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1、D D D DATA ATA ATA ATA S S S SHEETHEETHEETHEET 本品用于 RNA 和 DNA 的提取 天津市灏洋生物制品科技有限责任公司TIAN JIN HAO YANG BIOLOGICAL MANUFACTURE CO.,LTD 天津市南开区白堤路 236 号中国医学科学院生物工程研究所 2 号楼 2 层 Tel: 86-22-87893249 Fax: 86-22-87893403 87894017 技术服务热线： （0）15822691119 15822121119 QQ:387745440 2572212016 E-mail: 灏洋生物 TBDscie
2、nces 1 分子生物学专用分子生物学专用分子生物学专用分子生物学专用各种动物或人外周血各种动物或人外周血各种动物或人外周血各种动物或人外周血中性粒中性粒中性粒中性粒细胞细胞细胞细胞分离液操作说明和使用及分离液操作说明和使用及分离液操作说明和使用及分离液操作说明和使用及保存中的注意事项保存中的注意事项保存中的注意事项保存中的注意事项： （： （： （： （用于用于用于用于 RNARNARNARNA 和和和和 DNADNADNADNA 提取专用提取专用提取专用提取专用，本品无菌本品无菌本品无菌本品无菌，低热原低热原低热原低热原，无无无无 DNADNADNADNA 和和和和 RNARNARNARN
3、A 酶酶酶酶） 本品为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液。主要成分是 Ficoll 400 与泛影酸葡甲胺。适用于从 血液分离所需细胞，在分子生物学研究中广泛应用。 其他人及动物多种比重细胞分离液。 注： 因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞 带电不同， 所以用户在定制分离液时应提供所需分离液的比重、 动物的种属及被分离细胞的名称。 使用方法使用方法使用方法使用方法 例：取新鲜抗凝血 1ml，与本分离液 1:1 混匀后，小心加于 2ml 的本细胞分离液之液面上，以 2000 转/分离心(半径 15cm 水平转子)25 分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层;为血 浆层。第二层第二层第二
4、层第二层；为环状乳白色的为环状乳白色的为环状乳白色的为环状乳白色的单个核单个核单个核单个核细胞细胞细胞细胞。第三层；为略带混浊的分离液层（富集一定量的中性粒细胞）。第四层；为红细胞层，弃去第一层血浆层第二层细胞，收集第三层分离液层和第四层红 细胞层,放入含细胞洗涤液（2010X1118）10 毫升的试管中，充分混匀后，以 2000 转/分离心 30 分钟。 沉淀经 1 次洗涤后用红细胞裂解液裂解红细胞， 再经 3 次洗涤去除红细胞内溶物和碎片后 取沉淀细胞即为所需中性粒细胞。 红细胞裂解详见红细胞裂解液 （Cat#： NH4CL2009） 说明书(此 方法效果较好，推荐使用) 注意事项注意事项
5、注意事项注意事项 1. 启封后应置 4保存避免微生物的污染。 2. 细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，需待 溶液温度升至室温时，摇匀后使用。 3. 整个分离过程中，温度应控制在 18-28且在无菌环境 下，避免微生物的污染，否则会影响分离质量。 应应应应 用用用用 -从动物血液及组织中分离所需细胞 特点特点特点特点 -密度变化率依照 Ficoll 400，泛影酸和氢氧化钠. -最佳分离溶液的密度为参照具体产品的标签 -生理学参数 -在低粘度时高密度 -无菌-即用型-溶液 产品质控产品质控产品质控产品质控 溶液 注射用水 pH 7.0-7.5 渗透压 280-340mOsmol/kg 内毒素
6、 5EU/ml 无菌 已检测 保存期限 2 年 贮藏 +18-+25 注注注注 意意意意 TBD 实验室的细胞分离培养基是敏光型的。这种培养基在运输和贮藏过程中应避光保温。由于 各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以 调节离心转数，调节离心的时间，摸索最佳的分离条件（具体分离条件各实验室自定） 。组织， 血液，细胞要求新鲜，避免冷冻和冷藏。 贮贮贮贮 藏藏藏藏 18-25避光保存。启封后置 4保存。本品为真空包装，未启封前置于 10 以下易出现白色结D D D DATA ATA ATA ATA S S S SHEETHEETHEETHEET 本品
7、用于 RNA 和 DNA 的提取 天津市灏洋生物制品科技有限责任公司TIAN JIN HAO YANG BIOLOGICAL MANUFACTURE CO.,LTD 天津市南开区白堤路 236 号中国医学科学院生物工程研究所 2 号楼 2 层 Tel: 86-22-87893249 Fax: 86-22-87893403 87894017 技术服务热线： （0）15822691119 15822121119 QQ:387745440 2572212016 E-mail: 灏洋生物 TBDsciences 2 晶，影响分离效果。 红细胞裂解液红细胞裂解液红细胞裂解液红细胞裂解液 Cat NO :
8、Cat NO :Cat NO :Cat NO : NH4CL2009 规格规格规格规格 ：100 ML 产品简介产品简介产品简介产品简介： 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠 等的血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。 本裂解液经过优化配方， 在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核 的细胞。本裂解液的主要有效成分为氯化铵。本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽 类的红细胞。本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养
9、、细胞 融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 保存条件保存条件保存条件保存条件： 4保存，一年有效。室温保存， 3个月有效。 注意事项注意事项注意事项注意事项： 本裂解液为无菌产品，请注意保持无菌，使用本产品时宜在超净工作台内进行。 如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过 的溶液。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明使用说明使用说明使用说明： 对于组织细胞样品对于组织细胞样品对于组织细胞样品对于组织细胞样品： 1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2. 加入
10、3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml， 则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。 3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4离心效果更佳。 4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后 续的一些检测。 5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟， 弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4离心效 果更佳。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等
11、后续实验。 对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤： 1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2. 对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操 作均可。 3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。 4. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4离心效果更佳。 5. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后
12、续的一些检测。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 D D D DATA ATA ATA ATA S S S SHEETHEETHEETHEET 本品用于 RNA 和 DNA 的提取 天津市灏洋生物制品科技有限责任公司TIAN JIN HAO YANG BIOLOGICAL MANUFACTURE CO.,LTD 天津市南开区白堤路 236 号中国医学科学院生物工程研究所 2 号楼 2 层 Tel: 86-22-87893249 Fax: 86-22-87893403 87894017 技术服务热线： （0）15822691119 15822121119 QQ
13、:387745440 2572212016 E-mail: 灏洋生物 TBDsciences 3 说明说明说明说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一 些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的 离心管 对于血液样品对于血液样品对于血液样品对于血液样品： 1. 取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 2. 加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml， 则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂
14、解1-2分钟 已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进 红细胞裂解。 3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4离心效果更佳。 4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后 续的一些检测。 5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟， 弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4离心效 果更佳。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 注意注意注意注意：对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入 10倍血液体积的红细胞裂解液，并在室温或4裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够， 对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇 动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。 对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤： 1. 每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-
