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1、1.1.微生物微生物：是一切体形微小，单细胞或个体结构简单的多细胞，甚至没有细胞结构的低等生物的统称。 2.2. 种种（speciesspecies）：是一个基本分类单位；是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近，与同属内其他种有明显差别 的菌株的总称。 3.3. 菌株（菌株（strainstrain）: : 表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体及其一切后代菌株强调的是遗传型纯的谱系 4. . 微生物分类微生物分类： 原核生物：原核生物：酵母菌、霉菌、原生动物、单细胞藻类 真核生物：真核生物：真细菌(放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、蓝细菌)、古细菌 非细胞结构生物：非细胞结构
2、生物：病毒、 亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒) 古细菌古细菌 1.1. 观察细菌形态时，为什么要用染色法，常用的染色方法有几种？观察细菌形态时，为什么要用染色法，常用的染色方法有几种？ 一般微生物菌体小且无色透明，在光学显微镜下细胞体液及结构的折光率与其背景相差很小，因此用压法或悬滴法进 行观察时，只能看到其大体形态和运动情况，若要在光学显微镜下观察其细致形态和主要结构，一般都需要对他们染色， 从而借助颜色的反衬作用提高观察样品不同部位的反差。 细菌染色法：细菌染色法：活菌：用没蓝或 TTC 等做活菌染色 死菌：负染色和正染色：简单染色法和鉴别染色法（革兰氏染色法、 抗酸性染色法、芽孢染色法、
3、） 2.2. 图示细菌细胞模式图，并注明各部分名称图示细菌细胞模式图，并注明各部分名称 P39P393. 原生质：原生质：通过溶菌酶去除细胞壁或使用青霉素抑制细胞壁合成，而得到的仅有细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。 4. 球状体：球状体：还残留着部分细胞壁的圆球状渗透敏感细胞。 5. L L 型细菌：型细菌：通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。 6. 支原体：支原体：在长期进化过程中形成后适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。 7. 糖被：糖被：包被于某些细菌细胞壁外地一层厚度不定的胶状物质被称糖被。 8. 芽孢：芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、
4、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。 9. 伴孢晶体伴孢晶体: : 少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁边形成一个菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体称伴胞晶体。 10. 菌落菌落: :分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的，有一定形态结构的子 细胞生长群体。 11.11. 假丝酵母：假丝酵母：有些酵母菌与其子代细胞在一起成为链状，称为假丝酵母。 12.12. 芽殖：芽殖：首先细胞核邻近的中心体产生一个小突起，同时，由于水解酶对细胞壁多糖的分解使细胞壁变薄，细胞表面 向外突出，逐渐冒出小芽。然后，部分增大和伸长的核、细胞质、细胞器（如线粒体等）进入芽内，最后芽细胞
5、从母细 胞得到一整套核物质、线粒体、核糖体、液泡等，当芽长到正常大小后，与母细胞脱离，成为一独立的细胞的过程。 酵母菌的主要繁殖方式，出芽方式：多边出芽、两端出芽、三边出芽、单边出芽。 13. 革兰氏染色的主要步骤和关键步骤各是什么，机理如何革兰氏染色的主要步骤和关键步骤各是什么，机理如何 主要步骤： 方法：结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色番红复染油镜观察 关键步骤：脱色 脱色长短会影响菌体的鉴别 （假阳性和假阴性） 机理： 初染时结晶紫透过细胞壁进入细胞，媒染所用的碘液与结晶紫反应生成不溶性的复合物，但这种复合物可以溶于 乙醇。当用乙醇脱色时，G-中的复合物被洗去，但在 G+中由于存在厚厚的肽聚糖
