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1、第期化学通报总甲了薄层层析法及其应用姚乾元引言、茸层层析“, ,卜,少一是 最 近火展的一种新型的微量、快速和朋单的层析法。它的操昨是将吸附剂均匀涂布在玻璃板上,然后按照概上层析的操作方式进行物盾的分离和鉴定。早在年依斯迈洛 夫, ,。和希茉具、二,。首先在显微筑裁物片上涂布氧化招吸附剂,以分离闻剂 中的物放。”钓年迈哈特。 血。和哈尔也应用 了相似的方式来鉴定无机离子,币且是应到年克尔希内。等对这种方法才进行一比较系粉的研究,井且侧定了多种挥发油成分的位。其后,斯塔尔,在年将薄层层析用的吸附剂及涂层工一具进行了改进和标准化,因而完全克服了技术上的困难,才使年前所发现的方法,在最近三、四年中取
2、得厂泛的应用。到目前为止,这一方法已能够分离各种类型的天然的或者合肉均化合物,井月一也尝拭用 于无机离子的分离。若从。年算起,至年为山,这十年同所发表的有关文献的数量,根据已搜集的资料可以糟得如图的曲钱。需要巧一。分钟,而机上层析的展开一般需要一小时甚至数日。这是由于浦层层析时,所用的客器小,畏开剂易达鲍和仪及吸附迅沙。样品需要景极少涌常 使用的样品址为一微克。这一点与机上层析相仿。操 附简便,易于林制两层的制务易于规格化,活化后滴加样品的薄层了 立一郎放入客器中屏开。不受谧度影响山于吸附展开迅速,因 而在短时阴扫温度没有很人变化。州是机上层 析,尤其大型的荣作,温度的控制是难的。对可以使用腐
3、触拌印切以色剂如川浓硫酸和浓盐酉芝等应接喷洒在薄层匕。,灵枷度高同一样品其检川的灵加度一般较机土层析高十倍,甚至。微克的物质亦可才 企川。习欲侧走的物质适于比色法戎分光光度法等定量沮定。操作技术主要包括薄层板的制备、样品的滴加、展开、掀色、比蛟马波及定量等操作手授。一薄层板的种类和制备法目前所使用的各种薄层板可大致分类如厂加枯合剂硅胶不加粘合齐。瓶化胡聚酷月 安料刹仁素丁、 卫枷通咎产只犷了双幼,娜 关好尹一乃丫尸不向丈献娜,口曲残图薄层 板。”光性“一人。物质。援冲性板加入不同的援冲溶 、加工州禹酸碱除板一加人稀犯炜沸毗、增水性板川液体石蛤处理。勿影城纂叹由图可以着出,自从”年以来,文献数量
4、迅速增长,固然是技术困难克服了,但是更重要的是,人们很快发现薄层层析法是一个愉单、迅速和有效的分离和鉴定物质的手段。同时它斡概上层析有如下优点混合物分离迅速一般混合物的分离时简仅吸附剂的选择和制备克尔希内什以淀粉为粘合剂系枕地研究过各种吸附剂氧化族、氛化硅、氧化魏、氢氧化钙、碳酸钙及淀份等,发于嘟从硅胶和氧化叙所制成的薄层板,其物理性能及分离能力址好。道到目前为正,仍然是这两种吸附剂 应用鼓广。但是近两年来也使用了另外两种新的吸附剂料推素粉和聚哦胺份,前考用于核酸衍生物及生物碱和氨毖酸的分离后者适用二七黄碱体类物互的分离。一。总乎,化学下面简单的介韶两种常用吸附剂硅胶和氧化叙的制备法。硅胶吸附
