2016年高考生物第二轮配套讲义:12-29基因工程和细胞工程含答案解析

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1、必考点必考点 29 基因工程和细胞工程基因工程和细胞工程依纲排查1.基因工程的诞生()基因工程的理论基础是什么?2基因工程的原理、技术及应用()(1)基因工程的操作工具是什么?有哪些特点?(2)基因工程操作的“四步曲”分别是什么?(3)基因工程在农业、医学等方面有哪些应用?3蛋白质工程()(1)蛋白质工程操作的基本原理和设计思路是什么?(2)蛋白质工程和基因工程的关系是什么?4植物组织培养()(1)植物组织培养的基本原理和一般操作流程是怎样的?(2)植物组织培养有哪些应用?5动物的细胞培养与体细胞克隆()(1)动物细胞培养的基本操作过程和条件分别是什么?(2)体细胞克隆的操作流程及应用是什么?

2、6细胞融合与单克隆抗体()(1)单克隆抗体制备的操作流程是怎样的?(2)单克隆抗体的特点是什么?有哪些应用?1理清基因工程 3 种操作工具的作用与特点限制酶DNA 连接酶载体作用切割目的基因和载体拼接 DNA 片段,形成重组 DNA 分子携带目的基因进入受体细胞作用部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键作用特点(条件)(1)识别特定的核苷酸序列;(2)在特定位点上切割DNA 分子(1)EcoliDNA 连接酶只能连接黏性末端;(2)T4DNA 连接酶能连接黏性末端和平末端(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;(2)有一个至多个限制酶切割位点;(3)具有特殊的标记基因2.掌握获取目的基

3、因的 3 种途径(1)直接分离:从自然界已有的物种中分离,如从_中获取。(2)人工合成目的基因(常用方法如下)化学合成法:已知核苷酸序列的_基因,直接利用_用化学方法合成,不需要模板。人工合成法:以_为模板,在_作用下人工合成。利用_技术扩增。3牢记基因表达载体的构建(1)基因表达载体的组成:目的基因启动子终止子_复制原点。(2)启动子和终止子:启动子是_结合的位点,启动转录;终止子是_的位点。(3)基因表达载体的构建过程4将目的基因导入受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法_法、基因枪法、花粉管通道法等_技术_法(Ca2处理法)受体细胞体细胞受精卵原核细胞5.理清目的基因的检测与

4、鉴定(1)导入检测:_杂交技术(使用 DNA 探针)(2)表达检测Error!(3)个体生物学水平鉴定:如对转基因作物进行抗虫或抗病等的接种实验。6理清植物细胞工程两大技术7理清动物细胞培养的成分、过程及相关酶(1)培养基的特有成分:_。(2)培养过程:原代培养、传代培养。(3)制备悬液的酶: _。8完善下面克隆动物培育流程图9把握动物细胞融合的原理、方法及应用(1)原理:_。(2)促融方法:灭活的病毒、物理法、化学法。(3)应用:制备单克隆抗体。10理清单克隆抗体制备的过程题组一题组一 聚焦基因工程聚焦基因工程1基因工程的相关判断(1)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测(2014

5、天津,4A)( )(2)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测(2014天津,4C)( )(3)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列(2007全国,4A)( )(4)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸(2010浙江,2A)( )(5)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011浙江,6B)( )(6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上,属于基因工程(2010大纲全国,5D)( )(7)转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加(2010江苏,18B)( )(8)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为 DNA 分

6、子脱氧核糖和磷酸交替连接(2013安徽,6C)( )(9)应用 DNA 探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达(2011四川,5D)( )(10)动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010江苏,18C)( )2(2015重庆,6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是( )A表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞 mRNA 反转录获得B表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用3(2015全国,40)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转

7、运蛋白,由 305 个氨基酸组成。如果将 P 分子中 158 位的丝氨酸变成亮氨酸,240 位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留 P 的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:(1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的_进行改造。(2)以 P 基因序列为基础,获得 P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因,所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括_的复制,以及遗传信息在不同分子之间的流动,即: _。(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过_和_,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表

8、达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。4(2013新课标,40 节选)阅读如下资料:材料甲 科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠” ;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。材料乙 T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码 T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的 T4溶菌酶的第 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第 97 位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了 T4溶菌酶的耐热性。回答下列问题:(1)材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用_法。构建基因表达载体常用的工具酶有_和_。在培育有些转基因植物时,常

9、用农杆菌转化法,农杆菌的作用是_。(2)材料乙中的技术属于_工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对_进行改造,或制造一种_的技术。在该实例中,引起 T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的_序列发生了改变。5为探究 SHH 基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用 SHH 基因的非模板链转录合成的 RNA 作为探针,进行分子杂交实验,以检测 SHH 基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图:(Amp 表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ 基因被 SHH 基因插入后不表达)请回答问题:(1)重组载体中 SHH 基因转录合成 RNA 探针时,_(填“需要”或

10、“不需要”)启动子。(2)步骤中,用 Ca2处理大肠杆菌,使之成为_细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有_基因。(3)能表达 LacZ 基因的大肠杆菌在含有 IPTG 和 Xgal 的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断_(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与_形成杂交带,进而判断 SHH 基因的转录情况。1.使用限制酶的注意点(1)一般用同种限制酶切割载体和目的基因。(2)不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。2DNA 连接酶DNA

11、聚合酶DNA 连接酶连接两个 DNA 片段,而 DNA 聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。3限制酶DNA 酶解旋酶限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列,并使两条链在特定的位置断开;DNA 酶是将 DNA水解为组成单位;解旋酶是将 DNA 的两条链间的氢键打开形成两条单链。4启动子、终止子(1)启动子(DNA 片段)起始密码子(RNA)。(1)终止子(DNA 片段)终止密码子(RNA)。题组二题组二 聚焦细胞工程聚焦细胞工程6细胞工程的相关判断(1)产生抗人白细胞介素8 抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测(2014天津,4B)( )(2)21 三体综合征的诊断必须通过分子检测(

12、2014天津,4D)( )(3)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养(2012广东,2A)( )(4)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理(2008全国,5B)( )(5)乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养(2015江苏,3A)( )(6)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞(2010浙江,4A)( )(7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性(2012江苏,22C)( )(8)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体(2011江苏,14B)( )(9)单克隆抗体技术可以用于治疗老年痴呆症(2010江苏,17C)( )(10)细胞核移植主要

13、在同种动物、同种组织的细胞之间进行(2015江苏,3B)( )7植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用如图所示图解简单表示:d,e,叶片a洗净、灭菌、切条、酶解原生质体悬液b过滤、离心纯净的原生质体c培养基中培养愈伤组织 胚状体植株(1)培育胚状体利用了_这一项生物技术,胚状体再继续培养,则可培育出完整的植株,这体现了_。培养基中除了含有一定的营养外,还必须含有_等植物激素,还需要对培养基进行严格的_。(2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的,若为了获得三七的细胞产物,则只需要培养到_;若为了获得三七的人工种子,则需要培养到_。如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的,通过基因工程要获取抗虫棉,目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是_法。(3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中,必须要经过_。无丝分裂 有丝分裂 减数分裂 原代培养 传代培养 植物体细胞杂交 细胞融合 脱分化 再分化8甲、乙是染色体数目相同的两种二

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