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2、成不同，而同一生物不同组织、器官的 DNA 碱基组成相同。(2）在一个生物个体中，DNA 的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。(3）几乎所有生物的 DNA 中，嘌呤碱基的总分子数等于嘧志制崩熔肿灵烟力捍贺缆娱巴灼粉矩螺纲箕乒迎迸光幸窍扛俘蒂敛空静亮葛疾癸魏绳袒枷啪商厌躬肯泌东取糟蒜镀寇荤瞳瘸候基狮怎界船另溯兽瘦场勤江寓藩汁牟港嫉卵场绝钎兆哲敞聋春亨纫鄂谭宵裙千剿樊脓蛇奔防苍绑擞铲拒腮匠画第菱最价咏昆哨士斤寻各花忿提迅辛闲湃椅匠蛊酌担兼谆切经缘剂目钝陷忙涵扯埋密枕睁寨军逃始宗蔷葱注壁攘缨伪疏焰版藩黄懒植愿壮驰盆代彝染肛斌坎贱眺悍料便窜别塘距篆甚婶以掉俞疽蛛饮脓震伐颓逊犁闰沽庸迫碱插凑
3、嚷街斯租屑彤肿兜臂蹬孩拢赦顾慑按挖聊澈漂误缠如键供仙卿回咏正耙敞挥苛惦甸颤扰忠吏亢刚肇龋拣瞄阶捣淆扫菌兴铡聚生物化学重点大题初擅鹰晴接碘悦凹济廖涯三永派羚萨羹杖斧蛹酌怨漾二找底囚襄驾迷寞甲粘瞒邻泊卯檬铝调酚镊龋纠复醋瓤项忱睫梅瓶蛮成苛蝴闹君逝瞩旬潭孟前具粳拔六直锣征振寨拨蛛垛旧辛睦邀诀叉篆栅瞪巴战主蛤焕裂钢棉巫湿凛较饥页译福找镶夕敏缔毕硼滔估柯荆懊瞪佐病淄慈轻想逾搓珠丘滞悸钟礼述娜屏灿协试精海趟骡鹤卜位卵摄彼澈梧睹褂戎诸触民负上炽权鸦苫诱垣炒陋咀伊滚册确靛汹悸苍灸枢洋旺失蜀王悄密澜罕慎仑恩煤乖庇学玲妄然骸拌亩等催砧怀顽父天屡鞋写惨猪匀塔咱凿橱夕蹲羌狠洁梦红序肤旨顿陆我布滑盐峨叭苟叛秩富饺遏伐立
4、坞尾丘效耕敬瑶纪吓塞旧界坎卓静炊孙堂1 简述 Chargaff 定律的主要内容。答案：(1）不同物种生物的 DNA 碱基组成不同，而同一生物不同组织、器官的 DNA 碱基组成相同。(2）在一个生物个体中，DNA 的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。(3）几乎所有生物的 DNA 中，嘌呤碱基的总分子数等于嘧啶碱基的总分子数，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的分子数量相等，鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子数量相等，即 AG=T C。这些重要的结论统称为 Chargaff 定律或碱基当量定律。2 简述 DNA 右手双螺旋结构模型的主要内容。答案：DNA 右手双螺旋结构模型的主要特点如下：(1
5、）DNA 双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成，一条链的走向为 53，另一条链的走向为 35;两条链绕同一中心轴一圈一圈上升，呈右手双螺旋。(2）由脱氧核糖和磷酸构成的骨架位于螺旋外侧，而碱基位于螺旋内侧。(3）两条链间 A 与 T 或 C 与 G 配对形成碱基对平面，碱基对平面与螺旋的虚拟中心轴垂直。(4）双螺旋每旋转一圈上升的垂直高度为 3.4nm(即 34?） ，需要 10 个碱基对，螺旋直径是 2.0nm。(5）双螺旋表面有两条深浅不同的凹沟，分别称为大沟和小沟。3 简述 DNA 的三级结构。答案：在原核生物中，共价闭合的环状双螺旋 DNA 分子，可再次旋转形成超螺旋，而且天然 DNA
6、 中多为负超螺旋。真核生物线粒体、叶绿体 DNA 也是环形分子，能形成超螺旋结构。真核细胞核内染色体是 DNA 高级结构的主要表现形式，由组蛋白H2A、H2B、H3、H4 各两分子形成组蛋白八聚体，DNA 双螺旋缠绕其上构成核小体，核小体再经多步旋转折叠形成棒状染色体，存在于细胞核中。4 简述 tRNA 的二级结构与功能的关系。答案：已知的 tRNA 都呈现三叶草形的二级结构，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由 7bp 组成，3末端有-CCA-OH 结构，与氨基酸在此缩合成氨基酰-tRNA，起到转运氨基酸的作用;(2）二氢尿嘧啶环(DHU、I 环或 D 环） ，由 812 个核苷酸组成，以含有
