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1、园艺与种苗，Horticulture Quality standard; Classification standard连翘Forsythiasu spensa （ Thunb.）Vahl是山西省野生的优势药材树种，也是该省道地药材品种之一。其果入药，具有清热解毒，消肿散结的功效。 用于风热感冒，瘟病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑， 热淋尿闭1。 目前连翘种子没有检验和质量标准，无 法对市场上连翘种子的质量进行有效检验，使得连翘种子检验工作没有标准，种子的质量控制受到较大制约，因此，开展连翘种子质量标准的研究是中药材规范化生产亟需解决的问题。1材料与方法1.1材料光照恒温培养箱，干燥箱，水
2、浴锅，电子分析天平（ 万分之一）。 试验用连翘种子采自山西安泽、陵川、闻喜等 16 个产地，来源见表 1，室温储藏备用。1.2方法 1.2.1净度分析。采用徒手减半法分取样品，将种子铺在光滑洁净的平板上，充分混合均匀。以四分法选 取种子样品，选取 10 g 种子，称重后，分选，将纯净种子、其他种子、果梗枝梗和杂质分开2，分别称重，净度分析后各成分之和与原始重量之差不能超过5%，超过该误差，须重新进行试验。 试验重复 3 次。种子净度 （ %）=100%其他种子含量 （ %）杂质 含量 （ %）（ 1）1.2.2千粒重测定。 净度分析后的净种， 随机挑选作者简介：赵艳 （ 1985-），女，山西
3、高平人，硕士，从事中药材种植和研发工作，E-mail：zhaoyan0356 。 收稿日期：2014-03-17园艺与种苗2014 年表1连翘种子来源序号产地海拔/m收集时间/年-月-日1长治县9762012-11-102壶关县1 0302012-11-133屯留县9552012-11-174长子县9432012-11-115平顺东寺头乡1 3252012-11-056平顺虹梯关乡12962012-11-127沁源县1 2002012-11-178黎城县7832012-11-159左权县1 1572012-11-1510陵川县1 2932012-11-1311泽州县8752012-11-211
4、2沁水县9822012-11-2113安泽县8612012-11-1114古县8612012-11-1715闻喜县5062012-11-2416夏县4092012-11-25100 粒 10 份，500 粒 4 份，1 000 粒 3 份，用万分之一电子天平称重，分别计算各处理标准差和变异系数，每重复的变异系数应小于 4.0%，选取变异系数最小的作为连翘干重测定方法3。1.2.3含水量测定。 为确定种子含水率最佳测定方法，分别采用整粒 105 、整粒 130 、磨碎 105 、磨碎 130 4 种方法测定种子含水率，每隔 1 h 称重一次4，比较 4 种方法测定结果与烘干时间的关系， 从而确定
5、种子含水量的最佳测定方法。 每种方法 3次重复，每份 2 g 样品。种子含水量 （ WC，%） （ 试样烘干前重试样烘干后重）/试样烘干前重100%（ 2） 1.2.4种子吸水曲线测定。为确定种子吸水饱和期， 取 100 粒净种，称重，置烧杯中 40 水冲洗 3 次，烧 杯内加 34 倍于种子体积水， 置于 25 水浴锅中，每隔 2 h，滤纸吸取种子表面水，称重，记录，直至种子重量开始减少时为止5。1.2.5发芽率及发芽势检测。取净种，清洗后加水置 于 25 水浴锅中浸泡 24 h，于恒温培养箱中 （ 温度 25 、湿度 65%、全光照 60%），分别用滤纸、脱脂棉、纱布、砂子、海绵为材料进行
6、发芽床预试验，确定连翘种子最适发芽床6。 净种 25 水浴 24 h，弃上面漂浮种子，每皿 100 粒，每份种子 3 次重复，置培养 箱中培养，每天观察，计数，注意补水，保持滤纸湿润。发芽率=发芽种子总数/供试验种子总数100%（ 3） 发芽势=前 5 d 发芽种子总数/供试验种子总数100%（ 4） 1.2.6生活力测定。采用 TTC 检测法，采用 4 因素 4水平正交试验，浸种时间设置 20、24、28、32 h4 个水 平；染色温度设置 25、30、35、40 4 个水平；染色时 间设置 12、16、20、24 h 4 个水平；TTC 浓度设置0.1%、0.2%、0.3%、0.5%4 个
7、水平。种子浸泡后沿种胚 横切，留 50%种胚置于染色液中，观察种胚染色情况 并记录，重复 3 次，每次 50 粒7。 种胚完全着色或大部分着色者为有生活力种子，大部分不着色或完全不着色者为无生活力种子。 生活力=有生活力种子数/供试验种子数100%（ 5）1.2.7种子形态鉴定。随机从净种样品中选取种子，借助放大镜、游标卡尺逐粒记录种子形态特征 （ 包括种子大小、长、宽、形状、颜色、光泽及表面斑点）。 每次 3 重复，每次 100 粒8。2结果与分析2.1不同产地连翘种子的净度连翘种子的净度大多在 74%98%，杂质中以花芽居多，不同产地种子显著性差异不大，其中沁源种子净度最低，净度仅为 74
8、.20%，杂质中花芽、果梗较多，结果见表 2。2.2不同产地连翘种子重量随机选取 3 份净重，在百粒重、五百粒重、千粒重这 3 种方法中， 发现 3 份材料采用五百粒法称取干重的变异系数都小于 4%；而采用千粒重法，虽然公司材料的变异系数很小， 但东寺头材料却接近4%。 五百粒重差异最小，因此，选五百粒重作为连翘种子重量的检测标准， 种子五百粒重多为 1.7 g 左 右，其中长治县种子大而饱满，五百粒重高达 2.14 g，沁水种子五百粒重最小，为 1.230 4 g （ 表 3）。 2.3不同产地连翘种子的含水率经试验，采用高温整粒法测定含水率，连翘种 子含水率多在 6%左右， 其中沁水种子含
