲜稻曲病病粒各 20粒，黄色和黑色病粒上的厚垣孢子用作扫描电 子显微镜和透射电子显微镜观察。 12试验方法 121 扫描电镜用镊子挑取新鲜的不同颜色的 厚垣孢子粉分别在带电胶台上固定，在子溅射仪上镀金后，用进行观察、测量和拍照。 122 透射电镜用新的双面刀片迅速刮下一定 量不同颜色的厚垣孢子粉(小于l 厚垣孢 子粉堆)，立即放人配好的25戊二醛磷酸缓冲 液中预阎定4 h，再经过磷酸缓冲液漂洗3次，l 饿酸同定24 h，丙酮梯度脱水，60聚合处理2436 h，德国莱卡超薄切片机 切片，柠檬酸铅和醋酸双氧铀双染色后，使用230型透射电镜观察和拍照。 123统计方法 用
5、上的厚垣孢子及突起高度作方差分析。 2结果与分析 21 厚垣孢子形态与表面超微结构 巾稻和晚稻上黄色与黑色的厚垣孢子在扫描 电镜(形状相似，均为球形或近球形，黄色 厚垣孢子表面具有疣状突起(图1一B、D；图2一B、 D)，黑色厚垣孢子表面具有不规则的锥形刺状突 起，呈菊花状(图1；图2一A、C)，其突起较黄 色高且明显。 suof on ： m(4 000)B： 000 X) C： 6 000 x)D： m(16 000) 植物病理学报 40卷 of on ： 000)B： 000) c： m(16 000)D：6 000 x) 中稻上，黄色厚垣孢子直径为360603 均直径为492 m，疣状
6、突起(孢子壁弯曲 面到疣突顶点)高度为397690 均高度为 52615 11113；黑色厚垣孢子直径为450582m， 平均直径为514 形刺突高度为4581 130 均高度为73565 稻上，黄色厚垣孢 子直径约为414521 均直径为469 状突起高度约为288721 均高度为 49825 色厚垣孢子直径约为394580 m，平均直径为473 m；锥形刺突高度在522 1 060 均高度为75750 经方差分析，中稻和晚稻上的黄色厚垣孢子直 径间无差异，而在黑色厚垣孢子直径间差异极显 著，即中稻上的黑色厚垣孢子直径显著大于晚稻上 的黑色厚垣孢子；两类稻作上黄色与黄色厚垣孢 子、黑色与黑色
7、厚垣孢子突起高度无差异，但黄色 和黑色厚垣孢子突起高度有极显著差异。 22厚垣孢子内部超微结构 在透射电镜下，黄色和黑色厚垣孢子壁均有较 厚的内壁和薄的外壁。黄色厚垣孢子内壁较黑色 薄，具有一定的电子透过率，如图3中白色透明部 分；黑色厚垣孢子内壁电子透过率高，为一层较厚 的透明光圈(图3。B、D)，由图3可看出黑色厚垣 孢子内壁约为黄色的一倍；外层细胞壁均具有一定 的电子密度。黑色厚垣孢子的刺突明显高于黄色 厚垣孢子，其突起部分更为明显，这与扫描电镜中 两者刺突高度差异的结果相符合。 不同颜色厚垣孢子内部细胞器差异明显(图 3)。黄色厚垣孢子内部细胞器组成完整，可见黄色厚垣孢子具有细胞核，其核仁、核膜清 晰(图3一A、C)，形状各异的淀粉粒一端多伴有一 黑色的球状颗粒(图3一A)；而黑色厚垣孢子内部仅 有一大的脂质球，几乎没有完整的细胞器(图3一 B)，或只有不完整或破碎的细胞器(图3一D)。 5期 燕玮婷，等：稻曲病菌 同颜色厚垣孢子超微结构比较 re of ：N：Endospo