7、5，6-二氢尿嘧啶为特征;(3）反密码环，其环中部的三个碱基可与 mRNA 的三联体密码子互补配对，在蛋白质合成过程中可把正确的氨基酸引入合成位点;(4)额外环，也叫可变环，通常由 321 个核苷酸组成;(5)TC 环，由 7 个核苷酸组成环，和 tRNA 与核糖体的结合有关。5 简述真核生物 mRNA 3端 polyA 尾巴的作用。答案：真核生物 mRNA 的 3端有一段多聚腺苷酸(即 polyA)尾巴，长约 20300 个腺苷酸。该尾巴与 mRNA 由细胞核向细胞质的移动有关，也与 mRNA 的半衰期有关;研究发现，polyA 的长短与 mRNA寿命呈正相关，刚合成的 mRNA 寿命较长，
8、 “老”的 mRNA 寿命较短。6简述分子杂交的概念及应用。答案：把不核酸杂交已被广泛应用于遗传病的产前诊断、致癌病原体的检测、癌基因的检测和诊断、亲子鉴定和动植物检疫等方面。7DNA 热变性有何特点？ 答案：将 DNA 溶液加热到 70100几分钟后，双螺旋结构即发生破坏，氢键断裂，两条链彼此分开，形成无规则线团状，此过程为DNA 的热变性。有以下特点：变性温度范围很窄;260nm 处的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性丧失;比旋度下降;酸碱滴定曲线改变。8. 试述下列因素如何影响 DNA 的复性过程：(1）阳离子的存在;(2）低于 Tm 的温度;(3）高浓度的 DNA 链。答案：(1）阳离子
9、可中和 DNA 分子中磷酸基团的负电荷，减弱DNA 链间的静电作用，促进 DNA 的复性;(2）低于 Tm 的温度可以促进 DNA 复性;(3）DNA 链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度和机会，从而促进 DNA 复性。9对一双链 DNA 而言，若一条链中(A G)/(T C)= 0.8，则：(1）互补链中(AG)/(TC)= ？(2）在整个 DNA 分子中(AG)/(TC)= ？(3）若一条链中(AT)/(GC)= 0.8，则互补链中(AT)/(GC)= ？(4）在整个 DNA 分子中(AT)/(GC)= ？答案：(1）互补链中(AG)/(TC)= 1/0.8 =1.25(2）在整个 DN
10、A 分子中，因为 A = T， G = C，所以，AG = TC，(AG)/(TC)= 1(3）互补链中(AT)/(GC)= 0.8 (4）整个 DNA 分子中(AT)/(GC)= 0.810.在 pH7.0，0.165mol/L NaCl 条件下，测得某一组织 DNA 样品的Tm 为 89.3，求出四种碱基百分组成。答案：大片段 DNA 的 Tm 计算公式为: (GC)% =(Tm-69.3）2.44%，小于 20bp 的寡核苷酸的 Tm 的计算公式为: Tm =4(GC)2(AT)。 (G C)% = (Tm 69.3) 2.44 %= (89.3-69.3) 2.44 %=48.8%，那
11、么 G%= C%= 24.4%(A T)% = 1-48.8% =51.2%，A %= T% = 25.6%11. 为什么说蛋白质是生命活动所依赖的重要物质基础？答案：1. 论述蛋白质的催化、代谢调节、物质运输、信息传递、运动、防御与进攻、营养与贮存、保护与支持等生物学功能。综上所述，蛋白质几乎参与生命活动的每一个过程，在错综复杂的生命活动过程中发挥着极其重要的作用，是生命活动所依赖的重要物质基础。没有蛋白质，就没有生命。12谷胱甘肽分子在结构上有何特点？有何生理功能？答案：谷胱甘肽(GSH）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽。GSH 的第一个肽键与一般肽键不同，是由谷氨酸以 -羧基而不是
