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1、分类号河南农业大学博士学位论文密级论文题目:鳢目曼过毖坦题签色塞变丝塑昌厦形盛鲍噩堕厦墓生理扭剑英文题目:E F F E C T S , , , O FC A K EF E R T I L I Z E RO NT H ED Y N A M I CH 垒避SQ E匹S 卫卫呈! 鱼堕堡尘羔笪心婴王匿 Q 坠b I 旦幽鲤旦幽Q 鱼殴迥迪l i Y S ! Q L Q 鱼! 笪垂鱼墅H 趔墨丛趟I Q 旦垡Q学位申请人:壶凰盔导师:割国题夔援专业:佳物惹量堂皇越佳堂研究方向:蝈堇裁墙生理生丝论文提交日期:2 0 0 6 年5 月学位授予日期:河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承
2、诺书学位论学位博士文题目饼肥对烤烟届i 体色素变化和品质形成的影响级别及其生理机龃 学生韦风杰学科导师 姓名专业作物栽培学与耕作学刘国顺姓名学位论文如需保密,解密时间年月同是否保密特此声明。赫瑚、l 炽够蔓、 研究生虢韦吩翩躲悭必爱一一:圆A B AI 从G AZ RF bF oF vF q Nq Pm P S 缩略语( A b b r e v i a t i o n B ) 一览表a b s c i s i ca c i di d o l e - 3 - a c e t i ca c i dg i b b e r e l l i ca c i dc y t o k l n i nm a x
3、i m u mc h l o r o p h y l if l u o r e s c e n c em i n i s a lc h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ev a r i a b l ec h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ef r e s hw e i g h tn o n - p h o t o c h e m i c a lq u e n c h i n gc o e f f i c e e n tp h o t o c h e m i c a lq u e n c h i n g
4、c o e f f i c e e n tq u a n t u my i e l do fP S n e tp h o t o s y n t h e t i cr a t ei n t r i n s i cp h o t o c h e m i c a le f f i c i e n c yc h l o r o p h y l l a s el i p o x y g e n a s em a l o n d i a l d e h y d ep e r o x i d a s es u p e r o x i d ed i s m u t a s ec a t a l a s e8
5、 u p e 2 “ o x y g e nf r e er a d i c a l s2 ,6 - d i t e r t - b u t 以一哪t 坶1 p h e n o ld e g r e eC e l s i u sh i g h - p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h yc h l o r o p h y l lp h o t o s y n t h e t i cs y s t e m c a r o t e n o i d ss e e d l i n gs h a d i n gc o n t
