漳州师院生物科学与技术系

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1、 漳州师院生物科学与技术系 漳州师院生物科学与技术系 生物实验教学中心 生物实验教学中心 实验目录 实验目录 实验一 显微镜的使用1 实验二 动物的细胞和组织9 实验三 眼虫和变形虫12 实验四 多细胞动物早期胚胎发育及水螅 14 实验五 吸虫、蛔虫17 实验六 涡虫23 实验七 环毛蚓25 实验八 河蚌29 实验九 螯虾35 实验十 蝗虫41 实验十一 环节动物门和节肢动物们解剖观察及比较46 实验十二 鲤鱼的外形和内部解剖47 实验十三 青蛙的外形,皮肤,骨骼和肌肉系统53 实验十四 青蛙的消化,呼吸,泻殖和神经系统59 实验十五 青蛙的循环系统63 实验十六 两栖类坐骨神经动作电位的实验

2、观察67 实验十七 蜥蜴的解剖和食性的分析72 实验十八 家鸽的解剖81 实验十九 兔的皮肤、骨骼系统85 实验二十 兔的消化、呼吸和泻殖系统88 实验二十一 兔(大鼠)循环系统92 实验二十二 兔的神经系统96 实验二十三 鱼纲、两栖纲和哺乳纲神经系统、循环系统和呼吸系统比较99 实验一实验一 显微镜显微镜 一、 目的 了解显微镜的基本构造,初步掌握显微镜的使用方法。 二、 内容 (一) 观察显微镜的各部分结构,理解其基本性能。 (二) 通过字母片和粉蝶鳞片的观察,学习使用显微镜的方法。 (三) 初步认识几种类型的显微镜。 三、 实验材料和用具 学生用显微镜、几种不同类型的显微镜。 载玻片、

3、盖玻片、字母片、50%酒精、粉蝶、毛笔。 显微镜是观察研究细胞、 组织以及原生动物等必需的仪器, 由于显微镜的发展日新月异,而我国各高校教学实验室的设备水平不等, 因此我们在此仍以简单的单筒目镜和双筒目镜复式显微镜为主,再辅以标准的实验室显微镜。 四、 实验操作及观察 必须按实验指导了解显微镜的各部分结构、性能及使用方法。切不可脱离实验指导,擅自扭动各部件,以免损坏仪器。 使用显微镜作一般观察主要是学会调光线、 调焦点。 作显微镜照相时, 还必须调中心 (调聚光器中心) 。 使用高倍镜时,一定要从低倍镜开始。用油镜时要从 40*的物镜开始。将要观察的标本某部分移至视野正中央。 在高倍镜下只能用

4、细调焦器调焦点, 不能用粗调焦器。 要开大光阑。 (一)显微镜的基本结构: 显微镜的中部有一弯曲的柄,称镜臂,基部为镜座。用右手握紧镜臂,将其自镜箱(或镜柜)中取出,左手托住镜座,保持镜体直立,轻放于桌上,观察各部分构造。 镜座上的短柱叫镜柱。 镜座与镜柱之间有一倾斜关节 (在较新的显微镜无此倾斜关节) ,可使用显微镜在 90 度范围内随意倾斜成任何角度。 在镜臂基部有一个方形或圆形的平台,是载物台(或称镜台) 。台的中央有一圆孔,可通过光线。两侧有压片夹,用以固定玻片标本。现代的显微镜具镜台 X-Y 驱动器,用以固定和移动玻片标本。在圆孔的下面,有由一片或数片透镜所组成的聚光器,有集射光线于

5、物体的作用。聚光器附有一组由金属片组成的可变光阑,其侧面伸出一杠杆,可前后移动使光阑开闭。 光阑开大则光线较强, 适于观察色深的物体: 光阑缩小则光线较弱, 适于观察透明 (或无色)的物体。 在聚光器下方有反光镜,可将光线反射至聚光器。此镜一面平,一面凹。凹面具有较1 强的反光性,多用于光线较暗的情况下:光线较强时用平面镜即可。内光源显微镜的光源位于镜座靠后方,在镜座右侧有光源按钮,此按钮可前后移动,使光阑开闭,用以调节光线的强弱。 在载物台的圆孔上方,有一附于镜柄上端的圆筒称为镜筒,其上下两端附有镜头。显微镜如具有抽筒,则在观察物体之前,一般应抽至 160mm 处。现代的显微镜一般有两个镜筒