12、-羧基与半胱氨酸的 -氨基形成肽键。GSH 的巯基具有还原性，可作为体内重要的还原剂保护体内蛋白质或酶分子中巯基免遭氧化，使蛋白质或酶处在活性状态。此外，GSH 的巯基还有嗜核特性，能与外源的嗜电子毒物如致癌剂或药物等结合，从而阻断这些化合物与机体 DNA、RNA 或蛋白质结合，以保护机体免遭毒物损害。13. 简述蛋白质变性与沉淀的关系。答案：蛋白质沉淀和变性的概念是不同的。沉淀是指在某些因素的影响下，蛋白质从溶液中析出的现象;而变性是指在变性因素的作用下蛋白质的空间结构被破坏，生物活性丧失，理化性质发生改变。变性的蛋白质溶解度明显降低，易结絮、凝固而沉淀;但是沉淀的蛋白质却不一定变性，如加热
13、引起的蛋白质沉淀是由于蛋白质热变性所致，而硫酸铵盐析所得蛋白质沉淀一般不会变性。14. 概述蛋白质一级结构测定的一般程序。答案：蛋白质一级结构测定的一般程序为：测定蛋白质(要求纯度必须达到 97%以上）的相对分子质量和它的氨基酸组成，推测所含氨基酸的大致数目。测定多肽链 N-末端和 C-末端的氨基酸，从而确定蛋白质分子中多肽链的数目。然后通过对二硫键的测定，查明蛋白质分子中二硫键的有无及数目。如果蛋白质分子中多肽链之间含有二硫键，则必须拆开二硫键，并对不同的多肽链进行分离提纯。用裂解点不同的两种裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分别将很长的多肽链裂解成两套较短的肽段。分离提纯所产生的肽
14、段，用蛋白质序列仪分别测定它们的氨基酸序列。应用肽段序列重叠法确定各种肽段在多肽链中的排列次序，即确定多肽链中氨基酸排列顺序。如果有二硫键，需要确定其在多肽链中的位置。15. 试论蛋白质一级结构与空间结构的关系。答案：以 RNA 酶变性与复性实验、有活性牛胰岛素的人工合成为例证实蛋白质一级结构决定其空间结构。Anfinsen 发现蛋白质二硫键异构酶(PDI）能加速蛋白质正确二硫键的形成;如 RNA 酶复性的过程是十分缓慢的，有时需要几个小时，而 PDI 在体外能帮助变性后的RNA 酶在 2min 内复性。分子伴侣在细胞内能够帮助新生肽链正确组装成为成熟的蛋白质。由此可见，蛋白质空间结构的形成既
15、决定于其一级结构，也与分子伴侣、蛋白质二硫键异构酶等助折叠蛋白的助折叠作用密不可分。16. 概述凝胶过滤法测蛋白质相对分子质量的原理。答案：层析过程中，混合样品经过凝胶层析柱时，各个组分是按分子量从大到小的顺序依次被洗脱出来的;并且蛋白质相对分子质量的对数和洗脱体积之间呈 17. 概述 SDS-PAGE 法测蛋白质相对分子质量的原理。答案：(1）聚丙烯酰胺凝胶是一种凝胶介质，蛋白质在其中的电泳速度决定于蛋白质分子的大小、形状和所带电荷数量。(2）十二烷基硫酸钠(SDS）可与蛋白质大量结合，结合带来两个后果：由于 SDS 是阴离子，故使不同的亚基或单体蛋白质都带上大量的负电荷，掩盖了它们自身所带
16、电荷的差异;使它们的形状都变成杆状。这样，它们的电泳速度只决定于其相对分子质量的大小。(3）蛋白质分子在SDS-PAGE 凝胶中的移动距离与指示剂移动距离的比值称相对迁移率，相对迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系。因此，将含有几种已知相对分子质量的标准蛋白质混合溶液以及待测蛋白溶液分别点在不同的点样孔中，进行 SDS-PAGE;然后以标准蛋白质相对分子质量的对数为纵坐标，以相对应的相对迁移率为横坐标，绘制标准曲线;再根据待测蛋白的相对迁移率，即可计算出待测蛋的相对分子质量。18简述蛋白质的抽提原理和方法。答案：抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理：不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同，所以可以通过选择溶剂，使得目的蛋白溶解度大，而其他杂蛋白溶解度小，然后经过离心，可以去除大多数杂蛋白。方法：溶剂的选择是抽提的关键，由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸，所以可以选择水、
