裂隙灯显微镜的特殊投照检测方法

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1、裂隙灯显微镜的特殊投照检测方法 上海展鑫优视医疗器械有限公司特约高级顾问 齐备教授 / 文裂隙灯显微镜的结构、 基本工作原理和常规检查 方法已见于各种普及教材, 本文仅深入讲述其照明方 式、 观察倍率、 分辨率和特殊透照检测方法。 1 裂隙灯显微镜的照明系统和观察系统 1.1裂隙灯显微镜的投照系统 1.1.1 基本要求 投照光线照度高、 亮度均匀、 投照界缘清晰, 且 投照区域的大小和投照角度可调节。 1.1.2柯拉(Koeller)照明 柯拉照明的基本结构由光源、 聚光组镜、 光阑和 投射组镜组成。 光源的透射光本应聚焦于投射组镜, 若将光阑放置于聚光组镜和投射组镜之间, 则通过光 阑的光线

2、经投射组镜的中继投射在照射面上形成清晰 的光阑像 (图1) 。式中M为显微镜总放大倍率,M1为物镜放大倍率, M2为目镜放大倍率。 通常旋动变倍鼓轮增加物镜倍率来实现不同的倍 率梯度, 也可以替换目镜倍率来实现增加倍率。 1.2.3分辨率与孔径值 裂隙灯显微镜的分辨率与孔径值(numerical aperture) 正相关。 注视焦点至物镜边缘的连线与主 光轴的夹角称孔径角 (图3-19) , 通过孔径角和注视焦 点的前介质折射率可以计算孔径值。N =n sin(公式2) 式中N为孔径值,n为介质折射率, 为孔径角。 如图3所示, 孔径值与物镜直径正相关, 与物镜 距负相关。 裂隙灯显微镜的分

3、辨率要求孔径值至少 0.085, 将这一数值代入公式2, 可知裂隙灯为求得起 码分辨率, 孔径角应4.88。光阑像光源光阑投射组镜焦平面聚光组镜注视点孔径角主光轴物镜图 3 裂隙灯显微镜的观察系统的孔径角图 1柯拉(Koeller)照明2 裂隙灯显微镜的特殊投照检测方法 2.1 间接投照法(indirect illumination) 2.1.1 方法 光裂隙投射显微镜焦点的旁侧, 藉在组织内的分 散和折射的光线照亮角膜观察目标 (图4) 。 投射光线 与观察视线夹角4560, 裂隙宽度0.2mm1.5mm, 放大程度中至高倍, 投照亮度低至中度。 2.1.2观察目标 用于观察角膜上皮 微囊、

4、微泡等 (图 5) 。1.2裂隙灯显微镜的观察系统 1.2.1基本要求 物镜距足够大, 图像正立, 双镜合焦, 放大倍率 适用, 分辨度充分, 视野区无显著色散和球差。 1.2.2放大倍率 裂隙灯显微镜观察系统为开普勒望远镜结构, 主 要构成组件为物镜组和目镜组, 以及介于二者之间的 转像棱镜。 目标光线通过低度正透镜, 再通过高度正 透镜, 物镜的聚合光线被目镜还原成平行光线 (图2) 。2.2 背面投照法(retro illumination) 2.2.1检测方法 又称后映照法。光 裂隙投射于显微镜焦点 的侧后方的虹膜上,利 用虹膜组织发出的弥散物镜组光栏目镜组目标物45 60图 2裂隙灯

5、显微镜的观察系统光学结构为了便于检查时的操作, 须有足够的物镜距, 故 物镜的焦度较低, 放大倍率可计算如下。M=M1 M2(公式 1)图 4 裂隙灯显微镜的间接投照法66中国眼镜科技杂志.1.2008仪 器 天 地反光从背面照亮 角膜观察目标。 投射光线与观察 视线的夹角根据 需要进行调整, 裂隙宽度根据需 要进行调整, 放 大程度中至高 倍, 投照亮度低 至中度。 直接观观察视线和投射光 线与矢状面的夹角相 等, 二者夹角约为60 (图9) 。 移动裂隙光, 使 之与光源在角膜面上的 反光点相重合。 裂隙宽 度1.5mm2mm, 放大程 度中至高倍, 投照亮度 中至高度。 2.2.3.2观