6、r o lc h l o r o p h y l Ibc h l o r o p h y l la脱落酸生长素赤霉素玉米素苷最大荧光初始荧光可变荧光鲜重荧光非光化学猝灭系数荧光光化学猝灭系数光合电子传递量子效率净光合速率原初光能转换效率叶绿素酶脂氧合酶丙二醛过氧化物酶超氧物歧化酶过氧化氢酶超氧自由基抗坏血酸摄氏度高效液相色谱叶绿素光系统类胡萝h 素苗期遮荫对照处理叶绿素b叶绿素ah吖眦嗽吼肋劝啪扩跚眦眦咖哳路傩叫摘要通过连续两年的盆栽和大田试验,研究了施用不同用量腐熟饼肥对烤烟发育过程中质体色素变化和品质形成的影响,建立实用的烤烟类胡萝h 亲高效液相色谱分析方法,明确了烤烟发育过程中质体色素变
7、化的基本规律,以及不同饼肥用量对烤烟品质形成的调控效应及其相关生理机制,并利用四川大田样品初步探讨了类胡萝h 索降解与特色香气风格烟叶形成关系主要研究内容和结果如下:1 、建立了快速和环保的采用反相高效液相色谱测定烤烟升片中类胡萝h 素的方法:烤烟叶片中类胡萝h 素用舍O 1 丁基羟基甲苯( B H T ) 的9 0 丙酮水溶液萃取后,加入O 1 9 醋酸铅,4 0 C 低温以1 0 0 0 0 r m i n 离心5 r a i n ,去除溶液中的蛋白质。色谱柱为c l l 反相色谱柱f 3 9 m mi d 1 5 0 r a m ,5t lm ) 。流动相:A ,甲醇一异丙醇( 体积比为
8、1 :1 ) ;B 。超纯水流速:0 5m l m i n 。梯度洗脱:0 1 0 m i n ( 7 0 A + 3 0 B ) :1 0 1 7 m i n ( 1 0 0 A ) ;1 7 3 0 m i n ( 9 0 A+ 1 0 B ) 进样量:1 0uL 检测波长:4 5 0 r i m 。该方法简化了测试前处理,标准回收率为9 1 7 7 1 0 2 8 ,相对标准偏差为3 4 5 7 - 0 3 7 2 2 、测定了杀青前后烤烟叶片中性香气物质的含量:杀青前后不同中性致香成分的含量不同,杀青后含量降低的中性致香成分有3 己烯1 醇、苯甲酵、芳樟醇、壬醛、5 甲基正糠醛、癸醛、
9、茄酮、B 紫罗兰酮、巨豆三烯酮、十四醛、2 - 十四烯一1 醇、新植二烯、邻苯二甲酸二丁酯,其中壬醛、5 甲基正糠醛、癸醛、P 紫罗兰酮、巨豆三烯酮、2 - 十四烯一1 醇、邻苯二甲酸二丁酯、十四醛等,这些物质均以痕量存在。杀青后含量升高的中性致香物质有糠醛、对二甲苯、苯乙醛、香叶基丙酮、巨豆三烯酮混合物、二氢猕猴桃内酯等杀青前后变化较小的香气物质有邻二甲苯、B 二氢大马酮等。杀青改变了发育过程中烟叶香气物质含量,研究新鲜烟叶香气物质含量应采用鲜叶、鲜叶冻千等样品提取相关物质,或者针对某个产区建立相应变化方程、误差系数来矫正研究数据。3 、利用反相高效液相色谱法和分光光度计法初步对不同部位烤烟
10、叶片发育过程中叶绿素,类胡萝b 紊进行了测定结果表明,烤烟发育过程中叶绿素类色素前期变化较大,后期变化趋缓;中部叶片的B 胡萝h 素、新黄质、紫黄质、叶黄质、叶黄素含量变化均较平稳;与下部叶片、中部叶片相比,上部叶片发育后期质体色素含量均较高,其中发育末期上部样品总叶绿素,叶绿素a 、叶绿素b 分别为4 1 5 m g g F w 、3 3 4 m g ,g F w 和1 8 1 m g g 。F w ,B胡萝h 素、新黄质、紫黄质、叶黄质、叶黄素、总类胡萝h 素分别为1 6 1m g g “ F w 、】8 m g ,g “ F w 、0 6 5 m g g F w 、6 1 2 m g g
11、 F w 、8 , 6m g 幢F w 和2 4 6 9m g g F w :同期下部叶片总叶绿素、叶绿素a 、叶绿素b 分别仅为4 3 m g g F w 、3 0 4 m g g F w 和1 2 6 m g g 。F w ,B 胡萝h 素、新黄质、紫黄质、叶黄质、叶黄素、总类胡萝h 素分别仅为上部叶片含量的2 5 、5 0 、5 0 、5 0 0 , 6 、7 0 和3 2 左右。24 、研究了饼肥对烤烟叶片发育过程中质体色素变化及相关生理指标的变化结果表明,配施饼肥促进了叶绿素类色素的合成,其中总叶绿素含量随饼肥用量的增加而总体呈提高趋势,5 0 饼j J E 处理促进了类胡萝h 素类
