回神颗粒对实验性大鼠局灶性脑缺血缺血区神经细胞凋亡的影

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1、!“#年#月第!$卷第$期 %/8回 神 颗 粒 对 实 验 性 大 鼠 局 灶 性 脑缺血缺血区神经细胞凋亡的影响!陈宝贵$)摘要:“目的#观察回神颗粒对大鼠局灶性脑缺血后缺血区神经细胞凋亡及调控基因?;,!、?0A蛋白的影响。“方法#选用成年雄性B/9502大鼠, 应用开颅法烧灼闭塞大脑中动脉, 制作局灶性脑缺血损伤动物模型(:C6D) 。动物随机分为假手术组和缺血组, 缺血组又分为模型组和回神颗粒组。大鼠脑缺血= 4后取脑并制作冰冻切片, 进行原位末端缺口平移标记法(.E-FG) 染色和?0A、?;,!免疫组织化学染色。“结果#治疗组大鼠脑组织.E-FG、?0A阳性细胞数明显较少, 与模

2、型组比存在显著性差异(!H“(“(!“#)“$“!=“M脑卒中一旦发生,有较高的病死率和致残率。脑缺血脑保护研究一直是当今医学研究热点之一,寻找有效的治疗药物及措施, 以防治脑缺血再灌注损伤, 促进脑卒中后神经系统恢复一直是相关学科研究的重点之一。回神颗粒是导师陈宝贵主任医师在长期临床实践中,深刻洞悉脑梗死的病因病机,不断总结用药经验的基础上研制而成的治疗脑梗死的有效中药复方制剂。笔者前期的临床和实验研究表明回神颗粒具有良好的脑神经细胞保护作用,能够降低缺血区脑神经细胞分泌过量的兴奋性氨基酸, 提高大鼠的智力等NMM) , 男, 主任医师, 博士生导师, 主要从事老年性痴呆的预防和治疗及萎缩性

3、胃炎癌前病变的研究。 实验研究 !=天津中医药 !“#$%“$ 87定液固定.!包埋, 连续冷冻切片,片厚4甲醇液处理4甲醇液处理4的VOM显色液P5 !D, 显微镜下控制反应时间, 自来水终止反应; 苏木素复染75 1; 梯度乙醇脱水, 二甲苯透明, 中性树脂封片。 上述各步骤间均用585、=? +4A =?!与细胞凋亡状态之间的关系由于!在调节细胞凋亡中的作用相反且在脑缺血损伤后表达均有增加, 故本课题组对治疗组与模型组的!?!?!? ?26:A8271?9/B+#,图!6:4 87图!免疫组化治疗组“#$%4#:28+3;1;825; 1490A,()亡。?“ 等提示短暂脑缺血所致的神经

4、元凋亡主要发生在缺血敏感区, 较长时间的脑缺血, 凋亡则主要发生在梗死周边区的内缘即所谓的“ 半暗带” 。实验证实,缺血中心区的细胞只去极化而不复极,为不可逆损害,而半暗带区自发脑电活动消失, 而离子平衡和膜结构完整不受影响,此区细胞可复极, 是可挽救区。本课题组就选择末端标记法来检测回神颗粒是否能够抑制半暗带细胞的凋亡。A3*B4和A#C是近年来研究较多的细胞凋亡调控基因。由于A#C蛋白具有促进细胞凋亡的作用,而A3*B4蛋白具有抑制细胞凋亡的作用,两者对凋亡的调控作用正好相反,因而认为A#C与A3*B4之间存在一种平衡关系, 共同调节神经细胞凋亡。而A#C与A3*B4之间平衡的失调也是造成

5、缺血性脑损伤后加剧神经细胞凋亡的关键因素之一, 那么人为地重新建立起两者之间的平衡关系就不失为治疗缺血性脑损伤的具有重要意义的新手段。A#C与A3*B4之间的平衡在缺血性脑损伤后被打破,A#C表达的增加明显高于A3*B4,A#C通过抑制A3*B4的活性而使凋亡促进作用进一步增强, 从而启动了神经细胞的凋亡程序, 使神经细胞发生了凋亡。而治疗组的A3*B4表达明显多于A#C的表达,表明回神颗粒能够显著抑制缺血性神经细胞的凋亡, 机制可能是回神颗粒能够促进神经细胞表达A3*B4蛋白, 抑制A#C蛋白的表达,过量表达的A3*B4蛋白则能够抑制A#C蛋白的活性,从而抑制神经细胞的凋亡。综上所述, 回神

6、颗粒具有抑制缺血性脑损伤后半暗带区域的神经细胞的凋亡; 回神颗粒通过促进A3*B4蛋白的表达, 抑制A#C蛋白的表达, 调控两者比例来抑制神经细胞的凋亡。参考文献:陈宝贵, 陈慧娲, 唐启盛8回神颗粒剂对大鼠脑组织海马区氨基酸含量的影响观察8中国中医基础医学杂志,DEEF,G(H) :7EBG58陈宝贵, 赵振发8回神颗粒剂对大鼠智能障碍行为的影响8中国医药学报,DEEF,D7(4) :H7BHG8#$#I# J8 K0,(3-“$ + L)#“$ “$%()M (1“$N /0O#)“$ - “$/“L“-*0(I3M-0 #33(P(*#-“$ “$ # )#- P,0* + -)#$1“

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