6、察目标 角膜后弹力层 和内皮细胞 (图10) 。 3 操作步骤 3.1 具体步骤 a. 完成常规裂 隙灯显微镜检查的准 备工作,检查者洗60图 9 镜面反射投照法图5 角膜上皮微泡察弥散反光从背面照亮的角膜观察目标, 称直接法;观 察投照光照亮的部位与弥散反光从背面照亮的部位之 间的目标, 称间接法 (图6) 。图10镜面反射投照法观察角膜内皮手, 调低室内光线, 让被检查者舒适就坐。 b. 调整颏托手轮, 使被测眼外眦部与颏托纵杆外 眦刻度相平。 c. 根据验配师的屈光状态和瞳距调节目镜焦距和 目镜间距。 d. 将裂隙光角度调节到垂直向, 裂隙高度调节到 刻度10, 裂隙滤镜调节到无光栅。

7、e. 将裂隙宽度调节到2mm, 投射角调节到50, 投射光亮度调节到中度, 观察倍率调节到6倍。 f. 使裂隙光线投照被测眼, 前后移动调焦手柄, 使角膜面成像清晰, 将裂隙光线向颞侧转动35, 进行间接投照检测, 观察倍率逐步调节到1016倍。 g. 将观察倍率调回到6倍, 调节裂隙光的投射角 度, 使裂隙光照亮虹膜, 前后移动调焦手柄, 使以照 亮的虹膜为背景的角膜像清晰, 进行直接法背面投照 检测, 观察倍率逐步调节到1016倍。 将裂隙光线向 颞侧转动35, 进行间接法背面投照检测。 h. 将观察倍率调回到6倍, 调节裂隙光和观察镜 的角度, 使二者夹角约60, 与矢状面对称。 移动裂

8、 隙光, 使之与角膜面光源反光点重合, 进行镜面反射 法检测, 观察倍率逐步调节到 10 倍、16 倍、25 倍或 40倍。 3.2 注意事项 a. 作间接投照检测或间接法背面投照检测, 裂隙 灯的投照系统必须具备向颞侧微旋的功能。 b. 背面投照检测时, 若角膜面焦像对比度不足, 可试将亮度调低,从而改善焦面像质量。 c. 镜面反射法检测时, 必须使裂隙光准确地与光 源反光点重合, 前后移动调焦手柄, 使角膜内皮层焦 面清晰, 内皮层反光面位于光源反光点近旁, 裂隙投 射光对侧。直接观察法间接观察法图 6 裂隙灯显微镜的背面投照法2.2.2观察目标 2.2.2.1 直接观察 目标法 观察目标

9、以照 亮的虹膜为背景, 用于观察角膜新生 血管、 角膜异物 (图 7) 。 2.2.2.2 间接观察 目标法 观察目标以照 亮的虹膜旁侧的暗 区为背景,利用从 背面照亮的角膜发 出的弥散光观察角 膜浸润、角膜基质 层的水肿皱纹和镜 片表面的沉淀物等 (图8) 。图 7 直接背面投照法观察角膜新生血管图 8 间接背面投照法观察镜片沉淀物2.2.3 镜面反射投照法(specular reflection) 2.2.3.1检测方法 又称平行光切法。 光裂隙投射于光源在角膜表面 的反光点上,利用光裂隙与反光点对冲所产生的弥散 光照亮角膜后弹力层界面,将显微镜的观察焦点调整 到角膜的内皮层,可以观察到角膜后弹力层界面的反 射光和内皮细胞层。2008.1.中国眼镜科技杂志 67

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