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1、乳与乳制品中黄曲霉毒素M的限量确定及测定方法张宗城(农业部乳品质量监督检验测试中心)黄曲霉毒素是毒性最大的真菌毒素。产生黄曲霉毒素B，(霉菌主要有两种。即黄曲霉菌(寄生曲霉菌(另外还有曲霉毒素M，(子式C。7H，：O，分子量328。乳与乳制品中的黄曲霉毒素乳畜的饲料有关与乳与乳制品生产加工基本无关在乳畜体内由饲料的害部位主要是肝脏11。同时具有免疫毒性降低免疫能力引。降低动物生产性能引。进入20世纪以来关于黄曲霉毒素的立法限量与毒理的深入研究同步但对研究进程和立法的国家尚不如各国对立法及其需作的风险评估正在研究之中并且在不断的完善与协调。本文分析了影响对目前乳及乳制品中 黄曲霉毒素M，限量确定
2、的依据及立法现状(一)黄曲霉毒素M，限量确定依据量的确定是立法的关键内容。乳与乳制品中量取决于科学、社会和经济方面的诸多因素，这些因素不仅在本国相互制约在不同历史时期有不同内容而且与其他国家有着不可分割的联系。主要有以下6个因素1危害分析。害分析是其风险评估中最重要的内容对其毒性研究在动物试验中取得一定成果。性包括基因毒性和免疫毒性(2】。基因毒性的初期是细胞脱氧核糖核酸(结合，后期诱导1。对129红鳟鱼施以周饲喂后通过4种黄曲霉毒素与肝细胞得癌症剂量一响应曲线。结果表明有致癌性，但致癌概率比一个数量级引。对红鳟鱼单独施以同剂量饲喂12个月后表明。当接收20斗g2个月后癌症发病率为31261。
3、鸟类饲喂6g61。畜禽对敏感度远超过鱼类和鸟类，进人肌肉、乳和蛋中，但主要目标组织是肝脏。成年畜禽对其具有一定降解能力。但因降低免疫能力导致生产性能降低：幼畜禽降解能力很弱。危害更大。毒性大小取决于摄入剂量、摄人时间、年龄、饲喂方式和饲料中蛋白质含量。经试验。美国食品药品管理局(定饲料中量为30斗g使牛奶不超过05 kg 人体试验的结果表明损伤部位是肝脏因不同基因和环境合在人肝中表现的结合程度仅是鼠肝的3269。从流行病学调查可知暴露在相同的件下。乙型肝炎病毒(带者或乙型肝炎患者的肝癌发病率明显高于健康人，但与丙型肝炎病毒(关危害分析表明导致肝癌发病，尤其对乙型肝炎病毒携带者或乙型肝炎患者更显
4、危险我国是乙型肝炎高发率国家，对应重视。2暴露分析结果。暴露分析和危害分析结果都是风险评估中重要手段。暴露分析包括内容众多，首先是各种乳制品中含量统计。各乳制品中含量测定值折算到牛奶中的含量。作者简介：张宗城(1940，高级工程师，从事食品化学和分析研究。E63方数据从2005年以来对全国主要生乳产区和乳制品消费区进行抽样监测结果表明乳制品中量随季节有变化。夏秋季生产的含量高于春冬季。其次是不同含量的乳制品摄入导致肝癌发病率的流行病学调查联合围食品添加剂及污染物法典委员会(行暴露分析，在目前世界多数采取的两种限量。即005斗g斗g查表明在相同条件下限量从05斗g5斗g致肝癌发病率无明显降低，对
5、健康的益处并不显著10。这项研究结果对量的确定起到重要的筛选作用。3抽样方案和方法。抽样方案和方法直接关系到乳制品中含量测定和统计影响到暴露分析的结果。乳与乳制品属于均质产品检验的样品属于单品种或孤立批次，验属于计量检验在制定量时应选用单品种或孤立批次抽样方案，用于判定不合格品率。批量检验计量抽样均在未知标准差的条件下进行，因此采取检验样品标准差的抽样方案即毒性决定了另接受数的抽样方案，这种抽样方案既适用于乳制品。又适用于生乳。标准中标值的制定应适应国内外贸易，接受质量限(国际惯例定为95概率。而不同时期有不同值，依据乳与乳制品进口及出口的状况并考虑消费者和生产者双方风险、进口国和出口国双方风
6、险。乳与乳制品的抽样方法受其特性影响。生乳抽样的单位是混合样。一般超过100头份，采取多阶段抽样(121，由混合样中量测定结果决定混前个样的抽样测定。乳制品的抽样采取随机抽样(对不同的乳制品使用不同的抽样工具抽取不同的样量采取不同的封样方式B。抽样方法应降低抽样误差控制在10以内14。4分析方法。乳与乳制品的食品安全以及国际贸易要求各国的分析方法达到国际规定的正确度(包括准确度和精密度)。分析方法的严密性可降低随机误差，提高方法精密度。而方法的准确度取决于方法原理和分析步骤。并可通过以下措施检验：(1)使用有证参考物质：包括国内的准物质以及国际上以欧共体标准局(003年12月始制的含粉和准物质
7、。(2)参加能力验证或实验室比对：由国内或国际组织。国际组织的分为两种形式。种是协同试验(】。另一种是多实验室试验(其要求略逊于协同试验。(3)加标测定的回收率计算：可执行27404验室质量控制规范食品理化检测规定的回收率要求，该标准要求被测组分含量05 定结果均为阳性，无假阴性。(2)选择性试验：在不少于6个来源每个来源不少于5个平行样的总共不少于30个空白样中不含或含有S 05斗g但含类似干扰组分。测试结果均为阴性。(3)浓度一响应值试验：取不少于6个来源，每个来源不少于5个平行样的总共不少于30个空白样即阴性样。再在阴性样中加入组成不少于30个阳性样其浓度水平为4个等差浓度。测定后得出可
8、信度为095的检出限该检出限应与预设的阈值一致19。(二)定量法包括各种色谱法和光谱法。定量法的技术要求包括：(1)选择性试验：通过色谱分离、检测器和检测波长将被测组分与样品基质、提取液、其他干扰组分分开。(2)准确度试验：采用加标测定，加标浓度为025 ，加标测定的回收率达到 274044。(3)精密度试验：采取重复性条件和再现性条件测定。测试样品不少于6个以实验室内和实验室问变异系数表示。在不同浓度水平时达到41。(4)检出限试验：可依据50091品卫生检验方法理化部分总则或按截距S 0时，3倍标准差相当的浓度；当截距0时截距加3倍标准差之值相当的浓度211。(三)确认法质谱法是目前定的最
9、常用的确认法。确认法的技术要求包括：(1)选择性试验：选择性是质谱法最重要的特性。即准确无误地确定被测组分。为此要求具备4个确认点低分辨质谱需1个母离子及两个子离子高分辨质谱需1个母离子及1个子离子且达到相对离子丰度要求 (2)其他技术要求同定量法。综上所述，快速法、定量法和确认法都需经过科学实验验证后制定为标准方法在应用中各具长处。在乳与乳制品中执法检验中均是有效方法应配合使用。参考文献Imof in 999，340(10)：7457502 T，et to in 996，136：1方数据3 D E S 991：5534， I，et of 1 in 995。10：1611645 S， M，et in NA adin 1998339：2332446 P L， D A：994：3657 J， D， F，et to of in 1999，43：6496558 M L， D，994：5139 E， L， J1 1 in in