5、剂是酸性的吸附剂,一具有良好的分离能力,但其机械性差,所以必填加入粘合剂后,才能用于薄层层析。粘合剂可采用淀扮或者卿石膏。德撇志联邦共和国己出品一种专川 于薄层层析的硅胶,它是含有”暇石膏的硅胶粉。这种砂胶也可按下列方法,精制普通硅胶而得七,。取份普通硅胶,膺袖通过号筋孔,说悬于一份浓盐酸中,放置过夜,过滤出黄色酸液,再加人浓盐酸如操作构一次。此时,酸液滤出 几变为无色。抽滤后的硅胶悬浮水中,倾泻过滤,并洗膝至无氛离子反应。洁白的硅胶再悬浮于一份乙醉中,放置过夜,过滤出微黄色的乙醇液,并用 乙醇洗樵砖胶。最后用份蒸细水冲洗。在干燥小时,再通过号筋孔,置于真空千燥器中冷却。这种硅胶与钻合剂混合,
6、自万叮用于制备薄层。混有粘含荆硅胶活度极的侧定,可按斯塔尔法进行郎用含有甲基黄、靛醉蓝和苏丹江的挥发性溶剂的样品液,在薄层民开,从三种物质斑点的比较而确定其活性。一股果用极活性硅胶。劝氧化叙吸附剂 它是碱性的吸附剂,用于碱性或中胜物质的分离。一般采用化学钝的氧化叙,其粒度为。万毫米。由于其妥开方式是近水平式,所以不加粘合剂。薄层层析氧化绍的活度用一川极者。海日曼尼柯。 。川八二侧定氧化招活度极的方法筒介如二一取毫升斌液毫克偶氮苯毫克对甲氧基偶掀苯、苏丹黄、苏丹杠和对氨基偶氮苯溶解于毫升蒸翩过而且不一含水的四氯化碳中,滴加于氧化奎与琢层板上玻璃板。只“厘米,薄层厚度。毫米。原点简距、一,厘米,原
7、杭距板底边厘米,用四氯化碳为展开剂。展开方式是玻板与容器底部近水平,交角在一。“之简。展开后,比蛟其马值,以确定氧化叙的活度极。若加入一的水或者乙酸,则使其原活度降傲一极。表粼化拐活度钮海日受尼祠分类法梅日曼已可活度极、,值一兰 考二一三习二耳几口偶氮本 卜”。”。”。师对月,率基偶狱苯,。巧,。“生,苏掩。,。玉“,丁。,了苏丹缸川。“一里 圣竺竺些二兰兰,。,】。】“”,通报年薄层糊的绷制法薄层的制 备,是将吸附剂川水稠成糊状,然后用涂层的工具在玻璃板制成薄层。由于所使用的吸附剂种类、薄层的性能及展开一左式等的不 同,因而薄层糊的刹制汰亦有差异。加拈合剂的薄层糊硅胶糊淀粉为粘合剂汤,卜取补
8、支佳胶与克米定粉混匀 这种淀粉很重要,加入毫升水,道火加热,贡沸一飞分钟,六到荻得最大的浓稠度。这样的浓稠度可避免蒲层十屯燥时破裂。再加人一毫升水,迅速加热至沸,放冷后,立自涂层。戴莫尔。,献为如上法制得的薄层其有极良好的硬度。暇石膏为钻合剂比取硅胶粉。份与瑕石膏份混匀,加水一份,调排均匀,直至石膏开始凝固时,立郎涂层。烟石膏在硅胶粉中的含量可 由至。不加粘合剂的薄层糊氧化绍糊取碱性氧化招,活度为一川 极者,粒度。毫米,加适当水稠成糊状 一。条于湘三素糊取扦椎素粉份与内酮弓一。份混匀刹糊丁”。聚酞胺粉用粒度一率米的聚酷胺份或,不加水混稠,道接绅成薄公。加入其他物盾的薄层糊萤光物盾若被鉴定物盾无