9、水率最高，为 7.71%；而左权和壶关种子含水率最低，为 6.01% （ 表4）。2.4种子吸水曲线 由图 1 可知。种子浸种吸涨立即启动，种子重量急剧增加，浸种 412 h 是吸水最快期，而后缓慢吸水，至 24 h 后，吸水停止。 在后期的种子活力检测中304 期表 3连翘种子重量分析预试验结果产地百粒法五百粒法千粒法百粒重/g标准差/g变异系数/%五百粒重/g标准差/g变异系数/%千粒重/g标准差/g变异系数/%长治县0.428 00.012 12.820 02.141 10.024 61.150 04.367 50.103 12.360 0壶关县0.331 30.010 93.288 1
10、1.694 30.002 51.488 03.310 50.005 81.757 0东寺头0.328 90.013 54.103 41.641 90.020 31.235 63.318 10.119 93.613 2均值0.362 70.012 23.403 81.825 80.015 81.291 23.665 40.047 02.576 7表 2不同产地连翘种子净度分析结果产地样品称重/g花芽/g果梗/g其他种子/g净重/g净度/%长治县5.001 80.056 40.045 30.037 94.862 297.21壶关县5.002 00.143 70.080 00.064 04.714
11、394.25屯留县5.001 50.492 60.299 80.003 44.205 884.09长子县5.001 90.215 90.053 60.067 64.664 893.26平顺东寺头乡5.004 10.103 30.073 20.109 24.718 494.29平顺虹梯关乡5.001 00.599 70.256 50.050 04.157 883.14沁源县5.010 20.432 50.287 10.573 03.717 674.20黎城县5.001 00.772 40.215 60.150 23.862 877.24左权县5.016 30.769 90.102 20.113
12、14.031 180.36陵川县5.002 20.578 20.044 60.187 23.782 275.61泽州县5.003 50.206 90.103 50.001 34.691 893.77沁水县5.000 80.371 00.100 20.124 04.517 290.33安泽县5.002 10.523 40.35260.316 03.810 176.17古县5.001 70.586 90.423 10.267 43.724 374.46闻喜县5.001 50.483 10.298 70.133 54.086 281.70夏县5.00150.421 50.112 70.074 04.
13、399 387.96种子要预先浸泡 24 h， 使种子充分吸涨后再进行 TTC 染色。2.5不同产地种子活力检测采用 TTC 检测法，采用 4 因素 4 水平正交试验， 浸种时间 20、24、28、32 h；染色温度 25、30、35、40；染色时间 12、16、20、24 h；TTC 浓度 0.1%、0.2%、 0.3%、0.5%，结果见表 5。 由表 5 可知，用 TTC 法染色，浸种时间 24 h，TTC浓度为 0.1%，染色时间为 16 h，染色温度 35 。 不 同产地连翘种子生活力在 66%96%，壶关种子活力较高，屯留种子活力较低。2.6不同产地种子发芽率检测 不同产地连翘种子发
14、芽率差异明显。 其中发芽最快的是东寺头种子，发芽率最高的是陵川种子，为 91%。图 2 为长治县连翘种子发芽情况。其中发芽率最差的为闻喜种子，没有发芽。 在发芽率相同时，发图 1连翘种子吸涨曲线赵 艳等连翘种子质量标准研究31园艺与种苗2014 年表 4不同产地连翘种子净度、干重及含水率产地种子净度/%五百粒重/g含水率/%发芽率/%发芽势/%种子活力/%长治县97.212.141 16.6488.3328.6790.00壶关县94.251.694 36.0182.0025.6796.00屯留县84.091.340 76.7585.3324.3366.00长子县93.261.865 26.15
15、62.6716.0088.00平顺东寺头乡94.291.641 96.0619.671.6792.67平顺虹梯关乡83.141.557 06.0769.0023.0093.33沁源县74.201.724 86.5066.3311.0090.00黎城县77.241.390 67.5512.670.3393.33左权县80.361.791 86.0190.0032.3388.67陵川县75.611.665 66.0891.0020.6778.00泽州县93.771.715 87.5171.3328.0090.08沁水县90.331.230 47.7141.0012.6791.57安泽县76.171
16、.731 86.5592.0021.0085.33古县74.461.625 66.4170.66722.3394.67闻喜县81.701.215 57.200078.67夏县87.961.639 66.5351.6721.6769.33表 5长治县连翘种子活力检测预试验结果试验序号浸种时间 h染色温度 染色时间 hTTC 浓度 %平均活 力/%12025120.190.00022030160.282.33332035200.375.33342040240.511.33352425160.370.33362430120.583.33372435240.193.66782440200.26.66792825200.553.667102830240.380.333112835120.286.000122840160.18.333133225240.258.333143230200.184.667153235160.554.6671632401
