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1、 金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司 Gproan Protein Engineering, Inc. 地址：北京经济技术开发区宏达北路 12 号创新大厦 B 座一区 406 邮编：100176 Add.: 1-406 B Tower, Innovation Building, No. 12 Hongda North Rd., Beijing Economic-Technological Development Area, Beijing, 100176, P.R. China 电话：010-62973378 传真：010-82895270 Tel:
2、+86-10-62973378 Fax: +86-10-82895270 网址： Web: GproanGproan重组重组蛋白酶蛋白酶 K 使用说明使用说明 产品简介产品简介： 蛋白酶 k 是现有蛋白酶中活性最高的品种，来源于林伯氏白色念球菌（Tritirachium album limber）的蛋白酶 K 基因。我公司自主研发和生产的产品是由重组酵母表达的基因重组蛋白质，在酶分子结构设计上，参考国内外文献，做了六个定点突变，理论上可以提高酶活性 50 倍。蛋白酶 K 是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。在 pH 4 到 pH 12 的条件下均有活性，在 SDS、尿素或 EDTA 存在时亦很
3、稳定。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键，用于生物样品中蛋白质的降解。此酶经脱色和色谱纯化去除了 RNA 和 DNA，也检测不到其它杂酶活性。由于蛋白酶 K 在尿素和 SDS 中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，主要用在基因诊断试剂盒、基因组 DNA 提取试剂盒、RNA 提取试剂盒中去除DNA 和 RNA 制备中的核酸酶， 也可以用于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质。譬如 DNA 疫苗和肝素的制备等。 货号：货号： GPK003001 批号批号： （生产日期） 规格：规格： 100 毫克普通装或客户定制 比活性值比活性值： 33.5 U/mg 蛋白。 来源种属
4、：来源种属： 林伯氏白色念球菌（Tritirachium album limber） 分子质量：分子质量： 29,730 贮存贮存和使用和使用： 干粉状态可在 04 C 条件下低温保藏。溶解后分装为适当体积，-20 C 贮存。运输 可在室温下进行。 正确的贮存条件下，干粉状态的有效期可达一年。液体状态在-20 C 有效期为半年。 打开包装使用后，如果在 28 C 环境下放置超过一周时间，建议过滤除菌或增加稳定剂 如 0.5%叠氮化钠，防止微生物污染。 稀释稀释缓冲液：缓冲液：纯水或者 50 mM 醋酸钠（pH 5.0)。 质量控制质量控制： 活性单位定义活性单位定义 37 C、pH 7.5 条
5、件下，每分钟可水解底物酪蛋白生成 1 mol 酪 氨酸的蛋白酶 K 的量，定义为一个单位（U）。 脱氧核糖核酸酶残留脱氧核糖核酸酶残留 以 DNA 为底物， 37 C 消化 6 小时以上， 未检测到脱氧核糖核 酸酶活性。 核糖核酸酶残留核糖核酸酶残留 25 C 消化 16 小时以上，未检测到核糖核酸酶活性。 参考文献参考文献： 金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司 Gproan Protein Engineering, Inc. 地址：北京经济技术开发区宏达北路 12 号创新大厦 B 座一区 406 邮编：100176 Add.: 1-406 B Tow
6、er, Innovation Building, No. 12 Hongda North Rd., Beijing Economic-Technological Development Area, Beijing, 100176, P.R. China 电话：010-62973378 传真：010-82895270 Tel: +86-10-62973378 Fax: +86-10-82895270 网址： Web: GproanGproan1. Kraus, E; et.al. Proteinase K from the Mold Tritirachium album limber, Spe
7、cificity and Mode of Action. Z. Physiol. Chem., 357:939; 1976. 2. Jany,KD, et al. Amino Acid Sequence of Proteinase K from the Mold, Tritirachium album limber. Proteinase K; a Subtilisin-related Enzyme with Disulfide Bonds. FEBS Letter, 199,139.1986. 生产和质控生产和质控： 1, 产品外观产品外观 2. 酶活测定和稳定性试验酶活测定和稳定性试验 (
8、1) 酶活测定 Sigma-Aldrich 方法： 金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司 Gproan Protein Engineering, Inc. 地址：北京经济技术开发区宏达北路 12 号创新大厦 B 座一区 406 邮编：100176 Add.: 1-406 B Tower, Innovation Building, No. 12 Hongda North Rd., Beijing Economic-Technological Development Area, Beijing, 100176, P.R. China 电话：010-62973378 传真：010-82895270 Tel: +86-10-62973378 Fax: +86-10-82895270 网址： Web: GproanGproan(2)纯度和消化蛋白测试（SDS-PAGE） 结果: 蛋白质纯度超过 99% （激光扫描 SDS-PAGE 胶） (3) 稳定性测试：（一年数据） 3232.432.833.233.634024681012 检测时间(月)检测时间(月)比活性（比活性（U/mg）液体液体 固体固体结论：冻干粉正确储存一年内活性不变；液体酶酶活半年内降低小于 5%。
