王镜岩生物化学讲义 酶

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1、第四章 酶酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。1957 巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。1 分子 2 分子乙醇+2 分子 从 始，经过 12 种酶催化，12 步反应，生成乙醇。1897 弟证明发酵与细胞的活动无关，不含细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵。1913 出米氏学说酶促动力学原理。1926 次从刀豆中提出脲酶结晶，并证明具有蛋白质性质。1969 化学合成核糖核酸酶。1967从 发现第 I、第 限制性核酸内切酶。1986 现四膜虫细胞大核期间 26S 体具有自我剪接功能。 335限制作用 修饰作用53 5335 35第一节 酶学概论一、 酶的生物学意义大肠杆菌

2、生命周期 20 分钟，生物体内化学反应变得容易和迅速进行的根本原因是体内普通存在生物催化剂酶。没有酶，生长、发育、运动等等生命活动就无法继续。限制性核酸内切酶（限制、 酶的概念及其作用特点1、 酶是一种生物催化剂酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。生物催化剂 ：酶(核（糖）酶(，脱氧核（糖）酶(2、 酶催化反应的特点（1） 、 催化效率高酶催化反应速度是相应的无催化反应的 108，并且至少高出非酶催化反应速度几个数量级。（2） 、 专一性高酶对反应的底物和产物都有极高的专一性，几乎没有副反应发生。（3） 、 反应条件温和温度低于 100，正常大气压，中性 境。（4）

3、、 活性可调节根据据生物体的需要，许多酶的活性可受多种调节机制的灵活调节，包括：别构调节、酶的共价修饰、酶的合成、活化与降解等。（5） 、 酶的催化活性离不开辅酶、辅基、金属离子3、 酶与非生物催化剂相比的几点共性：催化效率高，用量少（细胞中含量低） 。不改变化学反应平衡点。降低反应活化能。 4非催化过程及催化过程自由能的变化反应前后自身结构不变。催化剂改变了化学反应的途径，使反应通过一条活化能比原途径低的途径进行，催化剂的效应只反映在动力学上（反应速度） ，不影响反应的热力学（化学平衡） 。三、 酶的化学本质（一） 酶的蛋白质本质经典概念：所有的酶都是蛋白质，酶是具有催化功能的蛋白质，因此酶

4、具有蛋白质的一切共性。1、 酶的蛋白质组成有些酶仅由蛋白质组成，例如，脲酶、溶菌酶、淀粉酶、脂肪酶、核糖核酸酶等有些酶不仅含有蛋白质（酶蛋白） ，还含有非蛋白质成分（辅助因子） ，只有酶蛋白与辅助因子结合形成复合物（全酶）才表现出酶活性，如超氧化物歧化酶 +） 、乳酸脱氢酶（）酶的专一性由酶蛋白的结构决定，辅助因子传递电子或某些化学基团。2、 酶的辅助因子酶的辅助因子主要有金属离子（+、+ 、 +、 、+、+、+ 、K +、 、+ 、+等）和有机化合物。辅酶：与酶蛋白结合较松，可透析除去。辅基：与酶蛋白结合较紧。酶 辅助因子 氧化物酶 I 型限制性核酸内切酶 肽酶 235 表 4些酶的辅助因子

5、（金属离子）表 4基团反应中的辅酶和辅基。酶蛋白决定酶专一性，辅助因子决定酶促反应的类型和反应的性质。比如，可与多种酶蛋白结合，构成专一性强的乳酸脱氢酶、醇脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶。生物体内酶种类很多，而辅助因子种类却很少，原因是一种辅助因子可与多种酶蛋白结合。（二） 酶（具有催化功能的 980 以前，已知所有的生物催化剂，其化学本质都是蛋白质。80 年代初，美国科罗拉多大学博尔德分校的 美国耶鲁大学 自独立发现 有生物催化功能，此发现被认为是近十年生化领域最令人鼓舞的发现，此二人分亨 1989 诺贝尔化学奖。类：自我剪接 自我剪切 催化分子间反应按酶蛋白的亚基组成及结构特点分类1

6、、 单体酶由一条或多条共价相连的肽链组成的酶分子牛胰 单链鸡卵清溶菌酶 单链胰凝乳蛋白酶 三条肽链单体酶种类较少，一般多催化水解反应。2、 寡聚酶由两个或两个以上亚基组成的酶，亚基可以相同或不同，一般是偶数，亚基间以非共价键结合。含相同亚基的寡聚酶苹果脱胱氢酶（鼠肝） ，2 个相同的亚基含不同亚基的寡聚酶琥珀酸脱氢酶（牛心） ，2 个亚基寡聚酶中亚基的聚合，有的与酶的专一性有关，有的与酶活性中心形成有关，有的与酶的调节性能有关。大多数寡聚酶是胞内酶，而胞外酶一般是单体酶。3、 多酶复合体由两个或两个以上的酶，靠非共价键结合而成，其中每一个酶催化一个反应，所有反应依次进行，构成一个代谢途径或代谢

