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1、 分类号：R5 单位代码：10752密 级：公开 学 号：2009228 宁夏医科大学硕士研究生学位论文蓬灰对正常大鼠糖代谢的影响The Effect of peng-hui on glucose-metabolic in normal rats 学位申请人： 王伟指 导 教 师：谢晓敏副教授申请学位类别： 医学专业领域名称： 内科学研所究在方学向： 糖尿病院：临床医学院论文完成日期：二一二年四月宁夏医科大学研究生院 Ningxia Medical UniversityThesis for Application of Masters DegreeThe Effect of peng-hui
2、on glucose-metabolic in normal rats Student Name:Director:WangweiXiexiaominSubject Category： MadicineMajor: Internal MedicineSpecialty:School：Diabetes MellitusDepartment of Clinical MadicineCompletion Date: Apr. 2012I 宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容
3、外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名 论文导师签名年 月 日 年 月 日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名 论文导师签
4、名年 月 日 年 月 日II 宁夏医学院硕士研究生学位论文 中文摘要蓬灰对正常大鼠糖代谢的影响摘要目的 观察不同剂量蓬灰对正常SD雄性大鼠糖代谢的影响。探索性研究蓬灰是否能对糖代谢产生影响，为糖尿病的防治提供可能的依据。方法 雄性SD大鼠60只,随机分四组，分别为低剂量组(A)、中剂量组（B ）、高剂量组（C ）和对照组（D）.实验组分别灌胃给予573mg/kg、1146mg/kg、2291mg/kg蓬灰，对照组给予生理盐水,共饲养12周。饲养期间,于0周、4周、8周、12周监测大鼠空腹血糖(FBG)、于0周、12周监测空腹胰养岛素(FINS)水平的变化。并于饲养12周龄时,取胰腺组织进行HE
5、染色,观察胰腺组织的病理学改变。结果 1.与对照组比较 ,各实验组的空腹血糖，空腹胰岛素水平均无显著差异（ p0.05）。2.各实验组间比较，空腹血糖，空腹胰岛素水平均无显著差异（p0.05）。3.实验组体重较前增加不明显，与对照组相比有显著性（p0.05) on the test group in the fasting blood glucose (FBG) and fasting plasma insulin (FINS).3. The differences were statistically significant(P18岁）中，糖尿病患病率在城市为4.5%,在农村为1.8%。城市
6、人中年龄在18-44岁之间的糖尿病患病率为 2.96% ，45-59岁之间的糖尿病患病率为 4.41%，60岁以上人群的糖尿病患病率为13.13%。2008年再次在全国14个省市范围内进行糖尿病的流行病学调查。通过科学分析，排除性别、年龄、城乡差异和地区分布不同等客观因素后，估计我国糖尿病患病率在（20 ）人群中 约为 9.7% ，估计人数约已达到九千多万。我国可能已发展成为了世界上糖尿病患病人数最多的国家。我国糖尿病的流行特点如下：1.所有糖尿病患者中，2型糖尿病占绝大多数，约占总患病人数的90%以上，其次为1型和妊娠糖尿病各占5%左右，其它类型仅占0.7%。2.经济程度与患病率有关:表现为
7、城市高于农村，高收入高于低收入， 发达地区高于不发达地区的特点。3.与受教育程度成负相关：低教育水平高于高教育水平。我国糖尿病流行的可能原因大致有以下几点:1.城市化。 2.老龄化。3.生活方式改变。4.肥胖和超重的比例增加。5.中国人的易感性。6.糖尿病患者生存期增加。目前针对糖尿病的治疗主要包括以下5个方面：1.糖尿病有关知识的健康教育及指导。2.血糖监测。3.饮食治疗。4运动。5.药物。 糖尿病发病主要与遗传因素、环境因素密切相关。不合理的饮食成分及结构是糖尿病发病的重要因素，也是糖尿病患者血糖波动大，不容易控制，进而导致急、慢性并发症的发生发展。临床发现，糖尿病患者进食含蓬灰的面条后可
8、引起血糖剧烈波动，推测 宁夏医学院硕士研究生学位论文 前言蓬灰可能损伤大鼠胰腺，引起血糖波动。蓬灰因能使面条劲道而被广泛应用于面食制作中。且蓬灰含有微量的重金属元素砷、铅、铝，这些重金属元素已被证实与糖尿病的发生有关系。砷与高血糖：砷主要以 As和 As两种化合价态存在。砷酸根在结构上与磷酸根具有一定的相似性，可以假乱真干扰磷酸根在物质与能量代谢中的作用，减慢葡萄糖的正常代谢，破坏能量生成途径，妨碍了胰岛素分泌的作用。As可与含-SH的蛋白质1紧密结合使其失去活性，从而发挥其潜在的细胞毒素基因毒素和酶抑制剂作用。已2 3证实，长期接触砷可以诱导2型糖尿病的发生。Tseng等在台湾进行的流行病学
