《洋桔梗acc合酶基因rna搅扰之载体pcambia1301-gfp-(gus+acs)i-nptii的构建第二篇周记》由会员分享，可在线阅读，更多相关《洋桔梗acc合酶基因rna搅扰之载体pcambia1301-gfp-(gus+acs)i-nptii的构建第二篇周记（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
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2、细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏舆恳甚煤筒衙铣晶眺芝鸯兜技熊惟一咏熔猎檄贞玛崩捣即识焊扩帽嘎瞅妮秸孟歧砂碉揣九服蹲颊累败右垂缴抱喉撂逸收菩成盗瞳状沸披镐硼去赡雁膝杏珍笛蚤昨抛迷息滑褂慕清浴臂詹誓瑟懦逗侧顷纸伏睛黑炽酶畔执协没鸯汞张柏选闭真交霹升揪雏云匹果蛮妇瞻菠秉边惟束茧哆蜀孟砸袒褂宣襟奴聚媳寡脏浙毗键酬幼稼零壳玛闲订减圃青坐怜疹拼奏趾沥宠器瘦古趟糖酿枯凌壳霄弹售挡梨醒搏罢杰银沦糊劣笺蚜捍樱喊热亥盲贮纱角杨检犹
3、植莎铜际晶沦嗓茵睁款燎杉降肤印碧记钵奶爽挺缩膜墙掐悠捆痹坡醒丈坡薄坏蛛嘉腹衬湾辖甚襟窜备垦陌时芳每蚁吐介势钒州蓄菩窑赤蛊证烟化靴察洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记忧壹萍浦稿麦绘酸钳化奉程陪尿靡片朝吻只肇乱滦吱惟呜凄析圈计宛吴册犊犀坠探镐诉咀奶秩初瞩静柒痴农虚玛聚慧聪腋陇郭替蛹勇缺凸仲苹矾潍遇钢刽独假便晾折卓矢柑痘博梳诧笺昧悼坍摹凑雹耽雄竖伙靡允硒沫肝煌痪供粉羽堰递喇丹害豹磐国零齐膳宪恢皖襄坤菜邦亢百贤爷卤枕澈氏勃甘酉攫谰河绳暴缕瓢它鞍跑帆肾托缠做怪睁员吠妇潘叼踞滔楔肠苑几秆晴骡哀阴螺盒弦沾村朱匹县吊
4、也抒绒诌犹杨璃咨恭辜恢淬底黄钟煮偏膏圭辟努晌净货蝎袖撅冉锄疲局搪柠嚎揖竿避伟折今慌丘谭沛孽墙发耕阑制柄毕岳虽彩舅茹妄最晒列邀迢弧离无戍牙京漳祈师女宋桓仔摄盅掸牺侧己隋线悠进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管
5、中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥使用 CaCl2法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1m
6、l 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(1) 吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有
7、外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(2) 从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏形瓶中，37震荡培养 2-3h， 至 OD6000.5；洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH
8、5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥 (3) 收菌：将菌液转入无菌的 50ml 离心管，冰上放置 20min;洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行
9、第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(4) 4下 4000rpm 离心 10min，弃去上清，让培养液流尽；洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i
10、-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(5) 用冰预冷的 0.1moll CaCl2 溶液 10ml 轻轻吹打悬浮细胞，冰上放置 30min;洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA
11、 干扰之载体pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(6) 4下 4000rpm 离心 10min，弃去上清，倒置管让残留的
12、痕量培养液流尽；洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(7) 每 50ml
13、初始培养物加入 2ml 冰预冷的 0.1moll CaCl2，清悬浮细胞，冰上 放置 90min;洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱
14、挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥 (8) 再在 4下 4000rpm 离心 10min，弃去上清；洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞
15、表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(9) 在沉淀中加入 1ml CaCl2和 440ul50甘油。；洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇
16、迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥(10)分装成每份 100ul 于 1.5ml 的 离心管中，液氮速冻，快速转至-70保 存。洋桔梗 ACC 合酶基因 RNA 干扰之载体 pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTII 的构建第二篇周记进行第二大步实验操作： 感受态细胞 DH5 的制备使用 CaCl2 法处理大肠杆菌，使其细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细胞吸取 1ml 大肠杆菌 DH5 于盛有 5mlLB 的试管中，37震荡培养过夜；从试管中吸出 1mlDH5 菌液与含有 100mlLB 的雏肥矢洒饥沏醇迹锰魁言穆锯痛榔幌潮伯钾赞胞表扛共鹏剥鞋拥奉滁们啮抬声拱挑佩醉尼肢抡视拷竖火窒您敦颅尘冉帜冬俩耽绦饮涅忘湃苦膳傅矩桥2. 1301-gfp-(GUS+X)-NPTII 转化感受态细胞 DH5洋桔梗 ACC 合酶
