食品中胭脂虫红色素（胭脂红酸）的测定例

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1、胭脂虫红色素是以醌类色素胭脂红酸为主要成分的红色染料，从胭脂虫（原产于中南美洲的昆虫）中提炼而得。被收录于食品卫生法 规定的现有添加物明细表中（*1） ，目前广泛应用于食品、药品、医药部外品、化妆品等众多领域。 卫生试验法中规定胭脂虫红色素的试验方法为TLC法，但是作为参考方法，也介绍了使用HPLC的测定例（*2） 。 此次，根据这一测定条件，使用HPLC-DAD对食品中的胭脂红酸进行了测定，在胭脂红酸的定性方面，除了峰的保留时间外，还根据 DAD吸收光谱进行了确认。 （*1） 现有添加物名簿收录品种明细表、厚生省生活卫生局通知 卫化第56号（1996年5月23日） （*2） 卫生试验法注解

2、2010（日本药学会编） 食品中胭脂虫红色素食品中胭脂虫红色素(胭脂红酸胭脂红酸)的测定例的测定例 AS/LC-019 Page.1 胭脂红酸标准样品测定例胭脂红酸标准样品测定例 测定条件 色谱柱 ： HITACHI LaChrom C18 （5 m） 4.6 mm I.D. 150 mm 流动相 ： 0.1 mol/L柠檬酸缓冲液 （pH 3.6） / 甲醇 = 75 / 25 流速 ： 1.0 mL/min 柱温 ： 40 检测波长 ： DAD 220 700 nm （280 nm、495 nm）（*） 进样量 ： 20 L 重现性重现性（10 mg /L、n = 6） 线性线性 在胭脂红

3、酸标准样品的测定中，线性和重现性均在胭脂红酸标准样品的测定中，线性和重现性均 得到了良好的结果。得到了良好的结果。 保留时间（% RSD） 面积值（% RSD） 280 nm 0.05 0.19 495 nm 0.13 【标准样品测定例（ 10 mg/L）】 r2 = 1.0000 （280 nm） （0.1 10 mg/L） 【胭脂红酸结构式】 C22H20O13 = 492.39 Carminic acid 【胭脂红酸的光谱图】 （*）卫生试验法中列出的是在495 nm下的测定例。 r2 = 0.9999 （495 nm） （0.5 10 mg/L） mA U0 . 05 . 01 0 .

4、 01 5 . 02 0 . 0分0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 01 4 . 020 15 10 5 0 mAU Carminic acid 280 nm 0 2 4 6 10 8 12 14 700 500 300 nm min Carminic acid mA U0 . 05 . 01 0 . 01 5 . 02 0 . 0分0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 01 4 . 015 10 5 0 mAU Carminic acid 20 495 nm 0 5 10 15 20 0 2 4 6 8 10 浓

5、度（mg/L） 面积（104） 0 2 4 6 0 2 4 6 8 10 面积（104） 浓度（mg/L） mAU nm 300 500 700 0 5 10 15 20 Page.2 注意：本资料所示数据仅为测定例用数据而非可保证仪器性能的数据。 (2012/12) AS/LC-019 通过使用通过使用DAD可以对标准样品和食品样品中检出的峰进行吸收光谱的比较，结果果冻中光谱一致，而清凉饮料中光谱形状则不可以对标准样品和食品样品中检出的峰进行吸收光谱的比较，结果果冻中光谱一致，而清凉饮料中光谱形状则不 同。由此可以认为，在清凉饮料中检出的峰除胭脂红酸外，还混合了其他成分。进一步尝试使用纯度检

6、测功能检测了这个峰的同。由此可以认为，在清凉饮料中检出的峰除胭脂红酸外，还混合了其他成分。进一步尝试使用纯度检测功能检测了这个峰的 纯度，结果发现其纯度很低。综上认为，通过使用纯度，结果发现其纯度很低。综上认为，通过使用DAD可以增强定性能力。可以增强定性能力。 主要仪器配置： Chromaster 5110 泵、5210 自动进样器、5310 柱温箱、5430 DAD 【检出的峰和胭脂红酸标准样品的光谱图】 【检出的峰和胭脂红酸标准样品的光谱图】 【清凉饮料的测定例】 清凉饮料的前处理方法 食品中胭脂红酸的测定例食品中胭脂红酸的测定例 【果冻的测定例】 食品中胭脂虫红色素食品中胭脂虫红色素(

7、胭脂红酸胭脂红酸)的测定例的测定例 mA U0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 0分0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 01 4 . 012 4 0 mAU 8 Carminic acid 280 nm mA U0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 0分0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 01 4 . 012 4 0 mAU 8 Carminic acid 0 2 4 6 10 8 12 14 700 500 300 nm min Car

8、minic acid 495 nm mA U0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 0分0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 01 4 . 012 4 0 mAU 8 Carminic acid + （*） mA U0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 0分0 . 02 . 04 . 06 . 08 . 01 0 . 01 2 . 01 4 . 012 4 0 mAU 8 Carminic acid 700 500 300 nm 0 2 4 6 10 8 12 14 min Carm

9、inic acid + （*） 280 nm 495 nm 果冻 胭脂红酸 300 500 700 nm 300 500 700 nm 清凉饮料 胭脂红酸 （*）杂质 果冻的前处理方法 果冻 约 5 g 0.1 mol/L HCl、10 mL 超声提取 30 min 离心分离 3000 rpm、10 min 上清 稀释10倍（0.1 mol/L HC） 过滤（0.45 m 过滤器） 分析样品（20 L） 清凉饮料（含油性 成分） 1 mL 5 % 高氯酸1 mL 离心分离 10000 rpm、10 min 上清 1 mL 己烷 1 mL 振摇 1 min 离心分离 10000 rpm、10 min 取下层（水层）用 0.1 mol/L HC稀释10倍 过滤（0.45 m 过滤器） 分析样品（20 L）