6、，乙醇使肽聚糖脱水以致肽聚糖层空隙变 小 复合物无法通过细胞壁而存在细胞中使细胞仍呈现紫色。番红复染将 G-染成红色，G+的紫色覆盖红色仍呈现紫色。 14.14. 芽孢是如何形成的，其耐热机制是什么芽孢是如何形成的，其耐热机制是什么 芽孢的形成分为 7 个阶段：1、轴丝形成；2、隔膜形成（前芽孢的双层隔膜）；3、前芽孢形成（细胞发生不对称分裂， 小体积部分为前芽孢）；4、皮层形成；5、芽孢衣形成；6、芽孢合成完成；7、芽孢裂解(芽孢囊裂解，芽孢游离)。芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差和皮层的离子强度很高，使皮层产生极高的渗透压去夺取芽孢核心部分的水分， 其结果造成皮层充分膨胀，即核心部分的细
7、胞质高度失水，因此导致该核心具极高的耐热性。 15.15. 溶菌酶和青霉素的作用点溶菌酶和青霉素的作用点溶酶菌：作用于细胞壁肽聚糖二糖单元的 -1,4-糖苷链。青霉素：使细胞壁中肽聚糖的肽桥无法交连。（只作用于革兰氏阳性菌） 16.16. G G- -细菌细菌 LPSLPS 层功能，其稳定性与什么有关层功能，其稳定性与什么有关构成某些革兰氏阴性细菌致病物质内毒素的物质基础；起细菌自我保护作用.重要的抗原因子；是许多噬菌体吸附的受体。吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用。 LPS层的稳定性与Ca2+有关，如果用EDTA等螯合剂去除Ca2+和降低离子键强度，就会使LPS解体。
8、 17.17. 如何通过实验方法确定细菌有无鞭毛如何通过实验方法确定细菌有无鞭毛1 从固体培养基上的菌落形态判断：若该菌长出的菌落形状大，薄且不规则，边缘不圆整，说明有鞭毛；反之，外形圆 整，边缘光滑，厚度较大，说明无鞭毛。2 半固体琼脂穿刺培养：若穿刺线周围有呈混浊的扩散区，说明有鞭毛。3 特殊鞭毛染色法：使染料沉积在鞭毛上，用光学显微镜观察加粗后的鞭毛。4 暗视野悬滴法：根据其运动方式用光学显微镜判断是否有鞭毛。5 电子显微镜观察（最直接的方法）。 18.18. 细菌、酵母菌、霉菌的菌落各有何特点，掌握这些知识有何实际意义细菌、酵母菌、霉菌的菌落各有何特点，掌握这些知识有何实际意义 细菌：
9、一般形成较小的圆形菌落，颜色有白色、黄色等，表面光滑或不光滑 酵母菌：菌落为淡黄色，光滑，半透明，比细菌菌落大。 霉菌：菌落大型，肉眼可见许多毛状物，棕色、青色等，可见黑色的分生孢子群。 对于科学实践中鉴别微生物种类有重要意义。 19.19. 比较细菌、酵母菌、霉菌细胞壁的特殊成分，设想他们的原生质体的制备方法比较细菌、酵母菌、霉菌细胞壁的特殊成分，设想他们的原生质体的制备方法 细胞壁成分的异同：细菌分为 G+和 G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量较高，而 G-不含磷壁酸；G+类脂质一 般无，而 G-含量较高；G+不含蛋白质，G-含量较高。放线菌为 G-，其细胞壁具有 G-所具
10、有的特点。酵母菌和霉菌为真菌， 酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。 原生质体制备方法：G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶 。 G-菌原生质体获得：EDTA 鳌合剂处理，溶菌酶 。 放线菌原 生质体获得：青霉素、溶菌酶。霉菌原生质体获得：纤维素酶。酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶。 20.20. 比较原核生物和真核生物的异同比较原核生物和真核生物的异同 1、真核生物有核膜包被，原核生物没有。 2、真核生物有线粒体、叶绿体、高尔基体、核糖体等，原核生物只有核糖体。 3、真核生物是由原核生物进化来得。 可以从名称上区别：首先要判断有无细胞结构，无细
11、胞结构的是病毒。有细胞结构的前提下判断是不是原核生物，原核生 物有细菌、某些藻类、衣原体、支原体。如果在“菌”字前有“杆”“球”“螺旋”“弧”“细”字为细菌（乳酸菌、醋 酸菌和固氮菌除外），其余为真菌，真菌为真核。藻类中记住蓝藻、颤藻、念珠藻为原核其余为真核就行了。 从结构上区别： 真核细胞：有核膜（有成形的细胞核）和多种细胞器 原核细胞：无核膜（无成形的细胞核）细胞器只有核糖体 21.21. 图示曲霉、青霉、根霉结构示意图，并注明各部分名称图示曲霉、青霉、根霉结构示意图，并注明各部分名称青霉青霉 曲霉曲霉 根霉根霉 22.22. 真菌孢子的类型真菌孢子的类型酵母菌：酵母菌：无性繁殖：节孢子、
