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1、目录目目录录第第一一章章 项项目目总总论论 .11.1 水水蛭蛭素素的的介介绍绍 .11.1.1 水水蛭蛭素素的的化化学学结结构构和和理理化化性性质质.21.1.2 水水蛭蛭素素的的生生理理功功能能.31.2 水水蛭蛭素素的的应应用用前前景景.31.3 水水蛭蛭素素生生产产工工艺艺 .41.3.1 粗粗提提纯纯 .41.3.2 水水蛭蛭素素的的纯纯化化.51.3.3 水水蛭蛭素素蛋蛋白白质质分分析析方方法法.6第第二二章章 方方案案设设计计 .72.1 产产品品 方方案案 概概述述 .72.1.1 进进行行产产品品方方案案选选择择.72.1.2 简简要要论论述述选选定定方方案案.72.2 工工
2、艺艺流流程程 .82.2.1 工工程程流流程程示示意意图图.82.2.2 工工艺艺流流程程说说明明.82.2.3 工工艺艺流流程程论论证证阐阐述述以以及及工工艺艺参参数数.92.3 物物料料衡衡算算 .102.3.1 技技术术参参数数 .102.3.2 计计算算 .11第第三三章章 设设备备选选型型 .133.1 粉粉碎碎机机 .133.2 过过滤滤装装置置 .143.3 离离心心装装置置 .153.4 凝凝胶胶层层析析装装置置 .153.5 浓浓缩缩结结晶晶装装置置.163.6 冷冷冻冻干干燥燥装装置置.16第第四四章章 防防污污措措施施 .18目录4.1 车车间间环环境境 .184.2 设
3、设备备和和管管道道的的清清洗洗与与杀杀菌菌.184.3 废废水水的的处处理理 .184.4 废废渣渣的的处处理理 .19第第五五章章 结结语语 .19参参考考文文献献 .20第一章 项目总论第第一一章章 项项目目总总论论1.1 水水蛭蛭素素的的介介绍绍水蛭素 (hirudin)是水蛭 (Leech)及其唾液腺中已提取出多种活性 成分中活性最显著并且研究得最多的一种成分,它是由6566 个氨基酸组成的小分子蛋白质(多肽)。水蛭素对凝血酶有极强的抑制作 用,是迄今为止所发现最强的凝血酶 天然 特异抑制剂。近年来在我国以水蛭素为主要成分的中成药已有许多种,如抗血栓片、活血通胶囊等,其年产值达数千万元
4、。含水蛭的新药也在不断研究和推出。利用基因工程生产重组水蛭类多肽药物,以取代水蛭素或作为抗凝化瘀药的添加成分,这在近期内就可实现。作为注射剂用于心血管系统疾病和肿瘤治疗药物,则还需要进一步的临床研究。毋庸置疑,重组水蛭素类多肽药物的开发将会带来巨大的社会效益和经济效益。所以对水蛭素生产工艺研究的不断深入,完善水蛭素提取工艺就显得尤为重要。1.1.1 水水蛭蛭素素的的化化学学结结构构和和理理化化性性质质水蛭( Hirudo)为水蛭科动物蚂蟥(Whitmania pigra Whitman)、水蛭(Hirudo nipponica Whitman)或柳叶蚂蟥( Whitmania acranula
5、ta Whitman)的干燥全体,具有破血、逐瘀、通经作用,用于癥瘕痞块、血瘀经闭、跌扑损伤治疗。作为常用的活血化瘀中药,水蛭在临床广泛用于脑血栓、冠心病、脑水肿等疾病的治疗,其有效成分主要为一种抗凝血物质,名为水蛭素(Hirudin)。它能阻止凝血酶对血小板的作用,抑制血小板受凝血酶的刺激而释放,从而延缓或阻止血液的凝固。研究表明,水蛭素是由65 个氨基与 3 个二硫键组成的多肽,分子量约为7 000,在干燥状态下稳定存在;室温下,在水中稳定存在6个月, 80 下加热 15 min 不被破坏 ;提高溶液的 pH 值,其稳定性下降 ;20 下,在 0.1 mol/L 的 HCl 或 NaOH
6、中可稳定 15 min。 水蛭素是一类很有前途的抗凝化瘀药物,它可用于治疗各种血栓疾病,尤其是静脉血栓和弥漫性血管凝血的治疗;也可用于外科手术后预防动脉血栓的形成,预防溶解血栓后或血管再造后血栓的形成;改善体外血液循环和血液透析过程。在显微外科手术中常因为吻合处血管栓塞而导致失败,采用水蛭素可促进伤口愈合。第一章 项目总论研究还表明,水蛭素在肿瘤治疗中也能发挥作用。它能阻止肿瘤细胞的转移,已证明有疗效的肿瘤如纤维肉瘤,骨肉瘤,血管肉瘤,黑素瘤和白血病等。水蛭素还可配合化学治疗和放射治疗,由于促进肿瘤中的血流而增强疗效。 动物试验和临床研究表明,静脉或皮下注射水蛭素均无明显毒副作用,无论急性、亚
7、急性的毒性试验,对血压、心率、血相、出血时间和血液化学成分均不受影响,呼吸系统也没有影响,无过敏反应,一般无特异抗体发现。半致死剂量LD5050mgAg,远大于治疗所用的剂量(1mgAg)。尤其值得指出的是,水蛭素可以口服,这给用药带来很大方便。水蛭素比较稳定,胰蛋白酶和糜蛋白酶并不破坏其活性,而且水蛭素的某些水解片段仍有抑制凝血酶的作用,这就可以解释为何口服中药水蛭提取液仍然有疗效的原理。1.1.2 水水蛭蛭素素的的 生生理理功功能能动物试验与临床研究表明,水蛭素能高效抗凝血、抗血栓形成,以及阻止凝血酶催化的凝血因子活化和血小板反应等进一步血瘀现象。此外,它还能抑制凝血酶诱导的成纤维细胞的增殖和凝血酶对内皮细胞的刺激。与肝素相比,它不仅用量少,不会引起出血,也不依赖于内源性辅助因子;而肝素则有引起出血的危险,在弥漫性血管内凝血的发病过程中抗凝血酶 III 往往减少,这将限制肝素的疗效,采用水蛭会有较好的效果。天然水蛭素是由 65 或 66 个氨基酸残基组成的单链多肽,分子量约为 7 000,能在极端的 pH 和热条件下稳定存在。水蛭素的形状类似蝌蚪,蝌蚪头部是多肽的 N 端,富含半胱氨酸(cys),半胱氨酸间相互作用形成 3 个二硫键(Cys6-Cys14,Cys16-Cys28,Cys22-Cys39)。使 N 末端结构紧密;蝌蚪尾部是含有多个酸性氨基酸和一个被磺