6、。两镜筒之间的距离,可按观察者双目的距离调节。 镜筒上端有接目镜(或称目镜) ,可从镜筒内抽出。接目镜有低倍和高倍之分。 在镜筒下端有可旋转的圆盘叫旋转器,下面附有 2-4 个接物镜(或称物镜)以螺旋旋入旋转器内。接物镜也有高低和高倍之分。旋动旋转器可换用接物镜。 在镜臂上有两组螺旋。大的叫粗调焦器,小的叫细调焦器。现代的显微镜粗、细调焦器常组合在一起,外周粗的螺旋为粗调焦器,中央细的为细调焦器。用调焦器调焦点。粗调焦器升降镜筒较快,用于低倍镜调焦:细调焦器升降镜筒较慢,用于高倍镜调焦。 接物镜有低倍和高倍之分。较短的是低倍,一般放大 10 倍(10*) :较长的是高倍,一般放大 40 倍 (

7、40*) 、 45 倍 (45*) 或 60 倍 (60*) 。 油物镜放大 90 倍 (90*) 或者 100 倍 (100*) 。接目镜也有高低之分,较长的是低倍,一般放大 5 倍(5*)或 6 倍(6*) ,较短的是高倍,一般放大 10 倍(10*) 、12 倍(12*)或 15 倍(15*) 。 显微镜的总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。例如,使用 5*接目镜与 10*接物镜,则总放大倍数是 50 倍。使用 10*接目镜与 40*接物镜,则总放大倍数是400 倍。 (二)显微镜的使用方法: 使镜臂向着自己(现代显微镜使镜臂反向对着自己) ,摆好显微镜。转动粗调焦器,把

8、镜筒向上提起。转动旋转器,使低倍接物镜对准载物台的圆孔。二者相距约 2cm 左右,两眼对着双筒接目镜观察(如为单筒目镜,则两眼睁开,用左眼看) 。打开可变光阑,用手转动反光镜,使它正对着光源,但不可对直射的阳光。当视野(既从镜内看到的圆形部分)呈现一片均匀的白色时即可。如为内光源显微镜,打开光源按钮,向前向后移动按钮,调节光线的强弱至适宜强度,此为调光线。 取一拉丁字母装片放载物台上,使字母正对中央圆孔。用压片夹(或 X-Y 驱动器)固定。转动粗调焦器,使镜筒下降至低倍接物镜距装片 5mm 左右为度。然后自目镜观察,同时转动粗调焦器,提升镜筒,至视野内的字母清晰为止,此为调焦点。再以可变光阑调

9、节光线至适宜强度。一般现代显微镜由粗、细调焦器提高或降低镜台一镜台下聚光器。 注意视野内看到的字母,上下左右轻轻移动装片,物像的移动方向如何?思考一下原因。 低倍物镜观察毕可转高倍物镜。首先将要详细看的部分移到视野正中央,提升镜筒,转动旋转盘,换高倍物镜。从侧面观察下降镜筒,使高倍物镜几乎接触玻片(1mm 左右)为2 止。再从目镜观察,转动细调焦器,提升镜筒,一般旋转半圈至一圈即可出现物象(要小心操作,切勿压破盖玻片或载玻片) 。可将光阑开大,上下调节细调焦器,使物象达到最清晰为止。 现代显微镜一般在低倍物镜下调好焦点后, 可直接转动高倍物镜。 注意在高倍物镜下,视野内的字母能看到多大部分?与

