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1、深圳市达科为生物工程有限公司 地址：深圳市南山区桃源街道光前工业区20栋4C 邮编：518055 Tel: 0755-86235301 Fax: 0755-86235303 Web: E-mail: 细胞因子套装（细胞因子套装（DC专用）专用）说明书说明书 DC Activated Agent（DC-CYT） DKW35-CYT-DC001 产品描述：产品描述： 细胞因子套装（DC专用）是本公司在对DC的培养进行大量摸索和实验的基础上，根据优选出的细胞培养所需要的刺激因子的种类及剂量配制而成，主要作为人DC细胞培养的诱导活化剂。本产品批间质量稳定，可搭配各种无血清或有血清培养基用于培养DC
2、细胞，使用时按照1:100的比例加入培养基。 包装规格：包装规格： 使用方法：使用方法： 培养细胞时， 将组分I （DC Activated Agent I） 和组分II （DC Activated Agent II）分别按照1:100的比例加入总体系中使用。 培养基总体积 组分I 组分II 5 mL 50 L 50 L 10 mL 100 L 100 L 15 mL 150 L 150 L 具体培养方法：具体培养方法： 1. 新鲜人外周血 50-100ml，分离单个核细胞（PBMCs），用无菌生理盐水或无菌 PBS（不含 Ca2+、Mg2+）重悬，250g 离心 10 分钟，回收沉降下来的细
3、胞，重悬细胞后再重复洗涤 1 次； 2. 用 DC 培养基调整细胞浓度为 3-5106/mL，加入到 TC-treated 75cm2细胞培养瓶中，放入 37，5% CO2，饱和湿度培养箱静置培养 0.52hr； 3. 弃去未贴壁的细胞，用无菌生理盐水或无菌 PBS（不含 Ca2+、Mg2+）洗涤贴壁细胞 34 次； 4. 加入 10 ml DC 培养基，按照 1:100 的比例加入 DC Activated Agent I 100 货号 名称 组分 规格 DKW35-CYT-DC001 细胞因子套装（DC 专用） DC Activated Agent Kit DC Activated Age
4、nt I 150L DC Activated Agent II 150L 深圳市达科为生物工程有限公司 地址：深圳市南山区桃源街道光前工业区20栋4C 邮编：518055 Tel: 0755-86235301 Fax: 0755-86235303 Web: E-mail: L；混匀后置 37、5%CO2，饱和湿度培养箱中进行培养，记为第 0 天； 5. 第 3 天，补加新鲜 DC 培养基 5ml，新加培养基按照 1:100 的比例补加 DC Activated Agent I 50 L（终浓度与步骤 4 一致），置 37、5% CO2，饱和湿度培养箱中继续培养； 6. 第 5 天，根据需要
5、加入特异性抗原负载 DC。 7. 第 6 天，按照 1:100 的比例加入 DC Activated Agent II 150 L，混匀后继续培养 12 天，以促进树突状细胞成熟。 8. 收集悬浮和轻微贴壁的细胞，即为成熟的 DC。 保存方法：保存方法： -20-80，避免反复冻融，保质期 12 个月。 注意：注意： 本品避免反复冻融，使用时注意无菌操作。 推荐使用无血清培养基培养DC。 本品不含负载DC所用抗原，可根据需要额外准备。 本品仅供研究使用。 相关产品：相关产品： 货 号 名 称 规 格 DKW-LST-25050SG Human Lymphocyte Separation Tube 人淋巴细胞分离管（筛板） 25支/包 DKW-LST-25050SK DKW-LSH-0250 Human Lymphocyte Separation Medium 人淋巴细胞分离液（医用级） 250mL DKW34-SM20025 SUPERGROW细胞培养添加物 25mL DKW34-SM10250 SuperDK无血清添加液 250mL 150525
