Candida tropicalis激光育种技术及其降酚特性研究

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1、2 0 0 5 年12 月A B S T R A C TA tp r e s e n t , t h eb i o l o g i c a lt r e a t m e n tt e c h n o l o g yi si nt h et r a n s i t i o n a lp e r i o df r o mm i x e dc u l t u r et op u r ec u l t u r e I nt h i sp a p e r , t w os t r a i n st od e g r a d ep h e n o lw i t hh i g ha c t i v i t

2、yw e 犯i s o l a t e da n di d e n t i f i e df r o ma c c l i m a t e da c t i v a t e ds l u d g eb yu s i n gt h et r a d i t i o n a lm i c r o o r g a n i s mb r e e d i n gt e c h n o l o g y I nb e t w e e n , t h ey e a s tC a n d i d at r o p i c a l i sw a sc o m p l e t e l yi n v e s t i

3、g a t e df o ri t sc h a r a c t e r so fp h e n o l i cc o m p o u n d sb i o d e g r a d a t i o n I no r d e rt oe n h a n c et h ec a p a c i t i e so fCt r o p w a l i st od e g r a d ep h e n o l i cc o m p o u n d s ,H e - N el a s e rW a su t i l i z e dt oi r r a d i a t ew i l d - t y p eC

4、t r o p i c a l i s T h eo p t i m a li r r a d i a t i o np a r a m e t e r sw e i eo b t a i n e dt h r o u g hal o to fp a r a l l e le x p e r i m e n t sa sf o l l o w i n g :1 0 r o W l 0 1 5 m i n , 1 2 5 m W l 0 - 1 5 m i na n d l 5 r o W l o r a i n C o r r e s p o n d i n g l y ,h i g hp o

5、 s i t i v em u t a t i o nf r e q u e n c yw a so b t a i n e di nt h i sr a n g e I np h e n o lb i o d e g r a d a t i o nt e s t s ,7 0p o s i t i v em u t a n t sw i t hh i 【g hp h e n o lb i o d e g r a d a t i o np o t e n t i a lW e r es c r e e n e d P h e n o lb i o d e g r a d a t i o ns

6、t a b i l i t i e sw e r ei n v e s t i g a t e da n dC T M 2w a sa t t a i n e da n du s e di nt h ef o l l o w i n gs t u d i e sf o ri t sf o r e m o s tb i o d a g r a d a t i o np o t e n t i a la n ds t a b i l i t y B e c a u s eo ft h e d e f i n i t i v ee f f e c t so fp h e n o lh y d r o

7、 x y l a s ea n dc a t e c h o ld i o x y g e n a s eo np h e n o lm e t a b o l i s m ,t h ea c t i v i t i e so ft h e s et w oe r l z y m e sw e r ei n v e s t i g a t e d I ts h o w e dt h ea c t i v i t i e so ft h e s et w oe n z y m e sw e r eh i g h e ri nm u t a n ts t r a i nC T M2t h a ni

8、 nt h ew i l ds t r a i n , w h i c hw a sp r e s u m a b l yd u et 0t h el a s e ri r r a d i a t i o n T h u s ,t h ef u l l - l e n g t hs e q u e n c eo fp h e n o lh y d r o x y l a s eg e n eW a ss u c e c s s f u l l yc l o n e db yP C Rm e t h o di nw i l da n dm u t a n tCt r o p i c a l i

9、s r e s p e c t i v e l y T h ec o m p a r i s o no fa m i n oa c i do fp h e n o lh y d r o x y l a s eb e t w e e nw i l d - t y p es l r a i na n dm u t a n ts t r a i nC T M 岔i l l u s t r a t e df o u ra m i n oa c i d sw e r em u t a t e da f t e rt h es t r a i nW a si r r a d i a t e db yH e

10、 - N el a s e r I na d d i t i o n , h e t e r o g e n o u se x p r e s s i o no f p h e n o lh y d r o x y l a s ev a l i d a t e dt h et r u t ht h a tt h ee n z y m ea c t i v i t yv a r i e da f t e rc e l li r r a d i a t e db yl a s e r T h ec h a r a c t e r so fp h e n o l ,m - c r e s o la

11、n d4 一c h l o r o p h e n o lb i o d e g r a d a t i o nw e r ec o n t r a s t i v e l ys t u d i e db e t w e e nm u t a n ts t r a i nC T M2a n di t sp a r e n ts t r a i n T h e i rm a x i m u mp h e n o lb i o d e g r a d a t i o n sw e r e2 0 0 0a n d2 6 0 0 r n g L ,a n dt h em a x i m u ms p

12、e c i f i cg r o w t hr a t e sw e r eO 4 8a n d0 5 4I b , r e s p e c t i v e l y B e s i d e s t h eb i o d e g r a d a t i o no ft h ew i l da n dm u t a n ts t r a i n sw e r ea l S Os t u d i e di nd u a l s u b s t r a t es y s t e m 。r e s p e c t i v e l y T h ee x p e r i m e n t ss h o w e

13、 dt h a tt h ei n h i b i t i o n st oe e l lf r o mm c r e s o la n d4 - c h l o r o p h e n o lr e m a r k a b l ye x c e e d e dt h a tf r o mp h e n 0 1 O nt h ec o n U a r y ,b i o d e g r a d a t i o nf o rm - c r e s o lO I “ 4 - c h l o r o p h e n o lW a Sa c c e l e r a t e da :tt h ep r e

14、 s e n c eo fp h e n 0 1 C o n s e q u e n t l y , t h es t u d i e so fd u a l s u b s t m t ek i n e t i c sp r o v e dt h a tt h ek i n e t i cm o d e lp r o p o s e di nt h i sp a p e rd e s c r i b e dc o m p a t i b l yt h ec e l lg r o w t ha n ds u b s t r a t eb i o d e g r a d a t i o no f

15、 C t r o p i c a l i sa n di t sm u t a n ts t r a i nC T M2 K e yw o r d s :b i o d e g r a d a t i o n ;C a n d i d at r o p i c a l i s ;l a s e ri r r a d i a t i o n ;h y d r o x y l a s e ;k i n e t i cm o d e l ;g e n ec l o n e 独创性声明本人声明所里交的学位论文式本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之外,论文中不包含

16、其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得丢整塞堂或其他教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:蔓嘣签字日期:z 驴。莎年,月。日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解萎翻拦有关保留、使用学位论文的规定。特授权垂童蝼可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行 检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和磁盘。( 保密的学位论文在解密后适用本授权说明)学位论文作者签名:乓岩导师签名:i 零壶寻签字日期:z 。Z 年1 月。日签字日期:h 南年1 月弓日第一章文献综述第一章文献综述1 1 含酚废水处理技术研究进展1 1 1 含酚废水的危害及来源酚类化合物是一种原型质毒物,毒性非常强,对一切生命个体都具有毒害作用【l J 。酚类化合物具有腐蚀皮肤、抑制中枢神经及致癌等作用【2 】。在人体内部,会与细胞原浆中的蛋白质作用,使其变性凝固,从而使细胞失去活力。酚还能继续向生物体内部渗透,引起

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