10、低倍物镜所见比较一下。 使用高倍物镜时,一定先从低倍物镜开始(如上步骤) 。准备详细观察的标本部分,要移到视野正中央。在高倍物镜下调焦点只能用细调焦器,不能用粗调焦器。光阑要开大。 由低倍物镜转高倍物镜需多练习几次,要初步掌握使用方法。 观察粉蝶鳞片:用毛笔在粉蝶的翅上刷几下,在载玻片中央涂一涂,即有一些粉状物附于载玻片上,此即鳞片。于其上加一滴 50%酒精。用镊子另取一干净盖玻片,先使盖玻片一边接触酒精,再轻轻放下,勿使盖玻片与载玻片间留有气泡,或使酒精逸出过多(这是临时装片的作法) 。 做好装片后在低倍物镜下观察, 再转高倍物镜观察。 粉蝶鳞片是什么形状? 观察完毕后,必须先把接物镜头转开

11、,然后取出玻片标本。每次实验完毕后,都要把高、低倍接物镜转向前方,不可使接物镜正对着聚光器,然后放回镜箱(镜柜)内。 要注意经常保持显微镜的清洁。如金属部分有灰尘时,一定要用清洁的软布擦干净。如镜头有灰尘时,必须用特备的擦镜纸轻轻地擦去。切勿用手或其他布、纸等擦拭,以免损坏透镜。 (三) 标准实验室显微镜: 图 1-1 所示为一种装配较完全的标准实验室显微镜 (standar laboratory microscope)剖面图。可按该显微镜的图注及其结构说明认识显微镜各部分结构,并想想各组成结构的功能。 标准实验室显微镜的结构(结合图 1-1)说明: 3 光源(light source,L)

12、:可以为一低电压的灯泡或为一较复杂的光源。 光源聚光器(lamp condenser,LC) :它将光源的像投射到孔径光阑的平面。 场光阑(field diadiaphragm,FD) :光阑的大小可调节,光阑限制光线照射到物体的面积。 镜台下聚光器(substage condenser,SC) :它将场光阑成像于物体平面。通常聚光器由两个调中心螺旋(centering screws,CS)调中心,由聚光器旋钮(condenser knob,K)通过齿轨上下移动调节焦点。 4 聚光器前透镜(front lens of the condenser,FL) :为邻近物体的透镜,用透镜旋钮(lens

13、 knob,LK)能将 FL 移出光路。在聚光器上可附有滤光器支架(filter carriers,FC) 。 镜台下光阑(或孔径光阑,substage diahragm or aerture diahragm,AD)形成镜台下聚光器的入射光瞳(entrance pupil) ,并限制其数值孔径。用光阑杆(diaphragm lever,DL)调节该光阑的大小。缩小光阑可增加景深(depth of field) ,减小球面像差(spherical aberration) ,并产生干涉条纹(interference fringes)增加反差,降低最后像的细节的可见度。 油浸聚光器(oil imm

14、ersion condenser) :其上有 OIL 或 OEL 字样,它比干聚光器有较高的数值孔径。用时在前透镜和物体之间需加一层具有一定折射率的油。 镜台(stage,ST) :转动镜台驱动器(stage drives,SD)旋钮可使镜台在 X-Y 方向移动。 粗、细调焦器(coarse and fine focusing knobs,FK) :大部分现代显微镜由粗、细调焦器提高和降低整个镜台-镜台下聚光器。在较老的显微镜,由粗、细调焦器调节镜筒使其提高和降低。 接物镜(objective lenses,OL) (或称物镜) :它们投射物体放大的像到位于目镜中的中间像平面(intermediate image plane) 。3 个或更多的物镜可装在一个能旋转的转换器上。物镜不同程度地校正了透镜的像差。消色差(achromats)是校正两种颜色,通常是蓝和红。复消色差(apochromats)是完全校正 3 种色(蓝、绿、红) 。Plano 物镜和相似标志的透镜是校正视场的曲率(curvature)失真。这些特别适用于照相。在接物镜筒上常见有 PL25/0.50 字样。 “PL”表明这种透镜是特别校正的,产生平场(flat field) 。这样高度校正的物镜必须与标示的补偿目镜合用,才能获得完全校正的效果。 “25”表示中间像的

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