《慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞TLR4表达及血清CRP检测的临床意义 (论文)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞TLR4表达及血清CRP检测的临床意义 (论文)（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、,P l y 4 处 约 第 l 2 卷 l 期 肺孢子菌肺炎是免疫功能低下患者最常见、 最严重的机 会感染性疾病， 而大约有 8 5 未接受规范预防措施的艾滋 病患者会感染此病， 而且可以反复发生感染， 当 C D 4 T淋巴 细胞绝对值 O 0 5 ) 。 1 2方法 1 2 1单个细胞 T L R A表达测定 抽取 C O P D试验组和对照组患者的外周静脉血 2 mL ， 将其注入抗凝管内( E D T A K 2 ) ， 轻缓地进行混匀将样品保 存在低温冰箱内( 4 。 C) ， 在采集后的 5 h内处理所有样品。 取样品淋巴细胞分离液 2 mL置于离心管内， 混入 2 m L乙二
2、胺四乙酸 ( E D T A ) 抗凝全血和等体积的磷酸盐缓冲液( P B S 溶液) 充分混匀。将混匀后的溶液进行离心处理， 离心 1 5 rai n( 2 0 0 0 r m i n ) ， 离心后 的样品分为 4层， 从上到下依次 为： 血浆、 组织液层； 乳白色的淋巴细胞层； 透明分离液层； 红 细胞层。小心收集第二层 的细胞， 进行沉淀、 洗涤、 离心处 理获得单个核细胞。将离心管的上清液舍弃， 加入 2 0 0 ta L P B S 溶液混匀， 分装到 2个离心 ( E P )管内( 每管 1 0 0 ta L ) ， 标记为 A 、 B管。A管中加入 T L R 4 一 P E单
3、抗体， B管加入 I g G 2 Q P E作 为对照。混匀后在 4下避光培育 3 0 ra i n 。 在 A 、 B管中加入 P B S 溶液 1 mL混匀， 冷冻离心 5 ra i n弃去 上清液。再加入 P B S溶液 5 0 0uL混匀， 转移到流式管 内， 用流式细胞仪进行检测。使用 T L R 4抗体相对平均荧光强 临床研究 度 ( r e l a t i v e m e a n n u o r e s c e n c e i n t e n s i t y ， r mfi ) 对单个细胞表面 的T L R 4表达进行评价。 1 2 2血 清 C RP测定 在清晨空腹抽取试验组和
4、对照组患者的静脉血液 3 m L 作为样品， 静置 2 h后进行离心( 3 0 0 0 r mi n ， 1 0 m i n ) ， 弃去上 清液， 低温保存 ( 一 2 0 C) 。使用免疫比浊法测定血清 C R P浓 度， 试剂盒从上海科华生物工程股份有限公司购买。 1 2 3 C OP D患者肺功能评价 对肺功能 的检测项 目主要包括 F E V1 、 F E V1占预计 值 、 F E V 1 F V C ， 检测前试验组患者要停用支气管扩张剂等 药物， 检测重复 3 遍结果取最佳值。 1 3统 计学方法 所有数据使用 S P S S 1 4 0进行处理， 统计分析方法使用 t 检验，
5、 P0 0 5 认为差异有统计学意义。 2结果 检测结果显示 C O P D试验组的F E V1 、 F E VI占预计值 、 F E V1 F V C分别 为 1 1 2 4- 0 3 2 、 4 1 4 4- 1 3 _ 5 、 4 6 7 1 0 6 ； 对 照组 的 F E V 1 、 F E V1占预计 值 、 F E V I F V C分 别为 2 8 3 O 4 6 、 8 7 4 - 4 - 5 - 8 、 8 0 3 4 2 ， 二者对比， 差异有统计学意义 0 0 5 ) 。 检测结果显示 C O P D试验组的静脉血单核细胞 T L R 4的 m a rl 、 r p c
6、 p分别为 4 7 8 0 3 2 、 4 3 1 O 1 4 ； 对照组的静脉血单 核细胞 T L R 4的 r m fi 、 r p c p分别为 1 4 2 l 0 2 5 、 1 1 2 3 0 2 4 ， 两组对比， 差异均有统计学意义( P0 0 5 ) ， 见表 1 。 检测结果显示 C O P D试验组血清 C R P 均值为 2 4 8 1 5 3 ， 对照组 C R P均值为 7 1 1 2 ， 由此可见试验组 C R P血清和对 照组相比明显增高， 差异有统计学意义( 尸0 0 5 ) 。 表 1 ： COPD试验组和健康对照组静脉血单核细胞 T L R4表达水平 注 ：