12、色素的积累。无机肥处理发育后期烟叶衰老加剧,饼肥推迟了烤烟后期的成熟衰老进程;其中5 0 饼肥处理A B A 、M D A 和超氧阴离子含量较高,有利于烟叶后期落黄成熟,1 0 0 饼肥处理z R 含量较高、A B A 、M D A 和超氧阴离子含量较低,从而不利于烤烟后期落黄成熟;与无机肥处理相比,5 0 0 , 饼J I E 处理提高了C A T 、P O D 、S O D 酶活性,促进了发育后期烟叶L O X 、叶绿紊酶活性的提高,1 0 0 饼肥处理提高了P O D活性,部分提高了C A T 活性,降低了S O D 和发育后期的L O X 、叶绿素酶活性;饼肥主要在发育前期影响叶片可溶
13、性蛋白含量,随饼肥用量的增加,含量呈上升趋势。烤烟发育过程中叶绿素、类胡萝 素间相关关系较为密切,饼肥促进了该相关关系的增强,1 0 0 饼肥处理与5 0 饼肥处理相比,协调叶绿素、类胡萝h 素的相关关系能力有弱化趋势;叶绿素酶与叶绿素类色素均呈极显著正相关关系,饼肥促进其相关关系的加强;饼肥5 0 条件下强化了腊氧合酶与质体色素的负相关关系,该相关系数达0 5 左右,1 0 0 饼肥条件下却改变了其负相关关系;饼肥条件下脂氧合酶与质体色素相关系数均为0 3 左右;饼肥促进叶绿素类色素与S O D 、P O D 、C A T 的负相关关系超氧阴离子、电导率均随饼肥用量的增加,其相关程度增强;饼
14、肥促进了可溶性蛋白与叶绿素的正相关关系叶绿素、B 胡萝h 素、叶黄质含量较多可能是饼肥条件下香气量较多的前提,烤烟发育后期L O X 、叶绿素酶等生理指标活性较高可能是饼肥条件下烤烟品质较高的生理基础5 、研究了不同饼肥用量对烤烟发育过程中叶片光合特性的影响结果表明:烤烟叶片的光合色素含量、P s 活性、光化学的最大效率以及荧光猝灭系数等方面均随叶片生育进程而呈现明显的变化,最终导致P s 实际光化学效率及净光合速率呈逐渐下降的趋势不同饼肥用量处理在光合色素及荧光动力学参数方面存在明显差异。使得P n 随叶片衰老表现出不同的特性,在叶片发育末期随饼肥用量的增加,各处理类胡萝h 素含量依次为O
15、0 4m g g F w 、0 0 3 7 m g g F w ,0 0 6 m g g 。F w 、O 0 8 m g g F w 和O 0 9 m g g F w ,E 处理的光合色素含量存在明显优势,这就为光能吸收转化准备了充足的物质条件,而且饼肥用量高的处理P s n 活性和转能效率的提高,P S 反应中心开放部分比例的增大,使光合色素吸收的光能更充分地用于光合作用,随饼肥用量的q N 增长较快,试验表明1 0 0 饼肥处理净光合速率较低。适当的饼肥配施,能够改善叶片的光合功能,有利于植株把所捕获的光能更有效的用于光合作用,从而促进了P s 量子效率和叶片光合速率的提高,本试验条件下,
16、5 0 饼肥配施处理全生育时期均能较能提高烤烟叶片的光合作用6 、研究了饼肥对旺长期遮光及光照转换后烟草品种叶片光合速率、荧光特性的影响结果表明,饼肥对旺长期遮荫及光照转换后烟草叶片光合色素含量、挣光合速率( P n ) 和叶绿紊荧光动力学参数的影响较大其中遮光促进叶片叶绿素,类胡萝p 素含量积累,但无机肥条3件下叶绿素类增加较多,饼肥条件下的类胡萝I - 素增幅显著,导致两处理叶片叶绿素a b 上升和饼肥处理叶绿素,胡萝h 素值下降;遮荫降低了烟草卅片的净光合速率;两种不同的光照转换均导致P n 、m P S I I 、F v F m 、q P 的急剧下降,可能是烟草叶片本身对光照转换过程产生的本能生理生态响应。光照转换过程中P n 由P SI I ,F v F m 、q P 响应的差异表明不同肥科条件下烟草