牛羊布病平板凝集试验牛羊布病平板凝集试验1 1、、试验原理：试验原理：该试验又称为板式孟加拉红平板凝集试验，由于所用的抗原是 酸性（PH3.6--3.9）带色的抗原，该抗原与被检血清作用时能抑制 血清中的 IgMl 类抗体的凝集活性，检查出的抗体是 IgG 类，因此提 高了该项反应的特异性血清的制备1 1、、血清制备血清制备将血液采集与无抗凝的离心管中，温室静置 30 分钟， 3000r/min l 离心 5--10min,5--10min,吸出血清（切勿吸出红细胞成分） ，分 装备用要保存的血清则分离后装入离心管与-- - 2 2 0 0 ℃℃的冰箱内保 存2 2、、虎平平板凝集试验（虎平平板凝集试验（RBPTRBPT）） 将玻璃板清洗干净，划成 50 个方格（横横 10x10x 纵纵 5 5）） ，每格 4cm4cm X X 4 4 c cm.每一格下再划 1cm 宽的小格，各格标上被检血清号，每一横行 做两份待检血清在各方格中加入相应的被检血清血清 3 3 0 0 ulul,,然后再 其旁加入 30ul30ul 虎红平板凝集抗原抗原，用牙签搅动被检血清和抗原使之 均匀混合，形成直径约 2cm 的液区。
轻微摇动，置室温条件下（2 0 ℃） ，4min 内观察结果，同时设阳性血清和阳性血清对照设阳性血清和阳性血清对照方法二、在载玻片上加抗原 30UL，加入 30UL 被检测血清，混匀 在 5min 内观察结果，轻摇载玻片，出现凝集颗粒为阳性，否则为阴 性3、结果观察当阴性阴性血清对照不出现凝集（——）） ，阳性阳性血清对照出现凝集（（+ +）） ， 方可对代检血清进行判定待检血清在 4min,内出现肉眼可见凝集 现象者判为阳性（+） ，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性（— ） 4、注意RBPT 操作简单、反应迅速，且对试验条件要求不高，但特异性 不高，易受试验温度和凝集时间等因素的影响，不易准确判定结果 应用此法所得的阳性检出率为 70%，较 SAT(试管凝集试验) ELISA（酶联免疫吸附试验）低该方法主要用于初筛，对其阳性者，还必须经 SAT 检测为阳性后才能最终判定为阳性。