7、 与对照组相 比 p 0 0 5 3讨论 C O P D属于呼吸道慢性炎症， 患者呼吸道黏膜的 自净力 下降、 免疫防御功能减弱， 随着疾病的发展会造成呼吸道黏 膜和肺部的实质性病变 】 。从我们的研究结果可知 C O P D 患者的肺功能各项指标明显低于对照组， 说 明C O P D患者的 肺功能遭到明显破坏。 T L R 4是一种可以识别革兰阴性细菌的脂多糖， 可以激 活细胞内的信号传导进而活化免疫基因最终导致细胞释放 大量的炎性因子， 具有调节炎症反应的作用 】 。单核细胞是 人体主要的免疫细胞， 在其表面存在大量的 T L R 4 ， 随着炎症 因子分泌增加 T L R s 类因子的表
8、达会下降， 细胞对病原的反 J o ur n al o f Chi n a Pr e s c r i p t i o n Dr u g Vo i 1 2 No 1 应也会随之减弱。研究报道将小鼠的 T L R 4信号传导过程 中断会造成细菌大量繁殖而引发慢性炎症， 最终会不可逆地 改变肺的形态。本研究结果显示 C O P D试验组患者的单核 细胞 T L R 4表达要明显低于健康对照组， 说明 T L R 4表达的 减少在 C O P D的病理机制过程中起到重要 的作用 l 。文献 报道使用长效支气管扩张剂和糖皮质激素治疗 C O P D患者 后 T L R 4的表达增加， 说明糖皮质激素可以
9、上调单核细胞表 明 T L R 4的表达水平， 增加 C O P D患者的免疫功能， 促进病 原体的清除， 起到了缓解患者症状和治疗的作用 。 C R P即 C反应蛋 白是机体遭受微生物入侵或组织损伤 等炎症刺激后肝细胞合成的应急性蛋 白6 1 o C R P可以和 C 一 多糖结合 ， 在 c 存在时还可以结合细胞膜上的磷酸胆碱进 而激活补体系统， 增强了白细胞 的吞噬能力， 还起到了调节 淋巴细胞或单核、 巨噬细胞的作用， 因此属于机体的非特异 性免疫应答 【 。我们的试验结果显示 C O P D试验组患者的 血清 C R P含量和对照组相比明显增加， 说明患者体内炎症 反应增加， 因此可
10、以来观察患者的治疗过程和疗效。 综上所述， C O P D患者中单核细胞表明T L R 4的表达下 调， 血清 C R P含量上调， 都反应了 C O P D发病时机体的调节 机制， 因此为有效预防和治疗 C O P D患者提供了新的科学根 据和思路。 参考文献 1邓鸿杰 C O P D患者外周血单个核细胞 T L R 4 表达及血清 G RP检测 的临床意义 南 充 ： 川 北医学院， 2 0 1 2 2 杨丽霞 慢性阻塞性肺疾病患者外周血 C D 1 4 单核细胞 T L R 4表达 的临床 意义 南 充 ： 川北 医学 院 ， 2 0 1 2 3 龚燕， 施小梅， 顾洁， 等 慢性阻塞性
11、肺病外周血单个核细胞 表面 T L R 2 、 T L R 4的表达与血清 T N F Q、 I L 一 6 、 I L 一 8 相关性的研究 中国临床医学 ， 2 0 1 2 ， 1 9 ( 2 )： 1 0 8 1 1 1 【4 侯一峰， 周艳春 慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细 胞中T L R 3 、 T L R 7 、 T L R 8 及T L R 9 m R N A的表达 临床和实验医学杂 志 ， 2 0 0 7 ， 2( 2 )： 3 0 3 1 5 郑则广 C O P D患者运动康复治疗的研究进展 中国实用内 科杂志 ， 2 0 0 7 ， 4( 1 0 )： 3 1 8 -
12、3 2 2 6 胡蓉 C O P D患者治疗前后血清 h s C R P 、 T N F Q、 I L 一 6 、 I L 一 8 检测的临床意义 放射免疫学杂志， 2 0 0 7 ， 6( 1 1 ) ： 5 0 3 5 0 5 【 7 杜文军， 王慧， 邢直直， 等 外周血单个核细胞 T L R 4的表达 在慢性乙型重型肝炎患者中的意义 中华实验和临床感染病杂志 ( 电子版) ， 2 0 0 7 ， 4( 6 ) ： 2 2 8 2 3 0 8 1 孑 L 祥龙 稳定期 C O P D患者的 I L 一 1 8 、 T N F Q与营养状况 及预后指标的相关性研究 武汉 ： 中南大学， 2 0 1 2 8 1