7、途径的一部分。如脂肪酸合成酶复合体。例如：大肠杆菌丙酮酸脱氢酶复合体由三种酶组成丙酮酸脱氢酶（E 1） 以二聚体存在 29600二氢硫辛酸转乙酰基酶（E 2） 70000二氢硫辛酸脱氢酶（E 3） 以二聚体存在 256000复合体：12 个 聚体 249600024 个 体 24700006 个 聚体 1256000 总分子量 560 万4、 多酶融合体一条多肽链上含有两种或两种以上催化活性的酶，这往往是基因融合的产物。例如：天冬氨酸激酶 融合体（双头酶）该酶是四聚体 4，每条肽链含两个活性区域：酶，C 端区域是高 氢酶。五、 酶在细胞中的分布一个细胞内含有上千种酶，互相有关的酶往往组成一个酶

8、体系，分布于特定的细胞组分中，因此某些调节因子可以比较特异地影响某细胞组分中的酶活性，而不使其它组分中的酶受影响。1. 分布于细胞核的酶核被膜 酸性磷酸酶染色质 三磷酸核苷酶核仁 核糖核酸酶核内可溶性部分 酵解酶系、乳酸脱氢酶2. 分布于细胞质的酶参与糖代谢的酶 酵解酶系磷酸戊糖途径酶系参与脂代谢的酶 脂肪酸合成酶复合体参与 白质的酶 基转移酶参与核酸合成的酶 核苷激酶 核苷酸激酶3. 分布于内质网的酶光滑内质网 胆固醇合成酶系粗糙内质网 蛋白质合成酶系（细胞质一侧）4. 分布于线粒体的酶外膜：酰基辅酶 A 合成酶内膜：氢酶基质：三羧酸循环酶系脂肪酸 分布于溶酶体的酶水解蛋白质的酶水解糖苷类的

9、酶水解核酸的酶水解脂类的酶6. 标志酶有些酶只分布于细胞内某种特定的组分中，核： 尼克酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶，功能：物合成线粒体：琥珀酸脱氢酶（电子转移、三羧酸循环）溶酶体：酸性磷酸酶（细胞成分的水解）微粒体：（核蛋白体、多核蛋白体、内质网）酸脱氢酶第二节 酶的国际分类及命名一、 习惯命名1961 年 6 以前使用的酶沿用习惯命名1.（绝大多数酶）依据底物来命名如：催化蛋白质水解的酶称蛋白酶。催化淀粉水解的酶称淀粉酶。2. 依据催化反应的性质命名如：水解酶、转氨酶3 结合上述两个原则命名，琥珀酸脱氢酶。4. 有时加上酶的来源如：胃蛋白酶、牛胰凝乳蛋白酶习惯命名较简单，但缺乏系统性。二、 国际

10、系统命名系统名称应明确标明酶的底物及催化反应的性质。如：草酸氧化酶（习惯名） ，系统名称： 草酸：氧氧化酶又如：谷丙转氨酶（习惯名） ，系统名： 丙氨酸：氨酸+戊二酸 酮酸三、 国际系统分类法及编号（号）原则：将所有酶促反应按性质分为六类，分别用 1、2、3、4、5、6 表示。再根据底物中被作用的基团或键的特点，将每一大类分为若干个亚类，编号用1、2、3，每个亚类又可分为若干个亚一亚类，用编号 1、2、3表示。每一个酶的编号由 4 个数字组成，中间以“”隔开。第一个数字表示大类，第二个数字表示亚类，第三个表示亚四个数字表示在亚、 氧化还原酶类催化氧化还原反应： A2H+B=A+B2氧化还原酶（

11、 ， 习惯名：乳酸脱氢酶图2、 转移酶类=A+戊二酸氨基移换酶（， 习惯名： 谷丙转氨酶图3、 水解酶类催化水解反应，包括淀粉酶、核酸酶、蛋白酶、脂酶。亮氨酸氨基肽水解酶（， 习惯名： 肽酶。4、 裂合酶类（裂解酶）催化从底物上移去一个基团而形成双键的反应或其逆反应二磷酸酮糖裂合酶（， 习惯名：醛缩酶5、 异构酶（化同分异构体相互转化，6构酶6、 合成酶（连接酶）催化一切必须与 解相偶联、并由两种物质合成一种物质的反应。 4的国际分类大类和亚类举例：乙醇脱氢酶的分类编号是 乳酸脱氢酶 氧化还原第二个数字表示反应基团：醇基第三个数字表示电子受体：或 四个数字表示此酶底物：乙醇，乳酸，苹果酸。前面

12、三个编号表明这个酶的特性：反应性质、底物性质（键的类型）及电子或基团的受体，第四个编号用于区分不同的底物。酶的物种和组织的差异来自不同物种或同一物种不同组织或不同细胞器的同一种酶，虽然它们催化同一个生化反应，但它们的一级结构可能不相同，有时反应机制也可能不同，可是无论是酶的系统命名法还是习惯命名法，对这些均不加以区别，而定为相同的名称，这是因为命名酶的根据是酶所催化的反应。例如， 管来源如何，均催化如下反应2H+H 22 由过氧化氢酶催化、分解它们有同一个名称和酶的编号 真核生物细胞质中 真核生物线粒体中自牛红细胞与猪红细胞的，其一级结构也有很大不同。因此，在讨论一个具体的酶时，应对它的来源与名称一并加以说明。第三节 酶促反应动力学酶促反应动力学是研究酶促反应的速度以及影响酶促反应速度的各种因素，包括低物浓度、酶浓度、度、激活剂与抑制剂、等。一、 酶的量度酶的含量不能直接用重量和摩尔数表示（不纯、失活、分子量不知） ，而采用酶的活力单位表示1、 酶活力与酶促反应速度酶活力：