9、适当 均显色剂,只可制成鳖光薄层,由于样品斑点无萤光,因而利用其“掩蔽作用, ,在紫外楼下检出。所用的萤光物反可在吸附剂中加入硅酸畔和硫化辞锦袖粉、欲光物质,或者加人极少量的若丹谬。,也可以在薄层板上嗜酒。牛萤光钠水涛液、。 弓硫酸奎宁醇溶液 以及磺墓水褂酸 的内 酮洛液。酸碱溶液改变薄层原有的酸碱性,以改进分离效果。可加入稀酸。草酸或者稀碱等“一。援冲溶液更袖致地改变并且稳定薄层的 酸碱性。可加入乙酸纳、乙酸及磷酸盐等不同通的股冲溶液“。斗僧水液体薄层板展开前用高沸点的液 体石蜡浸清处理,。薄层的堡布法最旱是用凋剂药将吸附利涂布在玻璃板目,虽然这种方式可以获得毫米左右厚的薄层,但在较大或佼长
10、的板上是不能获得厚度均匀的薄层。,年米勒,首先歌针成了涂层的工具,后来又有其他形式涂层工几的戮 洲,“,。斯塔尔川所就汁者已制成商品出售。这第期化些工具敦尉的原理可叔分成两类一类是拼可洞节高度的盛溯漏斗在玻璃板汾动涂层另一类是使这种漏斗固定,批动玻璃板而涂层。这里介招一种筒马的涂层方汰她图月。操作时,将稠好的吸附剂均匀地铺在玻璃板上,按图方式移功,以除去过多的吸附剂。达种方法尤适于无粘 合剂的薄层余布。搔报弦原点与玻 漓板下端边椽距离为一厘米。砖开、浸入高度为厘米。展开后的溶剂前沿琴半顶五川,原点。厘米左右兑图。一万方友滴加才仁而补勺他瑞毯。番介阵赢立、夕甸沁卜厂竹蛛澡方。、图,拥节薄层厚度
11、的塑料不仁厚度。一。奄 卡均匀道径的玻鸡体玻璃板防止 玻将滑动灼环二薄层吸附剂。习呸卜玩炭 立庄来无谕采川什么方式所涂布的薄层都应当光滑 平秒,厚凌均匀。一准米左右及 适当的硬度。否洲薄层易碎裂,或者分离效果不好。薄层的活化薄层板的大小,根据交脸目的的不同而分。开没有艳对规定。但是一般可参考如下的薄层板砚格。图弓卜预定的展开剂前沿原技宝展开剂浸入高度。层 板,贵人盛了了适 当展卜剂的适当玻啊序器中狡抢怒丁交一左玻缸,兑 图号,户互卜剂浸人高厂为。气顺米。若必】寸川玻架使薄层版保持垂汽近水平汀哥不必要。勾加速蒸汽的 沁和,可在弃器中附有足子干剂浸过勺滤刹茶。屏二距离吸一下厘米,豹履俗一翻分钟,溶
12、剂达植先用扮笔划好自前沿后,取出板,在加热一。分钟或者常温干燥然后进 行显巴或川紫外筱雌射,显色舌,再在一曰。加热数分钟,从显示的斑点可以比蚁其位。斑点的定量可采川目砚比杖法、比色法、分光光度汰、复制或份影等方法。长度厘米冤度厘米开开开展展展拭向向预单双一 般采用厚度豹为厘米的普通透明玻璃。涂层后的玻璃板,应当进行活化。一般在窄温放省片刻后,口在一中加热一分钟。然后取出并置于氧氧化钾真察一毫米汉柱干燥器扫放餐一小时。使川这种活化板时,解除拭室所通入的室气,必先料过 氮化钙千燥管除去水分,否则影响薄层的活性。但是活化后的板,借常压氛化钙的干燥器中亦可。如果展开剂中合有水分,薄层板仅于常温干燥后郎
