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1、判断题1、HPLC 可完全取代中、低压柱色谱。 2、HPLC 不能应用于具有生物活性的生物分子的分离。 3、HPLC 的所有溶剂必须经过 0.45m 滤膜过滤：除去溶剂中的机械杂质； 防止输液管道或进样阀产生阻塞。 4、HPLC 梯度洗脱中使用的流动相种类一定大于两种。 5、理想的高效液相色谱的监测器要求其响应对流动相流量和温度变化都十分 敏感。 6、蒸发光散射检测器（ELSD）可检测不含发色团的化合物。 7、HPLC 中，化学键和固定相比一般液体固定相传质快。 8、液相色谱中，可通过增加柱温来改变传质速率。 9、选择流动相时，应避免因流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱 子。 10、高
2、压的离子交换色谱与传统的离子交换色谱相比，其采用交换容量非常 高的特制离子交换树脂为固定相。答案： F F T T F T T F T F单选题：1、在液相色谱中，梯度洗脱用于分离（） A 几何异构体 B 沸点相近，功能团相同的试样C 分配比变化范围宽的试样 2、高效液相色谱法之所以高效，是由于采用（）A 较高的流动相速率 B 高灵敏度的检测器C 粒径小，孔浅而均一的填料 3、下列检测器不能用于梯度洗脱的是（）A 紫外吸收检测器 B 示差折光率检测器C 荧光检测器 4、对温度敏感的检测器是（） A 紫外吸收检测器 B 示差折光率检测器C 荧光检测器 5、对流动相溶剂选择有限制的检测器是（） A
3、 紫外吸收检测器 B 示差折光率检测器C 荧光检测器 6、下列不属于梯度洗脱的操作方式的是（）A 低压梯度 B 高压梯度C 外梯度 7、下列 HPLC 的检测器中，不是通用型检测器的是（）A ELSD B UVC RID 8、下列 HPLC 的检测器中，灵敏度最低的是（）A UV B RIDC MS 9、下列不属于化学键和固定相的特点的是（）A 寿命长，耐流动相冲击 B 传质快，表面无深凹陷C 不利于梯度洗脱，但存在双重分离机制 10、空间排阻分离固定相中最耐高压的是（）A 软质凝胶（葡聚糖凝胶、琼脂凝胶等）B 半硬质凝胶（苯乙烯-二乙烯基苯教练共聚物等）C 硬质凝胶（多孔硅胶等） 11、反向
4、键合相色谱指的是（）A 固定相为极性，流动相为非极性B 固定相的极性远小于流动相的极性C 被键合的载体为极性，键合官能团的极性小于载体极性 12、 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜（） A、0.5m B、0.45m C、0.6m 13、 在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进行（ ）的操作 A、改变柱长 B、改变填料粒度 C、改变流动相或固定相种类 14、 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（） A、提高柱温 B、降低板高 C、减小填料粒度 15、 高效液相色谱仪与气相色谱仪比较增加了（） A、恒温箱 B、程序升温 C、梯度淋洗装置答案：CCBBA CBBCC BBCCC填空
5、题：1、HPLC 的主要部件中，贮液罐的放置位置应-泵体，从而保持一定的输 液静压差。 （高于） 2、梯度洗脱技术的优点是：-，-，改善检测器的灵敏度。 （提高柱 效 缩短分析时间） 3、ELSD 的响应值与样品的-成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测 未知物。 （质量） 4、八十年代后，第二代 ELSD 面世，其以-为光源。 （激光） 5、HPLC 中，化学键和固定相有一个显著特点，就是键合基团的覆盖率决定分 离机制：键合基团覆盖率高，-为主 键合基团覆盖率低，-为主。 （分配 吸附） 6、离子交换树脂分为-和-。 （阳离子交换树脂 阴 离子交换树脂） 7、亲水性固定液常采用-性流动相，
6、即流动相的极性-固定相极性，称为正向液液色谱法。 （疏水 小于） 8、将 HPLC 中常用的溶剂按极性从大到小的顺序进行排列：水，氯仿，乙醇， 乙酸乙酯 -（水 乙醇 乙酸乙酯 氯仿） 9、选择流动相时应注意流动相应满足检测器的要求：当使用-检测器时， 流动相不应有紫外吸收。 （紫外） 10 液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故降低-是提高柱 效的主要途径。 （传质阻力）简答题：1、选择流动相时，除保证分离外还应满足那些要求？ 2、HPLC 中常用的检测器主要有哪几种？试比较 UV 和 RID 的应用范围、响应、 灵敏度、未知物检测能力等因素。 3、什么叫梯度洗脱？它与气相色谱中的
7、程序升温有哪些相同点？ 4、HPLC 的主要应用有哪些？ 5、化学键合固定相的特点有哪些？答案： 1、尽量使用高纯度试剂作流动相，放置微量杂质长期积累损坏色谱柱和使检 测器噪声增加；避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子；试样在流动相中应有适当的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积；流动相同时应满足检测器的要求。 2、检测其种类：紫外检测器、光电二极管阵列检测器、折光指数检测器、电导 检测器、荧光检测器、蒸发激光检测器。检测器应用范围响应灵敏度未知物检测能力 UV有光吸收的化合物化学相关高不能 RID通用折光度相关低能 3、梯度洗脱：使流动相中含有两种或两种以上不同极性的溶剂，在洗脱过程
8、连 续或间断改变流动相的组成，以调节它的极性，使每个流出的组分都有适合的 容量因子，并使样品中的所有组分可在最短时间内，以适用的分离度获得圆满 的选择性分离。 相同点：缩短分析时间，提高柱效，改善峰形，使各组分得到良好的分离； 4、环境中有机氯农药残留量的分析；稠环芳烃的分析；（稠环芳烃多为致癌物质）核碱和核苷、核苷酸、核酸及其碎片的分离、分析；制备型液相色谱。 5、传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快；寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击； 耐水，耐光，耐有机溶剂，稳定；选择性好，可键合不同官能团，提高选择性；有利于梯度洗脱，存在着双重分离机制（高覆盖率，分配为主；低覆盖率， 吸附为主） 。
