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1、D DATA ATA S SHEETHEET 本品只能用于科学研究，不能用于临床检测 天津市灏洋生物制品科技有限责任公司TIAN JIN HAO YANG BIOLOGICAL MANUFACTURE CO.,LTD 天津市南开区白堤路 236 号中国医学科学院生物工程研究所 2 号楼 2 层 Tel: 86-22-87893249 Fax: 86-22-87893403 87894017 技术服务热线： （0）15822691119 15822121119 QQ:387745440 2572212016 E-mail: 灏洋生物 TBDsciences 1 各种动物或人脏器组织各种动物或人
2、脏器组织淋巴细胞淋巴细胞分离液操作说明和使用分离液操作说明和使用及及保存中的注意事项：保存中的注意事项： 本品为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液。主要成分是 Ficoll 400 与泛影酸葡甲胺。适用于从 组织匀浆中（胎牛血清或人血清悬起匀浆的细胞 1X107/ml）分离所需细胞，在医疗和医学生物学研 究中广泛应用。 其他人及动物多种比重细胞分离液。 注： 因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞 带电不同， 所以用户在定制分离液时应提供所需分离液的比重、 动物的种属及被分离细胞的名称。 使用方法使用方法 例： 取组织匀浆液 1ml， 小心加于 2ml 的细胞分离液之液面上， 以 1500-2
3、000 转/分离心(半径 15cm 水平转子)15 分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层;为胎牛血清液层。第二层；为环第二层；为环 状乳白色淋巴细胞。状乳白色淋巴细胞。第三层；为透明分离液层。第四层；为红细胞层，收集第二层细胞放入含 细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）4-5 毫升的试管中，充分混匀后，以 1500-2000 转/分离心 10-30 分钟。沉淀经反复洗 2 次即得所需细胞。(此方法效果较好，推荐使用) 分离图例：分离图例： 注意事项注意事项 1. 启封后应置 4保存避免微生物的污染。 2. 细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，需待 溶液温度升至室温时，摇匀后使用
4、。 3. 整个分离过程中，温度应控制在 18-28且在无菌环境 下，避免微生物的污染，否则会影响分离质量。 应应 用用 -从动物组织中分离所需细胞 特点特点 -密度变化率依照 Ficoll 400，泛影酸和氢氧化钠. -最佳分离溶液的密度为参照具体产品的标签 -生理学参数 -在低粘度时高密度 -无菌-即用型-溶液 产品产品质控质控 溶液 注射用水 pH 7.0-7.5 渗透压 280-340mOsmol/kg 1500-2000rpm离 心 15-30 分钟 胎牛血清层 淋巴细胞层 分离液层 红细胞层 1,加入淋巴细胞 分离液 2,加入组织匀浆 单细胞悬液 D DATA ATA S SHEET
5、HEET 本品只能用于科学研究，不能用于临床检测 天津市灏洋生物制品科技有限责任公司TIAN JIN HAO YANG BIOLOGICAL MANUFACTURE CO.,LTD 天津市南开区白堤路 236 号中国医学科学院生物工程研究所 2 号楼 2 层 Tel: 86-22-87893249 Fax: 86-22-87893403 87894017 技术服务热线： （0）15822691119 15822121119 QQ:387745440 2572212016 E-mail: 灏洋生物 TBDsciences 2 内毒素 10，说明细胞分散不充分; 或细胞数500 个/10 mm2 时， 说明稀释不当，需重新制备细胞悬液。 2.要求细胞悬液中的细胞分散良好，否则影响计数准确性。 3.取样计数前，应充分混匀细胞悬液，尤其是多次取样计数时更要注意每次取样都要混匀， 以求计数准确； 4. 数细胞的原则是只数完整的细胞，若细胞聚集成团时，只按照一个细胞计算。如果细胞 压在格线上时，则只计上线，不计下线，只计左线，不计右线。 5. 操作时，注意盖玻片下不能有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中，否则要重新计数。 初学者易犯的错误： 1. 计数前未将待测悬液吹打均匀。 2. 滴入细胞悬液时盖玻片下出现气泡。 3. 滴入悬液时的量太多，至使细胞悬液流入旁边的槽中。
