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1、深圳市达科为生物工程有限公司 地址:深圳市南山区桃源街道光前工业区20栋4C 邮编:518055 Tel: 0755-86235301 Fax: 0755-86235303 Web: E-mail: 细胞因子套装(细胞因子套装(DC专用)专用)说明书说明书 DC Activated Agent(DC-CYT) DKW35-CYT-DC001 产品描述:产品描述: 细胞因子套装(DC专用)是本公司在对DC的培养进行大量摸索和实验的基础上,根据优选出的细胞培养所需要的刺激因子的种类及剂量配制而成,主要作为人DC细胞培养的诱导活化剂。本产品批间质量稳定,可搭配各种无血清或有血清培养基用于培养DC
2、细胞,使用时按照1:100的比例加入培养基。 包装规格:包装规格: 使用方法:使用方法: 培养细胞时, 将组分I (DC Activated Agent I) 和组分II (DC Activated Agent II)分别按照1:100的比例加入总体系中使用。 培养基总体积 组分I 组分II 5 mL 50 L 50 L 10 mL 100 L 100 L 15 mL 150 L 150 L 具体培养方法:具体培养方法: 1. 新鲜人外周血 50-100ml,分离单个核细胞(PBMCs),用无菌生理盐水或无菌 PBS(不含 Ca2+、Mg2+)重悬,250g 离心 10 分钟,回收沉降下来的细
3、胞,重悬细胞后再重复洗涤 1 次; 2. 用 DC 培养基调整细胞浓度为 3-5106/mL,加入到 TC-treated 75cm2细胞培养瓶中,放入 37,5% CO2,饱和湿度培养箱静置培养 0.52hr; 3. 弃去未贴壁的细胞,用无菌生理盐水或无菌 PBS(不含 Ca2+、Mg2+)洗涤贴壁细胞 34 次; 4. 加入 10 ml DC 培养基,按照 1:100 的比例加入 DC Activated Agent I 100 货号 名称 组分 规格 DKW35-CYT-DC001 细胞因子套装(DC 专用) DC Activated Agent Kit DC Activated Age
4、nt I 150L DC Activated Agent II 150L 深圳市达科为生物工程有限公司 地址:深圳市南山区桃源街道光前工业区20栋4C 邮编:518055 Tel: 0755-86235301 Fax: 0755-86235303 Web: E-mail: L;混匀后置 37、5%CO2,饱和湿度培养箱中进行培养,记为第 0 天; 5. 第 3 天,补加新鲜 DC 培养基 5ml,新加培养基按照 1:100 的比例补加 DC Activated Agent I 50 L(终浓度与步骤 4 一致),置 37、5% CO2,饱和湿度培养箱中继续培养; 6. 第 5 天,根据需要
5、加入特异性抗原负载 DC。 7. 第 6 天,按照 1:100 的比例加入 DC Activated Agent II 150 L,混匀后继续培养 12 天,以促进树突状细胞成熟。 8. 收集悬浮和轻微贴壁的细胞,即为成熟的 DC。 保存方法:保存方法: -20-80,避免反复冻融,保质期 12 个月。 注意:注意: 本品避免反复冻融,使用时注意无菌操作。 推荐使用无血清培养基培养DC。 本品不含负载DC所用抗原,可根据需要额外准备。 本品仅供研究使用。 相关产品:相关产品: 货 号 名 称 规 格 DKW-LST-25050SG Human Lymphocyte Separation Tube 人淋巴细胞分离管(筛板) 25支/包 DKW-LST-25050SK DKW-LSH-0250 Human Lymphocyte Separation Medium 人淋巴细胞分离液(医用级) 250mL DKW34-SM20025 SUPERGROW细胞培养添加物 25mL DKW34-SM10250 SuperDK无血清添加液 250mL 150525