12、厚垣孢子、掷孢子、芽生孢子；有性繁殖：子囊孢子。霉菌：无性繁殖：孢囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子；有性繁殖：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。23.23. 试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的基本特点试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的基本特点 自由扩散：又浓度高的地方向浓度低的地方扩散，不需要载体和 ATP 协助扩散：不受浓度的限制，需要载体不需要 ATP 主动运输：不受浓度的限制，需要载体和 ATP *内吞外排：通过细胞膜的流动性而运输大分子物质 24.24. 什么是培养基？用于固体培养基的凝固剂有几种。为什么说琼脂的最好的凝固剂。培养自养微生物常用什么做凝固剂，什么是培养基
13、？用于固体培养基的凝固剂有几种。为什么说琼脂的最好的凝固剂。培养自养微生物常用什么做凝固剂， 为什么？为什么？定义：由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质（混合养料）。用于固体培养基的凝固剂有：琼脂、明胶、硅胶琼脂、明胶、硅胶 琼脂在较高的温度下可以熔化，熔化后会扩散到整个培养液,较低温度时可以凝固 ,此时便将液体变成胶体了.此时与果冻 类似. 25.25. 微生物在培养基中，微生物在培养基中，pHpH 为什么会发生改变，如何保持培养基中为什么会发生改变，如何保持培养基中 pHpH 的相对稳定？的相对稳定？微生物在生长繁殖和积累代谢产物过程中，培养基 PH 会发生如下
14、变化：1.如微生物在含糖基质上生长，会产酸而使 PH 下 降 2.微生物在分解蛋白质和氧基酸时，会产 NH3 而使 PH 上升。3.以（NH4）2SO4 作 N 源，会过剩 SO42-，而使 PH 下降。4.分 解李永阳离子化合物如：NaNO3,会过剩 Na 而使 PH 上升。 为了维持培养基 PH 值得相对恒定，常常在培养基中加入缓冲液物质如磷酸盐，碳酸盐，以缓和 PH 变化的剧烈。 26.26. 微生物的营养类型分几种，主要划分依据是什么？微生物的营养类型分几种，主要划分依据是什么？ 1光能无机自养型（光能自养型） 能以 CO2 为唯一或主要碳源； 进行光合作用获取生长所需要的能量；以无机
15、物如 H2、H2S、S、H2O 等作为供氢体或电子 供体，使 CO2 还原为细胞物质； 2光能有机异养型（光能异养型） 不能以 CO2 为主要或唯一的碳源；以有机物作为供氢体，利用光能将 CO2 还原为细胞物质；在生长时大多数需要外源的生 长因子； 3化能无机自养型（化能自养型） 生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能；以 CO2 或碳酸盐作为唯一或主要碳源进行生长时，利用 H2、H2S、Fe2+、NH3 或 NO2-等无机物作为电子供体使 CO2 还原成细胞物质。 4化能有机异养型（化能异养型） 生长所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能；生长所需要的碳源主要是一些有机化合
16、物，如淀粉、糖类、 纤维素、有机酸等。 5营养缺陷型 某些菌株发生突变（自然突变或人工诱变）后，失去合成某种（或某些）对该菌株生长必不可少的物质（通常是生长因子 如氨基酸、维生素）的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖，这种突变型菌株称为营养缺陷型，相应的野生型 菌株称为原养型。 27. 天然培养基：天然培养基：含化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物。 28. 组合培养基：组合培养基：由化学成分完全了解的物质配制而成。 29. 选择培养基：选择培养基：根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要或对某化合物的敏感性不同而设计出来的培养基。 30. 鉴别培养基：鉴别培养基：在普通培养基中加入能与某代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，而产生某种明显的变化。 31