9、调查4 5发现，显著的砷浓度蓄积接触和糖尿病之间存在高发关系，即糖尿病的发病率与接触砷化合物的浓度呈正相关。为了更加明确砷与糖尿病的关系，Hui-FenChui Daphnehuang6 7等分别在台湾和新疆高砷地区做进一步调查。通过检测居民血糖发现高砷地区血糖水平明显高于非高砷地区居民血糖水平，进一步支持砷可以诱导糖尿病的发生。铅、铝与高血糖：有动物实验研究证实：铅、铝能拮抗胰岛素的生物学作用故而降低其降血糖的作用,胰岛素用量超过正常量的 50倍时,才能抵消铅、铝对胰岛素降血糖的拮抗作用。8临床发现糖尿病患者食用加入蓬灰的面条后可使餐后血糖明显波动，故推测蓬灰可能会影响糖代谢的某个环节。为此
10、，我们设计了此实验，意在探索性研究蓬灰可能对大鼠胰腺和糖代谢有影响。 宁夏医学院硕士研究生学位论文 材料与方法材料与方法1 实验材料1.1 试验动物健康清洁级8 -10w龄的雄性Sprague-Dawley 大鼠，体重160-190g，由宁夏医科大学动物实验中心提供, 批号：20100310，健康状况符合国家普通实验动物健康标准,检验合格，常规条件下饲养，自由饮水，普通饮食. 环境温度控制在1525，相对湿度控制在45% 55% ，饲养环境保持清洁。实验前禁食12小时。1.2主要试剂及检测仪器材料 来源蓬灰 甘肃省兰州市甘肃力司食品科技有限公司胰岛素试剂盒 美国DSL公司基础饲料 宁夏医科大学
11、动物试验中心80-2 离心机 上海手术器械厂 -80低温冰箱 山东青岛海尔集团电冰箱厂立式低温保存箱 青岛海尔特种电器有限公司PHS-25实验室 PH计 上海理达仪器厂电子称（DS-671） 上海寺岗电子有限公司制造药物架盘天平 浙江省慈溪市天东衡器厂TDZ4-WS低速自动平衡离心机 湖南赛特湘仪 离心机仪器有限公司FA-N/JA-N系列电子天平 上海民桥精密科学 仪器有限公司移液器 Eppendorf Corporation SK-1快速漩涡混匀器 江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司DMS200型紫外 -可见光分光光度计 美国Varian 公司Model550酶标仪 日本BIO-MED公司微量
12、血糖测定仪, 美国强生公司 宁夏医学院硕士研究生学位论文 材料与方法1.3手术用常规器械及HE染色器械大鼠解剖台、无影灯、一次性无菌手套、洞巾、短有齿镊、长无齿镊、眼科镊、眼科剪、组织剪、线剪、无损伤血管钳、血管夹、持针器、手术缝合针、无损伤缝合线、刀柄、刀片、纱布、棉球、小药杯、弯盘、1ml注射器、2.51ml注射器、5ml注射器、20ml注射器、吸耳球、备皮刀、蛇皮灯、切片刀、切片机、恒温箱、蜡杯、解剖刀、解剖剪、解剖盘、培养皿、镊子、单面刀片、包埋盒、染色缸、盖玻片、载玻片、玻片盘、树胶、数胶瓶、显微镜、温度计、水浴锅、福尔马林、酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1
13、%盐酸酒精溶液、中性树胶、精密移液器及一次性吸头、蒸馏水、一次性试管、吸水纸。1.4 实验试剂注射用戊巴比妥钠粉剂（广州市化学试剂厂，进口分装）；0.9%氯化钠注射液（宁夏启元国药有限公司）；肝素钠注射液（江苏万邦生化医药股份有限公司，国药准字H32023409，批号：0907128）；2实验方法：21 蓬灰用温开水按1：4【9】溶解后小心弃出上清，弃去不溶成分。实验大鼠随机分为实验组和对照组。实验组采用半数致死量法 最大耐受量法 结合预实验分别给予【10】 【10】573mgkg、1146mg/kg、2291mg/kg蓬灰溶液灌胃 12周，每日一次。对照组给予生理盐水，每组均为15只大鼠，平
14、均饲养12周【11】。于0周、4周、8周、12周时禁食（不禁饮）约12h，测空腹血糖（FBG）,于0周、12周时禁食（不禁饮）约12h,取血并分离血清后于零下80冻存， 备测空腹胰岛素（FINS）；于12周时取胰腺组织固定后备用。2.2 血糖测定 本实验采用葡萄糖氧化酶法,利用强生血糖仪和同批次血糖试纸测量。葡萄糖氧化酶法为：葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用葡萄糖酸+H2O2+4-氨基安替比林+酚O2+有色化合物。有色化合物颜色深浅同血糖浓度成正比。2.2.1所有大鼠禁食12h后，用酒精消毒大鼠尾巴，用剪刀从尾巴末梢处断尾取血后采用强生公司稳豪血糖仪和同批次试纸,微量法测定静脉全血葡萄糖，记录数据。压迫鼠 宁夏医学院硕士研究生学位论文 材料与方法尾数分钟止血后，用酒精棉球消毒并清洁伤口后放回笼中。2.3