13、可应用。二展开操作及展开剂的选择样品的滴加最好在密阴的容器中进稼 丽商加,诚少因空气中水分而降低活化板的吸附生。若在空气中滴加,一般不超过分钟。样品滴加的方式与概上层析相似 样品量为一微克,滴加后的原点扩散直径为一毫米,原点简的简距为弓一厘米洲洲洲洲洲洲夕夕夕夕口口口】卜一一图斗以双八展开,在向展汗弓近水干展开。在展开时,最常用的展开操作是一次上行法。若号离复杂的成分,可采川双向行法戎者递次行一、总,化学认卜,。城,先用一手,展开剂展开后,挥除溶蒯后,再用另一种展开剂同样方式展开。如不加粘合剂刻常采用近从平式的展开薄层板与容器底部交角大于。,于嘴。一。反开的速度决定于被侧定物质的性质如怪类及不
14、鲍和烬告易 民开,不易被吸附,井日依仔下列官能团的次序印喃强其被吸附性一以一二沮报,。年一姚一一。另外,橄层的粒度及厚度、展开剂的挥发性及浸入高度以及温反等因幸告影叨勺其吏度,。展开剂的选择如同柱层忻和机上层析一样,主要根据容剂的极性不同,以达分离物质的目的,面分招几种展开剂系扮浴剂极性系忱脚展开能力依 容剂极性的墉表各类型物盟的显色剂物盾类别多一文献挥发油蟹光书澳。丘蟹光素水液喷洒后,用澳蒸汽处理板三氯化锑的氧仿液香兰索浓 敬酸液浓硫酸一浓稍胶含浓硝胶的浓硫酸液,一斗街类磷如 吸溶于乙彝介乙醚丈幼溶剂中三氛化锑氮兮液克博于盯毫升氛仿中勺浓硫般,书一生物碱戒类,延井笼德雷金道夫泣裁荆石典化钾一
15、氧化胡水溶液与,。等体积巡合三氧化娣鲍和氨仿液紫外袋检查对氨基苯 甲酸甲醇液灼。,一二几澳醒氛亚酷胺甲醇液助们碘的氯仿液助沁过氧胶或,洗酸脂溶性者绷菌培养有三笨四锉盐存在时、磷如骏乙西盆液、三氧化锑或五氛化锑氮仿液。若丹明水液水介邓三酮液一。克榕于毫升乙醇中,再加入毫升 呀一乙一甲此驼川邻联简香肤一,】、乙酸溶液。澳甲衅徐 溶于乙醇中,每。毫升中加入。氢氧 化钠滴三氛化跌牌于甲醇水中重氮化对硝焦笨服份克对砒基苯胺十浓盐酸每 毫 升加毫 升份,份在 一劝 暄洒夕盐酸翔胀水液与氢氧化钾甲酥液等体积混合,喷于滤抵 上将簌与薄层在一接触一巧分钟,取下滤抵,喷洒 容于盐骏中于抵上日浸板于。一。高锰酸卿溶
16、液 碘蒸气处理走斗,呼斗杭 有未月了月 方,氨基坡斗,群和酮气汇不鲍和牧质情性化今物含有浓硝酸的浓硫酸牌液弓第其化学通报总甲力而加强,可利用不同极性的 容剂混 合物以达分离 目的。己烷 石油醚二硫化碳四氯化碳笨氛仿乙醚乙酸乙醋乙酸甲醋丙酮丙醇乙醇甲醇。若在薄层中加人水或乙酸可咐加溶剂的展开力通用泥合溶剂山利用两种极性不 同的 济荆,根据两者百分率不 同,而用于各种类型中等极性化合物的分离,其展开剂是石油醚中含有一的茉,或者苯中禽有一加的乙醇。强极性物质的展开采月加入乙醇、水、氨或叽咤的混合物。海日曼尼柯用 笨一乙醇展开剂分离了生物诚、凿醇、讯类、菇类、芳香族、脂肪族及脂环族等化合物。含氮的或诚性的有机物质溶盾系粉尼尔保如、叹哪提出丫分离这些物质的溶剂选用原则,他从为应一首先用单一的有机溶剂展开,若展开效果不好,可将薄层板加
