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1、Q：正相手性色谱柱使用前需要注意什么? A：将正相手性色谱柱 AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H 接上液相色谱仪之前先要 保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。如果液相系统里面是反相溶 液，比如水/乙腈=50/50(v/v)。那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相 的所有管路（包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等） ，然后用正相流动相冲洗 液相的所有管路，最后再接上正相手性色谱柱；如果液相系统的反相流动相中 含有缓冲盐，要先用纯水冲洗 HPLC 系统，然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲 洗液相的所有管路，最后用正相流动相冲洗。 Q：正相手性色谱柱中保存液是什么? A：正相手性色谱柱 A
2、D-H、AS-H、OD-H、OJ-H 中的保存液是正己烷/异丙醇 =90/10(v/v)。其它手性色谱柱的保存液请查阅使用说明书上的说明。 Q：新柱 CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 与原来的大赛璐手性柱有什么区别？A：CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 是将多糖衍生物共价键合在硅胶上，而 大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。正因为是共 价键合，所以 CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 柱能使用任何液相流动相，比 如四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 与大赛璐
3、原有的正相柱相比，扩大了溶剂选择的范围，增加了 新的分离选择性，在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在 CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 上得以分开。 Q：CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AS-H、CHIRALCEL OD- H、CHIRALCEL OJ-H 四款正相色谱柱的区别是什么？ A：区别是固定相的种类不同。CHIRALPAK AD-H、AS-H 的硅胶表面涂敷的 是直链淀粉衍生物；CHIRALCEL OD-H、OJ-H 的硅胶表面涂敷的是纤维素衍 生物。CHIRALPAK AD-H 的硅胶表面涂敷的是直链淀粉三(3,5二甲苯基氨 基甲酸酯)
4、；CHIRALPAK AS-H 硅胶表面涂敷有直链淀粉-三(S)-甲基苄基氨 基甲酸酯；CHIRALCEL OD-H 硅胶表面涂敷有纤维素-三3,5-二甲苯基氨基甲 酸酯; CHIRALCEL OJ-H 硅胶表面涂敷有纤维素-三4-甲基苯甲酸酯。不同种 类的多糖衍生物决定了这些手性柱的分离对象各不相同，既相互包含，又相互 补充。 Q：优化手性化合物的分离方法时，如何增加分离选择性？ A：正相手性色谱柱上增加分离度的方法有：降低流动相中醇的含量、降低柱 温、更换流动相中醇的种类、更换手性柱。 Q：建立手性化合物的分离方法时，选定了正相手性柱之后，如何选择流动相？A：流动相首选正己烷和异丙醇的混合
5、溶液，根据样品的酸碱性决定是否添加 酸碱性添加剂。如果是中性样品则不需要添加添加剂，如果是酸性样品需要添 加三氟乙酸或乙酸，如果是碱性样品需要添加二乙胺，添加剂的量一般为 0.1 %。 流动相中醇的含量一开始可以使用 30%，根据样品出峰的快慢和分离度再调整 醇的含量。 流动相中醇的种类一般使用异丙醇，也可以使用乙醇。 Q：建立手性化合物的分离方法时，如何选择手性柱？ A：根据文献或者参考大赛璐公司的应用指南中结构类似物的分离方法， 选择手性柱；另外可以寄少量消旋品，大赛璐公司能免费为您选择分离最佳的 手性柱。 Q：CHIRALPAK AD-H 柱和 CHIRALPAK AD 是什么区别？ A
6、：CHIRALPAK AD-H 柱和 CHIRALPAK AD 的填料种类是一样的，表面涂敷 的都是直链淀粉三(3,5二甲苯基氨基甲酸酯)，手性选择性基本相同。只不 过填料的粒径不一样，CHIRALPAK AD-H 是 5 m，CHIRALPAK AD 是 10 m。CHIRALPAK AD-H 能代替 CHIRALPAK AD 并且 CHIRALPAK AD-H 柱效更高。 Q：手性柱谱图中异构体的分离度下降了，这可能是什么原因，该怎么办？ A：分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱 柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分
7、离度下降，如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的 柱效下降导致的。如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升，可能是有强 极性溶剂损害了柱子；如果分离度在长时间内慢慢下降，可能是柱头受污染或 柱头塌陷，需要更换保护柱或者更换分析柱。 Q：正相手性色谱柱柱压高了怎么办？ A：手性柱压力高的原因有可能是流动相中醇的含量太高，或者液相流路中有 堵塞，或者柱头有样品析出，或者填料被压缩柱头塌陷等。针对不同的原因请 有针对性的采取相应的措施。如果是流动相中醇含量太高，则需要升高温度或 者降低流速。如果液相流路中有堵塞需要排除堵塞。如果柱头有样品析出则需 要使用流动相溶解样品以及样品预处理除掉样品中易
8、析出的成分。如果填料被 高压压缩柱头塌陷，则需要重新购买新的手性柱。 Q：正相手性柱进了水后，柱子会不会损坏？ A：正相手性色谱柱 AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H 一旦进了水，柱压会升高， 但是只要柱压不超过柱压上限，柱子就不会损坏。只需用无水乙醇低流速(0.1- 0.2 ml/min)将水全部充分置换出来，再用正相流动相低流速(0.1-0.2 ml/min)将乙 醇全部置换出来就能继续使用该正相手性色谱柱。 Q：手性柱使用完了之后如何清洗保存？ A：正相手性色谱柱如果使用正己烷和醇类的混合流动相之后，只需要用正己 烷/异丙醇=90/10(v/v)的保存溶液冲洗 30 min 即可。反相手性色谱柱如果使用了 水溶液和乙腈的混合流动相之后，只需要用水/乙腈=70/30(v/v)的保存溶液冲洗 30 min 即可。Q：正相手性色谱柱的柱压范围是多少？ A:正相手性色谱柱 AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H 中的柱压绝对不能超过 9.8 MPa，最好不超过 5 MPa。所以建议在实际使用过程中，在液相仪器上设置泵 的保护压力为 6 MPa，这样一旦系统的压力超过 6 MPa，泵就会自动停止运行， 保护手性柱不受高压破坏。
